补充海参小分子肽对运动小鼠血睾酮及睾丸组织氧化应激的影响_亓新学

补充海参小分子肽对运动小鼠血睾酮及睾丸组织氧化应激的影响_亓新学

第27卷第2期西昌学院学报·自然科学版Vol.27，NO.2第20132期年6月JournalofXichangCollege·SocialScienceEditionJun.，2013补充海参小分子肽对运动小鼠血睾酮及睾丸组织氧化应激的影响亓新学，郭光明（阜阳职业技术学院，安徽阜阳236031）【摘要】目的：探讨海参小分子肽对运动小鼠血清睾酮含量以及睾丸组织丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的影响。方法：30只KM雄性小鼠随机分为安静对照组（C）、有氧运动组（T1）、补充海参小分子肽有氧运动组（T2）、无氧运动组（T3）和补充海参小分子肽无氧运动组（T4），其中T1、T2、T3、T4组分别进行不同方式的跑台训练，持续6周后，观察各组小鼠血清睾酮和睾丸组织MDA、SOD含量。结果：运动组小鼠血睾酮、SOD、MDA含量都有变化，但T3、T4组较T1、T2组变化显著，T1、T3组较T2、T4组变化显著。结论：补充海参小分子肽可以改善运动训练尤其是有氧运动训练导致的小鼠血清睾酮水平下降。【关键词】海参小分子肽；睾丸组织；睾酮；氧化应激【中图分类号】TQ464.7【文献标识码】A【文章编号】1673-1891（2013）02-0089-04海参归属于无脊椎动物棘皮动物门,是海参纲雄性KM小鼠30只，鼠龄8周，体重29±4.50g，动物的泛称。海参干燥体壁的有机成分中蛋白质由大连医科大学动物实验中心提供，动物购回后，含量高达90%。无机成分中含铁、铜、钼、硒等多种适应性饲养1周，在第三天后以8m/min、大约进行[1]微量元素，海参的蛋白中含有人体所需的全部氨10~15分钟（min）的适应性训练，将30只小鼠随机分[2]基酸,而且其中必需氨基酸的比例也非常高，是非为5组：安静对照组（C）、有氧运动组（T1）、补充海参常好的优质蛋白。人类很早就把海参利用到养生、小分子肽有氧运动组（T2）、无氧运动组（T3）和补充保健和治疗上。明代出版的《食物本草》一书中作海参小分子肽无氧运动组（T4）。整个实验过程自由者指出海参有主补元气、滋益五脏六腑和祛虚损的饮食，采用国家标准小鼠饲料喂养，饮用自来水。[3]养生功能。清代《本草纲目拾遗》、《本草从新》等饲养室温度20±3℃，湿度40%，自然采光。[4]许多典籍则将海参列为补益药物之中。1.2海参小分子肽补充方式海参小分子肽是海参经蛋白酶水解并精制后实验所用的海参小分子肽购于大连非得生物产得到的以小分子肽为主、多种功效成分共存的蛋白业公司，主要成分为氨基酸，粘多糖。T2组和T4组每质水解产物,具有抗疲劳、延缓衰老等诸多生理功天中午按2mg/100g体重剂量灌胃，每周6次，共6周，能。海参小分子肽具有易消化吸收、生物效价高、C组、T1、T3组每天同一时间以相同体积自来水灌胃。食用安全等优点。海参小分子肽的多肽主要是由1.3运动方式相对分子质量2000以下的小肽组成,具有很强的抗对照组：常规饲养不训练，每天换底料，检查水[5]氧化能力。和食物状况。大量研究表明，长期的大运动量训练可以导致T1、T2有氧组：共12只，分两组进行跑台训练，训机体的血清睾酮含量下降，并且可以导致机体的脂练之前热身5min，第一周运动速度为8m/min，运动时质过氧化反应加强以及抗氧化能力的下降，这些因间10~15min，到第三周运动速度增至12m/min，以后[6，9]素又进一步影响机体的恢复与体能，因此运动训保持不变，运动时间为60min，坡度皆为0，每周训练6练导致的机体血清睾酮水平降低已经成为长期困天，每天下午训练，共6周。具体训练方案见表1：扰运动员的一大难题。近年来，人们通过营养补充表1小鼠有氧运动训练方案来改善机体的血清睾酮水平取得了一定的研究成实验周（w）123456效，本研究通过对不同运动方式小鼠补充海参小分运动速度（m/min）81012121212子肽，观察跑台训练后血清睾酮和睾丸组织MDA、运动时间（min）10~154050606060SOD含量的变化，目的在于对海参小分子肽在运动坡度000000领域的应用提供指导，以及为运动营养品的开发提T3、T4无氧组：共12只，采用间歇训练方式，为供依据。1：4min的运动：休息比例训练，即训练1min休息41材料与方法min，训练速度为极限强度，间歇休息速度为10m/1.1实验动物min。具体为：每次锻炼前先用15m/min的速度热身收稿日期：2013-04-11作者简介：亓新学（1973-），男，安徽阜阳人，讲师，硕士研究生。研究方向：康复医学。\n·90·西昌学院学报·自然科学版第27卷跑10分钟，然后按照下列速度跑1分钟，间歇休息#P<0.05，T3与T4相比较#P<0.05.4min，共五次。训练结束后进行15分钟10m/min慢2.2各组小鼠睾丸组织SOD、MDA含量对比跑，使体内堆积的乳酸得以及时消除。训练方案见由表4可见，经过6周不同形式的跑台运动训表2，按照循序渐进的原则，训练速度从15m/min逐练后，与对照组相比，实验组4组小鼠SOD含量变化渐递增至25m/min，每周6天，训练6周。非常显著；相同运动形式组别之间相比，T2与T1相比表2小鼠无氧运动训练方案SOD含量变化差异显著，T4与T3之间相比SOD含量实验周（w）123456变化非常显著；不同运动形式之间相比较，有氧运运动速度（m/min）152025252525动组与无氧运动组之间相比SOD含量变化差异非坡度000000常显著;经过6周不同形式的跑台运动训练后，与对1.4取样与测试照组相比，T1组MDA含量变化非常显著，T2组变化于第6周训练结束24小时内，所有训练小鼠称不显著，T3，T4组MDA含量变化非常显著；相同运动重，乙醚麻醉，从眼静脉取血0.5~1.5mL，低温离心分形式之间相比，T1，T2组MDA含量变化有非常显著离血清，置于4℃冰箱中保存。放射免疫分析法测差异，T3，T4组MDA含量变化也有显著差异；不同运定血清睾酮含量，试剂盒由南京建成生物公司提动形式组别之间相比较，有氧运动组与无氧运动组供，测试严格按照试剂盒说明书操作。同时快速取之间相比较差异非常显著。出双侧睾丸，放置于有冰块的盘中，以9倍于每1克表4各组小鼠睾丸组织SOD、MDA变化对比表睾丸重量的生理盐水比例匀浆,制备10%睾丸组织组别SOD（U/mgpro）MDA（nmol/mgpro）匀浆液，离心15min取上清液，以测定MDA、SOD各C142.36±7.965.16±0.38项指标，MDA采用硫代巴比妥酸法水平、SOD采用T1121.63±7.55**6.26±0.24**黄嘌呤氧化酶法，组织蛋白定量：双缩脲法。安静T2128.59±9.08**#5.61±0.45##对照组于安静时取样，处理方法同上。T391.05±5.04**8.14±0.20**1.5统计学分析T4106.84±3.81**##7.31±0.26**##所有数据以平均数±标准差（x±s）表示，用注：与对照组相比较，**P<0.01，*P<0.05；T1与T2相比SPSS11.5软件处理，采用方差分析法，差异具有显著较，#P<0.05，T3与T4相比较#P<0.05，##P<0.01。性水平为P<0.05，非常显著性水平为P<0.01。3讨论2结果3.1补充海参小分子肽对运动小鼠血清睾酮水平的2.1各组小鼠血清睾酮含量、睾丸重量对比影响由表3可见，6周不同形式的跑台训练后，与对从实验数据来看，本研究的造模是比较成功照组小鼠相比较，T1组血清睾酮含量变化显著，T2组的，经过6周的不同形式的跑台训练以及海参小分血清睾酮变化不显著，T3，T4组血清睾酮含量变化非子肽的补充后，对由运动导致的低血清睾酮水平，常显著；相同运动形式组别之间相比较，有氧运动补充海参小分子肽的组别血清睾酮都得到了提高，组别之间相比较变化显著，无氧运动组别之间相比并且对有氧运动导致的睾酮含量降低的提高更加较变化显著；不同运动形式组别之间相比较，有氧明显。说明大强度训练造成机体机能的状态不佳，运动与无氧运动组别之间相比较血清睾酮含量变海参小分子肽可以增强睾酮在运动过程中的升高化非常显著。6周不同形式的跑台运动训练后，与幅度。对照组相比较，实验组4组小鼠睾丸重量没有显著3.2补充海参小分子肽对运动小鼠睾丸组织氧化应变化。激的影响表3各组小鼠血清睾酮含量、睾丸重量对比表海参小分子肽是从海参体内提取的一种小分组别睾酮含量（nmol/L）睾丸重量（x±s，g）子肽，它主要由分子量2000Da以下的小肽组成，卢[10]C41.69±1.470.266±0.040连华，周景等发现海参肽能明显延长小鼠的负重T138.68±1.45*0.264±0.058游泳时间，显著降低运动后小鼠的血尿素氮含量和T241.66±1.83#0.267±0.039血乳酸水平，同时提高了肝糖原含量，证明可以增[11]T332.32±2.51**0.259±0.053强小鼠抗疲劳的能力。付学军，崔志峰研究表T434.94±0.92**#0.261±0.043明，低分子量海参肽对小鼠体重无显著影响，但能注：与对照组相比，*P<0.05，**P<0.01；T2与T1相比较，明显延长小鼠的负重游泳时间和转棒时间。但它\n第2期亓新学，郭光明：补充海参小分子肽对运动小鼠血睾酮及睾丸组织氧化应激的影响·91·在运动领域的研究比较少，分子量在500~3000Da针对上面提到的血睾酮降低的原因，本文主要范围内的多肽都具有抗氧化性，因此海参小分子肽从两个方面探讨海参小分子肽对血睾酮改善的机具有很强的抗氧化能力，能除去生物体内自由基，制。第一，由于长期的大负荷训练导致睾丸组织过还原过氧化氢和过氧化脂质，保护生物体膜，抗衰氧化反应增强，而过氧化反应的增强又进一步导致老。考虑到海参小分子肽具有不经消化直接吸收氧化损伤，氧化损伤可能导致脂质、蛋白质及核酸[2]等多种损伤。而这些损伤部位可能是下丘脑—垂的特点，因此本研究通过灌胃的方式补充海参小分子肽来探讨它对6周不同跑台训练小鼠睾丸组体—性腺轴（HPG）的某个环节，这样将导致整个的织氧化应激的影响。下丘脑—垂体—性腺轴（HPG）功能受到抑制（见图从本实验海参小分子肽对睾丸组织SOD、MDA1），补充海参小分子肽使氧化损伤得到改善，被抑的影响来看，经过6周的跑台训练以及补充海参小制的下丘脑—垂体—性腺轴（HPG）得到释放，从而分子肽后，有氧运动补充组以及无氧运动补充组的改善了血睾酮。第二，长期的大负荷训练导致氧化MDA相比于有氧运动组和无氧运动组有不同程度损伤，氧化损伤可导致睾酮—LH反馈机制失衡，通的降低，SOD则有不同程度的提高。提示补充海参过补充海参小分子肽可以改善机体的氧化损伤，使小分子肽改善了小鼠睾丸组织的抗氧化功能，降低睾酮—LH反馈机制失衡得到改善（见图1），于是血了氧化应激。睾酮得到改善。至于更加深层次的氧化损伤导致3.3补充海参小分子肽改善小鼠血清睾酮机制的探下丘脑—垂体—性腺轴（HPG）具体哪部分受抑制以讨及失衡的原因，需要更进一步的研究。目前对于训练引起运动性低血睾酮的主要原因是下丘脑—垂体—性腺轴（HPG）功能的多个环节[12，13]被抑制。另外有的研究认为，血清睾酮水平的[14]下降是因睾酮—LH反馈机制失衡所致。对于改善由运动导致的低睾酮症，很多研究且主要集中于[15]通过补充营养物质来实现，崔玉鹏，刘晓燕等，将40只雄性SD大鼠随机分为安静对照组、训练对照组、训练补充丙酸睾酮组与训练补充中药组，进行6周的实验。结果显示：益气养阴补肾方剂可以明显改善运动训练导致的大鼠低血睾酮水平，其机制可能是益气养阴补肾方剂通过提高血清LH水平刺激睾丸间质细胞进而增加了睾丸组织中睾酮的合成[16]与分泌有关。类似的，陈真，杨则宜，姚鸿恩等选取雄性Wistar大鼠为研究对象，通过给予益气补肾图1海参小分子肽改善血睾酮含量氧化损伤机制图复方中药制剂，把大鼠分为运动组、对照组以及运4结论动补充组，进行为期6周的训练，发现采用的中药复补充海参小分子肽可以改善运动训练尤其是方制剂能维持大运动量训练大鼠的血睾酮平衡。有氧训练导致的小鼠睾酮水平下降，其机理可能是提示大鼠血睾酮降低可能由睾丸组织自由基代谢通过补充海参小分子肽降低小鼠睾丸组织氧化损增强所致，中药复方制剂可能通过提高了睾丸组织伤从而改善下丘脑—垂体—性腺轴或者睾酮—LH内的抗自由基氧化酶活性来发挥功效而实现。调节功能来实现。注释及参考文献：[1]樊绘曾.海参：海中人参-关于海参及其成分保健医疗功能的研究与开发[J].中国海洋药物杂志，2001（4）：38.[2]赵兴坤.海参肽的功能特性及其应用[J].中国食物与营养，2003，9（12）：31-33.[3]姚可成.食物本草（点校本）[M].北京：人民卫生出版社，1994：6951.[4]吴鞠通.温病条辨[M].北京：人民卫生版社，2000：843.[5]张君慧，张晖，王兴国，等.抗氧化活性肽的研究进展[J].中国粮油学报，2008，23（60）：227-233.[6]Aakvang，eta1.testosteroneandtestosteronebindingglobulininyoungmenduringprolongedstress.Int.J.Andro，1978，1（1-6）：22-31．\n·92·西昌学院学报·自然科学版第27卷[7]Urhausen，eta1.A7\weekfollow-upstudyofmebehaviouroftestosteroneandcortisolduringthecompetitionperiodinrowers.Eur.Appl，1987，56（5）：528-533．[8]Hakkinen，eta1.Dailyhormonalandneuromuscularresponsesintensivestrengthtrainingin1week.Int.J.SportsMed，1988，9（6）：422-428．[9]杨则宜，焦颖，赵京华，等.我国优秀运动员血清睾酮水平及运动对血清睾酮的作用[J].中国运动医学杂志，1988，（7）：70-73．[10]卢连华，周景洋.海参肽对小鼠免疫调节及抗疲能力的影响[J].山东医药，2009，49（25）：35-37.[11]付学军，崔志峰.小分子量海参肽对小鼠的抗疲劳作用[J].营养研究，2007（4）：259-261.[12]王启荣，周丽丽，高红，等.运动性低血睾酮与血清皮质醇（酮）、睾丸11β-HSDmRNA水平及其中药干预的影响[J].天津体育学院学报，2005，20（4）：1-4.[13]徐晓阳.运动性低血睾酮研究进展[J].山东体育科技，2000，22（2）：38.[14]UllaM.Rajala，AimoO.Ruokonen，etal.AssociationsofTotalTestosteroneandSexHormone-BindingGlobulinLevelsWithInsulinSensitivityinMiddle-AgedFinnishMen.DiabetesCare,2007,30（4）：13.[15]崔玉鹏，刘晓燕，张凡，等.益气养阴补肾方剂对雄性大鼠大负荷游泳训练后血清及睾丸组织睾酮水平的影响[J].体育科研，2004，25（3）：53-57.[16]陈真，杨则宜，姚鸿恩，周未艾，等.益气补肾中药对运动性疲劳大鼠睾丸自由基代谢的影响[J].中国临床康复，2004，27（8）：5898-5891.ResearchontheEffectsoftheSeaCumumberSmallPeptideontheQxidativeStressoftheSerumTestosteroneoftheExercisingMiceandTesticularTissueMDAQIXin-xue，GUOGuang-ming（FuyangVocationalandTechnicalCollege，Fuyang，Anhui236031）Abstract:Objective：tostudytheeffectoftheseacucumbersmallmoleculepeptideonthelevelsoftheserumtestosteroneoftheexercisingmiceandtesticulartissuemalondialdehyde（MDA）andsuperoxidedismutase（SOD）.Methods：30maleKMmicearerandomlydividedintofourgroups：thequietgroup（C），theaerobicexercisegroup（T1），aerobicexercisegroupwithsmallmoleculesaddedseacucumberpeptide（T2），anaerobicexercisegroup（T3）andanaerobicexercisegroupwithseacucumbersmallmoleculepeptide（T4）.T1，T2，T3andT4aregiventreadmilltrainingindifferentways.ThecontentofMDAandSODofthetestosteroneandtesticulartissueofthemiceineachgroupisobservedinsixweeks.Results：thecontentofbloodtestosterone，SODandMDAoftheexercisinggroupsofthemiceallchanged，whileT3andT4changedmoresignificantlythanT1andT2，T1andT3changedmoresignificantlythanT2andT4.Conclusion:thecomplementseacucumbersmallmoleculepeptidecanimprovesportstraining，especiallytheaerobicexercisetrainingwhichcanlettheleveloftheserumtestosteroneofthemicedrop.Keywords:Seacucumbersmallpeptides；Testis；testosterone；Oxidativestress?????????????????????????????????????????????????????????????（上接81页）TheFunctionofCollegePersonnelFilesintheCampusCultureConstructionWUXiao-qin（SichuanTourismCollege，Chengdu，Sichuan610100）Abstract:Asacrucialcomponentofthecollegeeducation，thecampuscultureofauniversityservesasaneffectivecarrierofnurturingandimprovingstudents’comprehensivequalities.Withgreathistoricalvalueintheprocessofcampuscultureconstruction，thecollegepersonnelfilesplaysasignificantroleincampuscultureheritageanddevelopment，incampusculturequalityimprovement，andinachievingitsleapfrogdevelopment.Thisessay，fromtheformationofpersonnelfilesanditshistoricalvaluetotherelationshopbetweenitshistoricalvalueandthecampusculture，statestheroleplayedbycollegepersonnelfilesintheconstructionprocessofcampusculture.Keywords:Personnelfiles；Campuscultureconstruction；Function