【生物】江苏省淮安市涟水县第一中学2020届高三10月月考

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江苏省淮安市涟水县第一中学2020届高三10月月考 一、单项选择题：本题共20小题，每小题2分，共计40分，每小题只有一个选项符合题意。 ‎ ‎1.下列关于糖类的叙述，错误的是 A.糖类是生物体生命活动所需能量的直接来源 B.构成淀粉、糖原和纤维素的单体均为葡萄糖 C.细胞识别与糖蛋白中蛋白质有关，也与糖链有关 D.二糖可以被进一步水解为更简单的化合物 ‎2.下列关于细胞内蛋白质和核酸的叙述，错误的是 A.核酸的合成需要相应蛋白质的参与 ‎ B.核酸和蛋白质的组成中都含有C、H、O、N元素 C.蛋白质的合成需要核酸的参与 ‎ D.高温会破坏蛋白质和核酸分子中肽键 ‎3.脂质与人体健康息息相关，下列叙述错误的是 A.分布在内脏器官周围的脂肪具有缓冲作用 B.摄入过多的反式脂肪酸会增加动脉硬化的风险 C.蛇毒中的磷脂酶因水解红细胞膜蛋白而导致溶血 D.胆固醇既是细胞膜的重要组分，又参与血液中脂质的运输 ‎4.下列关于真核细胞结构和功能的叙述，错误的是 A.组成细胞膜的基本支架是磷脂双分子层 B.高尔基体是细胞分泌蛋白质加工、分类和转运的场所 C.细胞能利用核孔实现核内外大分子物质的转运 D.在mRNA合成的同时都会有多个核糖体结合到mRNA上 ‎5.右图为一种溶质分子跨膜运输的示意图。下列相关叙述错误的是 A.载体①逆浓度运输溶质分子 B.载体①和②转运方式不同 C.载体②具有ATP酶活性 D.载体②转运溶质分子的速率比自由扩散快 ‎6.右图是探究酵母菌无氧呼吸产物的实验装置，甲瓶中加入‎10 g酵母菌和240 mL葡萄糖溶液，乙瓶中加入澄清石灰水。相关叙述正确的是 甲 乙 A.甲瓶中加入酵母菌和葡萄糖溶液后应立即与乙瓶相连通 B.实验中需控制葡萄糖溶液的浓度以保证酵母菌正常的活性 C.该实验结果说明酵母菌在无氧呼吸时能产生酒精 ‎ D.使乙瓶中澄清石灰水变浑浊的CO2来自于酵母菌线粒体 ‎7.下列有关内环境及稳态的叙述，错误的是 A.内环境的成分可包含CO2、尿素、神经递质等物质 B.内环境是机体进行生命活动和细胞代谢的主要场所 C.蛋白质、Na＋和Cl－是维持血浆渗透压的主要物质 D.小腿抽搐可能是由于内环境成分发生变化而引起的 ‎8.篮球比赛时，运动员出现的下列现象中，错误的是 A.打球配合默契主要是由下丘脑调控的 ‎ B.皮肤毛细血管舒张，体温保持相对稳定 C.胰岛A细胞分泌增强，肝糖原分解加快 ‎ D.大量出汗，抗利尿激素分泌减少 ‎9.如右图为突触传递示意图，下列叙述错误的是 A.①和③都是神经元细胞膜的一部分 B.②进入突触间隙需消耗能量 C.②发挥作用后被快速清除 D.②与④结合使③的膜电位呈外负内正 ‎10.如图为一种植物扦插枝条经不同浓度IAA浸泡30 min后的 生根结果(新生根粗细相近)，对照组为不加IAA的清水。‎ 下列叙述正确的是 A.对照组生根数量少是因为枝条中没有IAA B.四组实验中，300 mg/LIAA诱导茎细胞分化出根原基最有效 C.100mg/L与300 mg/LIAA处理获得的根生物量相近 D.本实验结果体现了IAA对根生长作用的两重性 ‎11.下列关于种群和群落的叙述，正确的是 A.种群是生物进化的基本单位，种群内出现个体变异是普遍现象 B.退耕还林、退塘还湖、布设人工鱼礁之后都会发生群落的初生演替 C.习性相似物种的生活区域重叠得越多，对资源的利用越充分 D.两只雄孔雀为吸引异性争相开屏，说明行为信息能够影响种间关系 ‎12.如右图是一种酵母通气培养的生长曲线，a、b是相同培养条件下两批次培养的结果，下列叙述合理的是 A.b批次的接种量可能高于a批次 B.a批次中可能有大量细菌污染 C.t1时两批次都会产生较多的乙醇 D.t2时两批次发酵液中营养物质剩余量相同 ‎13.我国生物多样性较低的西部沙漠地区生长着一种叶退化的药用植物锁阳，该植物依附在另一种植物果白刺的根部生长，从其根部获取营养物质。下列相关叙述正确的是 A.锁阳与小果白刺的种间关系为捕食 B.种植小果白刺等沙生植物固沙体现了生物多样性的间接价值 C.该地区生态系统的自我调节能力较强，恢复力稳定性较高 D.锁阳因长期干早定向产生了适应环境的突变，并被保留下来 ‎14.下列生物技术操作对遗传物质的改造，不会遗传给子代的是 A.将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，进行基因治疗 B.将花青素代谢基因导入植物体细胞，经组培获得花色变异植株 C.将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，培育出产低乳糖牛乳的奶牛 D.将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌，筛选获得基因工程菌 ‎15.如图为某次光合作用色素纸层析的实验结果，样品分别为新鲜菠菜叶 和一种蓝藻经液氮冷冻研磨后的乙醇提取液。下列叙述正确的是 A.研磨时加入SiO2过量会破坏叶绿素 B.层析液可采用生理盐水或磷酸盐缓冲液 C.在敞开的烧杯中进行层析时，需通风操作 D.实验验证了该种蓝藻没有叶绿素b ‎16.下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述，错误的是 A.精子在获能液中于‎37℃‎、5% CO2 条件下培养的目的是使精子获能 B.小鼠在特定光控周期条件下饲养，注射相关激素有促进超数排卵的作用 C.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质，因此发育成的个体没有形态学差异 D.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育 ‎17.如图为某一植物在不同实验条件下测得的净光合速率，下列假设条件中能使图中结果成立的是 A.横坐标是温度，甲表示较高CO2浓度，乙表示较低CO2浓度 B.横坐标是光照强度，甲表示较高CO2浓度，乙表示较低CO2浓度 C.横坐标是光波长，甲表示较高温度，乙表示较低温度 D.横坐标是CO2浓度，甲表示较高温度，乙表示较低温度 ‎18.为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力，某研究小组的实验过程如下图。下列叙述正确的是 A.过程①获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中 ‎ B.过程②需提高生长素的比例以促进芽的分化 C.过程③需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生 ‎ D.原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性 ‎19.下列关于人体神经调节和体液调节的叙述，正确的是 A.成年后生长激素不再分泌，身高不再增加 B.体内多种激素具有直接降低血糖的作用 C.与神经调节相比，体液调节通常作用缓慢、持续时间长 D.神经中枢只能通过发出神经冲动的方式调节相关器官的生理活动 ‎20.下列实验都需要使用光学显微镜进行观察，有关实验现象描述合理的是 实验标号 实验名称 观察到的实验现象 ‎①‎ 观察植物细胞的 镜检1：几乎整个紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞呈紫色；‎ 质壁分离和复原 镜检2：不同细胞质壁分离的位置、程度并不一致 ‎②‎ 观察多种多样的细胞 菠菜叶表皮细胞由细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核组成；人口腔上皮细胞具有细胞核和核糖体 ‎③‎ 观察细胞中脂肪液滴 花生子叶切片用苏丹Ⅲ染液染色后，在细胞内清晰可见橘黄色颗粒，细胞外看不到橘黄色颗粒 ‎④‎ 探究酵母菌种群数量的 动态变化 酵母细胞呈球形或椭圆形，细胞核、液泡和线粒体的形态、数目清晰可见 A.实验① B.实验② C.实验③ D.实验④‎ 二、多项选择题：本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。‎ ‎21.发生在叶肉细胞中的生理过程，不需要消耗ATP的是 A.水分解为氧气和还原氢 B.三碳化合物的还原 C.氧气和还原氢结合生成水 D.二氧化碳进入叶绿体中 ‎22.下图为高等动物细胞结构示意图，下列相关叙述正确的是 A.结构①的数量倍增发生于分裂前期的细胞中 B.具有单层生物膜的结构②与细胞分泌活动有关 C.RNA和RNA聚合酶穿过结构③的方向相同 D.④、⑤处的核糖体均由RNA和蛋白质组成 ‎23.有些实验可以通过染色改进实验效果，下列叙述合理的是 A.检测洋葱根尖分生区细胞有丝分裂时，可用龙胆紫溶液对细胞中染色体进行染色 B.在蔗糖溶液中加入适量红墨水，可用于观察白洋葱鳞片叶表皮细胞的质壁分离 C.观察菠菜叶肉细胞时，用甲基绿染色后叶绿体的结构更清晰 D.探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化时，可用台盼蓝染液区分菌体死活 ‎24.下图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述正确的是 A.可用灭活的仙台病毒诱导细胞融合 B.两两融合的细胞都能在HAT培养液中生长 C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产 D.细胞膜的选择透过性是细胞融合的基础 ‎25.下图为一富营养化河流生态修复工程的示意图，下列叙述正确的是 A.曝气可增加厌氧微生物降解有机污染物的能力 B.吸附基质增加了微生物附着的表面积，提高了净化效果 C.植物浮床有吸收水体氮、磷的能力，可减少富营养化 D.增加水体透明度，恢复水草生长是该修复工程的目标之一 ‎三、非选择题：本部分包括8题，除特别说明的每空1分，共计65分。‎ ‎26.如图是两种生活状态细胞的亚显微结构示意图，④为细胞核。请据图回答: （1）图一细胞能够分泌抗体，是由_______________增殖分化产生的。抗体从细胞内分泌到细胞外的过程体现了细胞膜具有_________________结构特点。 （2）图一细胞中具有双层膜的细胞结构是_____________(填序号)，④中染色质的主要化学成分是_________________。 （3）图二为洋葱鳞片叶外表皮细胞，将其置于的30%的蔗糖溶液中，在光学显微镜下结构⑨出现的变化是___________________。图二细胞中属于生物膜系统的结构有_________________(填序号)。 （4）有细胞有丝分裂有关，属于图一细胞特有而图二细胞没有的结构是______(填序号和名称)；蓝藻细胞与图一、图二细胞相比，在结构上最主要的区别在于___________________________。‎ ‎27.科研人员对猕猴桃果肉的光合色素、光合放氧特性进行了系列研究。图1为光合放氧测定装置示意图，图2为不同光照条件下果肉随时间变化的光合放氧曲线。请回答下列问题：‎ ‎（1）取果肉薄片放入含乙醇的试管，并加入适量_____________，以防止叶绿素降解。长时间浸泡在乙醇中的果肉薄片会变成白色，原因是_____________________________________。‎ ‎（2）图1中影响光合放氧速率的因素有_________________________‎ ‎。氧电极可以检测反应液中氧气的浓度，测定前应排除反应液中_________________________的干扰。‎ ‎（3）图1在反应室中加入NaHCO3 的主要作用是___________________。若提高反应液中NaHCO3 浓度，果肉放氧速率的变化是________ （填“增大”、“减小”、“增大后稳定”或“稳定后减小”）。‎ ‎（4）图2中不同时间段曲线的斜率代表光合放氧的速率，对15 ~ 20 min 曲线的斜率几乎不变的合理解释是_________________________________________________________________________;若在20 min 后停止光照，则短时间内叶绿体中含量减少的物质有__________________________（填序号：①C5 ②ATP ③[H] ④C3 ），可推测20 ~ 25 min 曲线的变化趋势为____________ （填“上升”、“下降”或“保持水平”）。‎ ‎28.图1是某生态系统部分生物关系示意图。请回答下列问题：‎ ‎（1）生态系统最基本的生物成分是_____________。图1由乔木、草本植物、蝗虫、蜘蛛和杂食性鸟构成的食物网中，杂食性鸟分别处于第__________营养级。‎ ‎（2）从图1所示的营养关系分析，属于分解者的有____________________。有机碎屑被彻底分解产生的________________________（至少写出两类）等供生态系统循环利用。‎ ‎（3）由于乔木的遮挡程度不同，导致了不同区域地表的草本植物、真菌等生物种类和数量有一定差异，地表生物的这种区域差异分布体现了群落具有__________结构。‎ ‎（4）下列属于该区域东亚飞蝗种群基本特征的有__________（填序号）。‎ ‎①空间分布 ②迁入率 ③互利共生 ④物种丰富度 ⑤种群密度 ‎（5）图2是图1生态系统中某两个营养级（甲、乙）的能量流动示意图，其中a～e表示能量值。乙粪便中食物残渣的能量包含在_______________（填图2中字母）中，乙用于生长、发育及繁殖的能量值可表示为____________________（用图2中字母和计算符号表示）。‎ ‎29.甲、乙、丙三人在一次社区健康日活动中检测出尿糖超标，为进一步弄清是否患糖尿病，依据规范又进行了血液检测。图1、图2所示为空腹及餐后测定的血糖及胰岛素浓度。糖尿病血糖浓度标准为：空腹 ≥ 7.0 mmol/L，餐后2h ≥ 11.1 mmol/L，请回答下列问题：‎ ‎（1）正常人进食后血糖浓度上升，胰岛素分泌增多。胰岛素可促进血糖进入细胞内__________、合成糖原或转变为非糖物质，并抑制______________及非糖物质转化为葡萄糖；同时胰岛A细胞分泌______________受抑制，使血糖浓度下降。‎ ‎（2）据图初步判断__________是糖尿病患者，需复查血糖。患者常因血糖浓度升高致细胞外液渗透压升高，______________产生渴感，表现为多饮。‎ ‎（3）除糖尿病外，尿糖超标的原因还可能有__________（填序号）。‎ ‎①一次性摄糖过多 ②低血糖患者 ③抗利尿激素分泌不足 ④肾小管重吸收功能障碍 ‎（4）结合图1、图2分析，乙出现上述检测结果的原因可能有__________（填序号）。‎ ‎①自身抗体与胰岛素结合 ‎②自身效应T细胞持续杀伤胰岛B细胞 ‎③自身抗体竞争性结合靶细胞膜上的胰岛素受体 ‎④胰岛B细胞膜上载体对葡萄糖的转运能力下降 ‎30.利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题：‎ ‎（1）对1号猪使用_____________处理，使其超数排卵，收集并选取处在__________时期的卵母细胞用于核移植。‎ ‎（2）采集2号猪的组织块，用______________处理获得分散的成纤维细胞，放置于‎37℃‎的CO2培养箱中培养，其中CO2的作用是__________________。‎ ‎（3）为获得更多基因编辑猪，可在胚胎移植前对胚胎进行__________________。产出的基因编辑猪的性染色体来自于_________号猪。‎ ‎（4）为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用的方法有__________（填序号）。‎ ‎①DNA测序 ②染色体倍性分析 ③体细胞结构分析 ④抗原—抗体杂交 ‎31.为探究玉米籽粒发芽过程中一些有机物含量的变化，研究小组利用下列供选材料用具进行了实验。材料用具：玉米籽粒；斐林试剂，双缩脲试剂，碘液，缓冲液，淀粉，淀粉酶等；研钵，水浴锅，天平，试管，滴管，量筒，容量瓶，显微镜，玻片，酒精灯等。请回答下列问题：‎ ‎（1）为了检测玉米籽粒发芽过程中蛋白质（肽类）含量变化，在不同发芽阶段玉米提取液中，分别加入__________试剂，比较颜色变化。该实验需要选用的器具有__________（填序号）。‎ ‎①试管 ②滴管 ③量筒 ④酒精灯 ⑤显微镜 ‎（2）为了检测玉米籽粒发芽过程中淀粉含量变化，将不同发芽阶段的玉米籽粒纵切，滴加_______，进行观察。结果显示，胚乳呈蓝色块状，且随着发芽时间的延长，蓝色块状物变小。由此可得出的结论是__________________________________________________________。‎ ‎（3）为了验证上述蓝色块状物变小是淀粉酶作用的结果，设计了如下实验；在1~4号试管中分别加入相应的提取液和溶液（如下图所示），‎40℃‎温育30 min后，分别加入斐林试剂并‎60℃‎水浴加热，观察试管内颜色变化。‎ 请继续以下分析：‎ ‎①设置试管1作为对照，其主要目的是_________________________________。‎ ‎②试管2中应加入的X是____________的提取液。‎ ‎③预测试管3中的颜色变化是_____________________。若试管4未出现预期结果（其他试管中结果符合预期），则最可能的原因是_______________________________。‎ ‎32.图1为T细胞通过表面受体（TCR）识别抗原递呈细胞呈递的肿瘤抗原后被激活，进而攻击肿瘤细胞的示意图。图2为肿瘤细胞的一种免疫逃逸机制示意图。肿瘤细胞大量表达PD-L1，与T细胞表面的PD-1结合，抑制T细胞活化，逃避T细胞的攻击。请回答下列问题：‎ ‎（1）图1中抗原递呈细胞通过_________方式摄取肿瘤抗原。‎ ‎（2）图1中T细胞识别肿瘤抗原后被激活，增殖并_______形成效应T细胞群和______细胞群。‎ ‎（3）图1中效应T细胞通过TCR只能识别带有同样抗原的肿瘤细胞，故发挥的免疫作用具有________性，效应T细胞分泌毒素，使肿瘤细胞______________死亡。‎ ‎（4）为阻断图2中肿瘤细胞的免疫逃逸通路，利用单克隆抗体制备技术，制备了抗PD-L1抗体。该抗体注入体内后通过__________传送与______________结合，可解除T细胞的活化抑制。‎ ‎（5）为应用于肿瘤的临床免疫治疗，需对该抗体进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是______________________________________。‎ ‎33.为生产具有特定性能的α-淀粉酶，研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因（1 656个碱基对），利用基因工程大量制备琢α-淀粉酶，实验流程见下图。请回答下列问题：‎ ‎（1）利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前，需先获得细菌的 。‎ ‎（2）为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的 端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的是 。‎ ‎（3）进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中 的设定与引物有关， 的设定与扩增片段的长度有关。（填序号）‎ ‎①变性温度 ②退火温度 ③延伸温度 ④变性时间 ⑤退火时间 ⑥延伸时间 （4） 下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：‎ 图中虚线框内mRNA片段包含 个密码子，如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有 种。‎ ‎（5）获得工程菌表达的α-淀粉酶后，为探究影响酶活性的因素，以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性，结果如下：‎ 缓冲液 ‎50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4‎ ‎50 mmol/LTris-HCl ‎50 mmol/LGly-NaOH pH ‎6.0‎ ‎6.5‎ ‎7.0‎ ‎7.5‎ ‎7.5‎ ‎8.0‎ ‎8.5‎ ‎9.0‎ ‎9.0‎ ‎9.5‎ ‎10.0‎ ‎10.5‎ 酶相对活性%‎ ‎25.4‎ ‎40.2‎ ‎49.8‎ ‎63.2‎ ‎70.1‎ ‎95.5‎ ‎99.5‎ ‎85.3‎ ‎68.1‎ ‎63.7‎ ‎41.5‎ ‎20.8‎ 根据上述实验结果，初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为 。‎ 参考答案 一、单项选择题（本部分共20题，每题2分，共40分。每题只有一个选项最符合题意。）‎ 题号 ‎1‎ ‎2‎ ‎3‎ ‎4‎ ‎5‎ ‎6‎ ‎7‎ ‎8‎ ‎9‎ ‎10‎ 答案 A D C D C B B A D B 题号 ‎11‎ ‎12‎ ‎13‎ ‎14‎ ‎15‎ ‎16‎ ‎17‎ ‎18‎ ‎19‎ ‎20‎ 答案 A A ‎ B ‎ A D C B D C A 二、多项选择题（本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。）‎ 题号 ‎21‎ ‎22‎ ‎23‎ ‎24‎ ‎25‎ 答案 ACD BD ABD AC BCD 三、非选择题（本部分包括8题，除特别说明的每空1分，共计65分。）‎ ‎26.（8分）‎ ‎（1） 造血干细胞 ， 一定的流动性 。‎ ‎（2） ④⑤ ， DNA和蛋白质 。‎ ‎（3） 体积缩小，颜色变深 ， ③④⑤⑦⑧⑨ 。 ‎ ‎（4） ⑥中心体 ， 没有核膜包被的细胞核 。‎ ‎27.（9分）‎ ‎（1） CaCO3或碳酸钙 ， 光合色素溶解于乙醇中 。‎ ‎（2） 光照、温度、CO2浓度 （至少写出两种）， 溶解氧 。‎ ‎（3） 提供CO2 ， 增大后稳定 。‎ ‎（4） 光合产氧量与呼吸耗氧量相等 ，‎ ‎ ①②③ ， 下降 。 ‎ ‎28.（8分）‎ ‎（1） 生产者 ， 二、三、四 。‎ ‎（2） 大型真菌、跳虫 ， ‎ ‎ 无机盐、CO2、水 （至少写出两种）。 ‎ ‎（3） 水平 。 ‎ ‎（4） ①②⑤ 。‎ ‎（5） c ， a-b 。‎ ‎29.（8分）‎ ‎（1） 氧化分解 ， ‎ ‎ 肝糖原分解 ， ‎ ‎ 胰高血糖素 。‎ ‎（2） 甲、乙 ， 大脑皮层 。‎ ‎（3） ①④ 。 ‎ ‎（4） ①③ （2分）。‎ ‎（4） 。‎ ‎30.（8分）‎ ‎（1） 促性腺激素 ， ‎ ‎ 减数第一次分裂中期 。‎ ‎（2） 胰蛋白酶 ， 维持培养液的pH 。‎ ‎（3） 分割 ， 2 。‎ ‎（4） ①④ （2分）。‎ ‎31.（8分）‎ ‎（1） 双缩脲 ， ①②③ 。‎ ‎（2） 碘液 ， ‎ ‎ 玉米发芽时，胚乳中的淀粉逐渐减少 。 ‎ （3） ‎ ① 排除实验所用的淀粉溶液中没有还原糖 。 ‎ ‎② 发芽前的玉米 。‎ ‎③ 蓝色变为砖红色 ， ‎ ‎ 淀粉酶已经失去活性 。‎ ‎32.（8分）‎ ‎（1） 胞吞 。‎ ‎（2） 分化 ， 记忆 。‎ ‎（3） 特异 ， 裂解 。‎ ‎（4） 体液 ， 肿瘤细胞表面的PD-L1 。‎ ‎（5） 降低免疫排斥反应 。‎ ‎33.（8分）‎ ‎（1） 基因组DNA 。‎ ‎（2） 5， ， ‎ ‎ 使DNA片段定向插入表达载体中，不会发生自我连接和随意连接 。‎ ‎（3） ② ， ⑥ 。 （4） 8 ， 13 。‎ ‎（5） pH为8.5，缓冲溶液为50 mmol/L的Tris-HCl 。‎