2019-2020学年新一线突破人教版生物选修一练习：专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定

2019-2020学年新一线突破人教版生物选修一练习：专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定

专题 5 DNA和蛋白质技术 课题 1 DNA的粗提取与鉴定 题型一 DNA的粗提取与鉴定的实验原理 1．在混合物中提取 DNA分子的基本思路是( ) A．根据各种大分子的理化性质的差异 B．根据各种大分子的理化性质的共性 C．根据各种大分子在细胞内的功能 D．根据各种大分子的结构和在细胞内的位置 答案 A 解析 提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有 不同物理或化学性质的生物大分子。就 DNA 分子的粗提取而言，就是利用了 DNA与 RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异进行分离的。 2．下列图示中能正确反映 DNA溶解度与 NaCl溶液浓度之间关系的是( ) 答案 C 解析 DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。当NaCl溶液浓度为 0.14 mol/L时，DNA的溶解度最低，而高于或低于 0.14 mol/L时，随 NaCl溶液浓度 的增加或降低，DNA的溶解度都逐渐升高。 3．下列有关 DNA的特性的描述，错误的是( ) A．蛋白酶不能水解 DNA，这体现了酶的专一性 B．大多数 DNA不能忍受 60～80℃的高温 C．洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对 DNA没有影响 D．DNA不溶于酒精溶液 答案 B 解析 蛋白酶能水解蛋白质，但对 DNA没有影响，这体现了酶的专一性， A正确；大多数蛋白质不能忍受 60～80℃的高温，而 DNA在 80℃以上才会变 性，B错误；洗涤剂不会影响 DNA，但能够瓦解细胞膜，C正确；DNA不溶于 酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液，利用这一原理，可以将 DNA与蛋白质进一步分离，D正确。 4．DNA遇二苯胺(沸水浴)会呈现( ) A．砖红色 B．橘黄色 C．紫色 D．蓝色 答案 D 解析 DNA遇二苯胺(沸水浴)会呈现蓝色，D正确。 题型二 DNA的粗提取与鉴定的实验设计 5．下列不适宜作为 DNA提取的实验材料的是( ) A．鸡血细胞 B．蛙的红细胞 C．人的成熟红细胞 D．菜花 答案 C 解析 鸡血细胞、蛙的红细胞、菜花细胞均含有细胞核和各种细胞器，即均 含有较多的 DNA，因此适宜作为 DNA提取的实验材料，A、B、D不符合题意； 人的成熟红细胞不含细胞核和各种细胞器，即不含 DNA，因此不适宜作为 DNA 提取的实验材料，C符合题意。 6．进行 DNA 粗提取时，若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加 入一定量的洗涤剂和食盐。加入食盐的目的是( ) A．利于 DNA的溶解 B．分离 DNA和蛋白质 C．溶解细胞膜 D．溶解蛋白质 答案 A 解析 实验材料是植物细胞时，需先加入洗涤剂和食盐，洗涤剂的作用是瓦 解细胞膜，食盐的作用是溶解 DNA。 7．在提取花椰菜的 DNA时，加入洗涤剂的目的是( ) A．破坏细胞膜 B．破坏叶绿素 C．破坏细胞壁 D．破坏 DNA 答案 A 解析 在提取花椰菜的 DNA时，加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜，从而释 放出 DNA。 8．下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验相关操作中所选取的试剂，错误 的是( ) 选项 相关操作 选用的试剂 A 破碎鸡血细胞 蒸馏水 B 溶解核内 DNA 0.14 mol/L的 NaCl溶液 C 提取杂质较少的 DNA 冷却的 95%酒精 D DNA的鉴定 现配的二苯胺试剂 答案 B 解析 在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，可使鸡血细胞吸水涨破，A正 确；2 mol/L的 NaCl溶液能溶解较多的核内 DNA，但在 0.14 mol/L的 NaCl溶液 中，DNA的溶解度最低，B错误；DNA不溶于酒精，而某些蛋白质能溶于酒精， 故用体积分数为 95%的冷酒精能提取杂质较少的 DNA，C正确；在沸水浴条件 下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定 DNA的试剂，D正 确。 9．如图所示为“DNA粗提取”实验的相关操作步骤，其操作目的错误的是 ( ) A．①是洗涤鸡血细胞，去除鸡血细胞表面的杂质 B．④是稀释 NaCl溶液至 0.14 mol/L，析出 DNA C．③是选用 2 mol/L NaCl溶液溶解黏稠物中的 DNA D．②是纯化 DNA，去除溶于 95%的酒精中的杂质 答案 A 解析 ①是让鸡血细胞与蒸馏水混合而使鸡血细胞处于低渗的环境中，使细 胞吸水涨破，释放出 DNA。 10．在 NaCl 溶液中反复溶解、析出并过滤，就能除去 DNA溶液中的杂质 的理由不包括( ) A．用高浓度盐溶液溶解 DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质 B．用低浓度盐溶液使 DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质 C．反复操作就能够除去与 DNA溶解度不同的多种杂质 D．反复操作就能够使各种杂质变性而沉淀析出 答案 D 解析 DNA在不同浓度之间反复溶解、析出过程中，并未使蛋白质等杂质 变性。 11．为了纯化提取的 DNA，可直接在滤液中加入下列哪种物质，反应 10～ 15 min，以达到实验目的( ) A．嫩肉粉 B．蒸馏水 C．2mol·L－1 NaCl溶液 D．酒精 答案 A 解析 嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，能催化蛋白质水解，从而去除滤液中的部 分杂质。 12．在 DNA粗提取的实验中，先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是 ( ) A．稀释血液；冲洗样品 B．使血细胞破裂；降低 NaCl溶液浓度，使 DNA析出 C．使血细胞破裂；增大 DNA溶解量 D．使血细胞破裂；提取含杂质较少的 DNA 答案 B 解析 在 DNA粗提取的实验中，先后两次向烧杯中加入蒸馏水：第一次向 鸡血中加入蒸馏水，目的是使鸡血细胞吸水涨破，释放细胞核物质；第二次向 2 mol·L－1的 NaCl溶液中加入蒸馏水，目的是降低 NaCl 溶液的浓度，使 DNA 析 出。 13．利用 DNA和 RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，可 以从生物组织中提取 DNA。下面是有关 DNA提取鉴定实验的有关问题。 (1)下图是 DNA在 NaCl溶液中的溶解度曲线。 在 NaCl溶液浓度低于 0.14 mol/L时，DNA的溶解度随 NaCl溶液浓度的增 加而________；在 0.14 mol/L时，DNA的溶解度________；当 NaCl溶液浓度继 续增加时，DNA溶解度又________。 (2)为了纯化提取的 DNA，需要将获取的含 DNA 的滤液做进一步处理。下 面是去除杂质的三个方案： 方案一：在滤液中加入浓度为 2 mol/L的 NaCl溶液，过滤除去不溶的杂质， 再调节 NaCl溶液浓度为 0.14 mol/L，析出 DNA。 方案二：直接在滤液中加入嫩肉粉，反应 10～15 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白 酶能够分解蛋白质。 方案三：将滤液放在 60～75℃的恒温水浴箱中，保温 10～15 min。 三个方案所利用的原理分别是什么？ _________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ __ (3)将上述处理液过滤，加入与滤液体积相等的体积分数为 95%的冷却的酒 精，搅拌后溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的 DNA，将丝状物放入试 管，加入 2 mol/L NaCl溶液 5 mL，再加入 4 mL二苯胺试剂，在________的条件 下，DNA会被染成________色。如果将白色丝状物置于载玻片上，滴加几滴甲 基绿染色液，DNA将呈现________色。 答案 (1)逐渐降低 最小 逐渐增大 (2)方案一：利用 DNA在不同浓度的 NaCl溶液中溶解度的不同，通过控制 NaCl溶液的浓度去除杂质；方案二：利用蛋白酶分解杂质蛋白质，从而使 DNA 与蛋白质分开；方案三：利用 DNA与蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白 质变性与 DNA分离。 (3)沸水浴 蓝 绿 解析 (1)DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不 同。当 NaCl 溶液的物质的量浓度低于 0.14 mol·L－1时，DNA 的溶解度随 NaCl 溶液物质的量浓度的增加而逐渐降低；NaCl溶液的物质的量浓度为 0.14 mol·L－ 1时，DNA的溶解度最小；当 NaCl溶液的物质的量浓度继续增加时，DNA的溶 解度又逐渐增大。 (2)方案一是通过控制 NaCl溶液的浓度去除杂质；方案二是利用嫩肉粉中的 木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，而对 DNA没有影响，从而将 DNA和蛋白质分开； 方案三是利用 DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使两者分离。 (3)DNA在沸水浴条件下与二苯胺反应呈蓝色；甲基绿可将 DNA染成绿色。 14．下图表示以鸡血为实验材料进行 DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请 分析回答下列问题： (1)步骤一中，向鸡血细胞液中加入________并搅拌，可使鸡血细胞破裂。 (2)步骤二中，过滤后收集含有 DNA的________。 (3)步骤三、四的操作原理是________________________________________； 步骤四中，通过向溶液中加入________调节 NaCl 溶液的物质的量浓度至 ________mol/L时，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质。 (4)步骤七：向步骤六过滤后的________中加入等体积的冷却的________， 静置 2～3 min，溶液中会出现________色丝状物，这就是粗提取的 DNA。 (5)步骤七：DNA遇________试剂，沸水浴 5 min，冷却后，溶液呈________ 色。 答案 (1)蒸馏水 (2)滤液 (3)DNA在不同浓度 NaCl溶液中溶解度不同，通过控制 NaCl溶液的浓度去 除杂质 蒸馏水 0.14 (4)滤液 酒精 白 (5)二苯胺 蓝 解析 破碎红细胞应该用蒸馏水，使之吸水涨破。DNA在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同，在 2 mol/L的 NaCl溶液中 DNA溶解，在 0.14 mol/L的 NaCl 溶液中 DNA析出。可通过加入蒸馏水将 2 mol/L的 NaCl溶液稀释为 0.14 mol/L 的 NaCl溶液。DNA不溶于冷酒精溶液，在沸水浴的条件下，DNA 与二苯胺反 应呈现蓝色。 1．下列有关 DNA的粗提取与鉴定实验的叙述，正确的是( ) A．取材：鸡血细胞；原因：有细胞核，其他动物的血细胞都没有细胞核 B．粗提取：不同浓度的 NaCl溶液；原因：DNA在其中的溶解度不同 C．提纯：95%的冷酒精；原因：DNA溶于酒精，蛋白质等杂质不溶于酒精 D．鉴定：二苯胺试剂；原因：DNA溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色 答案 B 解析 除了哺乳动物成熟的红细胞，其他动物红细胞都有细胞核，A错误； DNA在不同浓度的 NaCl溶液中的溶解度不同，根据此原理可以对 DNA进行粗 提取，B正确；DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质溶于酒精，进而提纯 DNA， C错误；DNA溶液加入二苯胺试剂后沸水浴加热呈蓝色，D错误。 2．向溶有 DNA的 2 mol/L的 NaCl溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中 DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是( ) A．减小、减小 B．增大、增大 C．先减小后增大、增大 D．减小、增大 答案 C 解析 由于 DNA在 0.14 mol/L的 NaCl溶液中溶解度最小，故向溶有 DNA 的物质的量浓度为 2 mol/L的 NaCl溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中 DNA 的溶解度先减小，0.14 mol/L时溶解度最小，然后增大；而蛋白质在高浓度的盐 溶液中会出现盐析，随浓度降低溶解度逐渐增大。 3．下列关于 DNA对高温的耐受性的说法，不正确的是( ) A．DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强 B．超过 80℃后 DNA将变性，即使恢复到常温，生物活性也不能恢复 C．不同生物的 DNA的变性温度不一定相同 D．深海热泉附近生活的生物的 DNA对高温的耐受性更强，其 DNA中鸟嘌 呤所占的比例更高 答案 B 解析 DNA超过 80℃变性，恢复到常温，生物活性将恢复。 4．某同学用洋葱进行 DNA粗提取和鉴定实验，操作错误的是( ) A．加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨 B．用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 DNA C．加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌 D．加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热 答案 A 解析 加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和，否则会产生许多泡沫，不利于 后续步骤的操作，A错误；蛋白酶能够分解蛋白质，因此能起到纯化 DNA的目 的，B正确；加入酒精后用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧 DNA分子的 断裂，导致 DNA分子不能形成絮状沉淀，C正确；沸水浴条件下，DNA遇到二 苯胺会被染成蓝色，用作 DNA的鉴定，D正确。 5．在“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中，对 DNA提取量影响较小的是 ( ) A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出 DNA等核物质 B．搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动 C．在析出 DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至黏稠物不再增多 D．要用冷酒精沉淀 DNA，甚至可将混合液再放入冰箱中冷却 答案 B 解析 在 DNA从细胞中释放的操作中，首先加蒸馏水使鸡血细胞吸水涨破， 然后用玻璃棒沿一个方向搅拌，目的是加速细胞的破裂，这有利于 DNA等核物 质的充分释放，A不符合题意；搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌的目的是 防止将丝状的 DNA搅碎，利于 DNA絮状物的挑出，但不影响 DNA的提取量， B符合题意；在析出 DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，且到黏稠物不再增加， 如果加蒸馏水过快，会导致 DNA的再溶解，从而影响 DNA 的提取量，C不符 合题意；预冷的酒精具有以下优点：一是抑制核酸水解酶活性，防止 DNA降解； 二是降低分子运动，易于形成沉淀析出；三是低温有利于增加 DNA分子柔韧性， 减少断裂，因此用冷酒精沉淀 DNA 甚至将混合液放入冰箱冷却可以增加 DNA 的提取量，D不符合题意。 6．在 DNA的粗提取和鉴定实验中有三次过滤： ①过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液； ②过滤含黏稠物的物质的量浓度为 0.14 mol/L的 NaCl溶液； ③过滤溶解有 DNA的物质的量浓度为 2 mol/L的 NaCl溶液。 以上三次过滤分别是为了获得( ) A．含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA的滤液 B．含核物质的滤液、滤液中的 DNA、含 DNA的滤液 C．含核物质的滤液、滤液中的 DNA、纱布上的黏稠物 D．含较纯 DNA的滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA的滤液 答案 A 解析 过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液应取滤液(其内含有 DNA，但 DNA 纯度不高)；过滤含黏稠物的物质的量浓度为 0.14 mol/L的 NaCl溶液应取纱布上 的黏稠物(其内含析出的 DNA)；DNA易溶于物质的量浓度为 2 mol/L的 NaCl溶 液，故过滤该溶液时应取其滤液(其内含有 DNA)。 7．在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，发现 DNA提取量不足。下列有关 原因分析不正确的是( ) A．经蒸馏水处理的鸡血细胞用玻璃棒搅拌的时间过短 B．溶解 DNA时所调制的 NaCl溶液浓度未达到 2 mol/L C．DNA再溶解时，玻璃棒搅拌方向是单向的 D．向 2 mol/L的 NaCl溶液中加入的蒸馏水太少 答案 C 解析 经蒸馏水处理的鸡血细胞用玻璃棒搅拌的时间过短，部分细胞还未破 裂，这会造成 DNA的提取量不足，A正确；NaCl溶液浓度在 0.14～2 mol/L时， 随着 NaCl 溶液浓度的升高，DNA 的溶解度增大，因此溶解 DNA 时所调制的 NaCl溶液浓度未达到 2 mol/L时，部分 DNA还没有溶解，这会造成 DNA的提 取量不足，B正确；DNA 再溶解时，玻璃棒应该沿着一个方向缓慢搅拌，是为 了防止 DNA分子的断裂，而这不会造成 DNA提取量不足，C错误；向 2 mol/L 的 NaCl溶液中加入蒸馏水的目的是稀释溶液，使 DNA析出，若加入蒸馏水的 量太少，稀释度不够，这会造成 DNA的提取量不足，D正确。 8．甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图。 相关叙述正确的是( ) A．图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为 NaCl溶液，但两者浓度不同 B．图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝，另一支 试管中的溶液不变蓝 C．图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使 DNA析出，并缠绕在玻璃棒上 D．图乙操作中所用的二苯胺试剂需现配现用以达到较好的鉴定效果 答案 D 解析 图甲烧杯中为酒精溶液，图乙试管中为 NaCl溶液，A错误；图乙试 管需要在沸水浴中加热 5 min，B错误；图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，卷 起丝状物，C错误；图乙操作中所用的二苯胺试剂最好现配现用，否则二苯胺会 变成浅蓝色，D正确。 9．如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些重要操作示意图，请 分析回答有关问题： (1)正确的操作顺序是______________(用字母和箭头表示)。 (2) 图 中 C、 E 步 骤 都 加 入 了 蒸 馏 水 ， 但 其 目 的 不 同 ， 分 别 是 __________________和____________________。 (3)图中 A步骤中所用酒精必须是经过________的才能使用，该步骤的目的 是____________________________。 (4)为鉴定图中A步骤中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可将其溶解后， 滴加________试剂后沸水浴，如果出现________，则证明该丝状物的主要成分为 DNA。 (5)由于鸡血较难找到，某学生试图用牛血代替，结果没有成功，其原因最 可能是______________________。 答案 (1)C→B→E→D→A (2)使鸡血细胞吸水涨破，释放出细胞核物质 降低 NaCl溶液的浓度，使 DNA析出 (3)充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净) 的 DNA (4)二苯胺 蓝色 (5)牛成熟的红细胞没有细胞核和各种细胞器 解析 (1)DNA的粗提取与鉴定步骤是加入蒸馏水，破碎细胞→过滤，获取 含 DNA的滤液→去除滤液中的杂质→DNA的析出与鉴定。由此可知，正确的操 作顺序是 C→B→E→D→A。 (2)C步骤加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破，释放出细胞核物质；E 步骤加入蒸馏水的目的是降低 NaCl溶液的浓度，使 DNA析出。 (3)图中 A步骤中所用酒精必须经过充分冷却才能使用，该步骤的目的是获 取含杂质较少(或较纯净)的 DNA。 (4)鉴定图中 A步骤中所得到的丝状物的主要成分，可将其溶解后，滴加二 苯胺试剂，并进行沸水浴加热，如果出现蓝色，则该丝状物的主要成分为 DNA。 (5)牛是哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和各种细胞器，因此 用牛血代替鸡血来进行该实验不会取得成功。 10．某生物兴趣小组开展 DNA粗提取的相关探究活动，具体步骤如下。 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各 2份，每份 10 g。剪碎后分成两 组，并分别置于 20℃和－20℃条件下保存 24 h。 DNA的粗提取： 第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入 15 mL研磨液，充分研磨。 用两层纱布过滤，取滤液备用。 第二步：先向 6只小烧杯中分别注入 10 mL滤液，再加入 20 mL体积分数 为 95%的冷酒精，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒 上。 第三步：取 6 支试管，分别加入等量的物质的量浓度为 2 mol/L的 NaCl溶 液溶解上述絮状物。 DNA的检测：在上述试管中各加入 4 mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸 水中加热 5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如表所示。 材料保存温度 花菜 辣椒 蒜黄 20℃ ＋＋ ＋ ＋＋＋ －20℃ ＋＋＋ ＋＋ ＋＋＋＋ 注：“＋”越多表示蓝色越深。 分析上述实验过程，回答下列问题。 (1)该探究性实验的课题名称是______________________________。 (2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少________。 (3)根据实验结果，得出结论并分析。 ①结论 1：与 20℃相比，相同实验材料在－20℃条件下保存，DNA的提取 量较多。 结论 2：______________________________________________。 ②针对结论 1，请给出合理的解释：_______________________________。 (4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和 DNA 均不相溶，且对 DNA影响极小。为了进一步提高 DNA 纯度，依据氯仿的特性，在 DNA粗提取 第三步的基础上继续操作的步骤是__________________________________，然后 用体积分数为 95%的冷酒精使 DNA析出。 答案 (1)探究不同材料和不同保存温度对 DNA提取量的影响 (2)DNA 分 子的断裂 (3)①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄中提取 的 DNA 量最多 ②低温抑制了相关酶的活性，DNA 降解速度慢 (4)将第三步 获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液 解析 (1)从表格可以看出，该实验有两个自变量：材料和温度，所以该探 究性实验的课题名称为“探究不同材料和不同保存温度对 DNA 提取量的影 响”。 (2)第二步中用玻璃棒搅拌的目的是获取 DNA絮状物，所以若搅拌速度快， 易造成 DNA分子的断裂。 (3)本实验的结论可从两个方面来考虑：①相同材料在不同保存温度下的结 论；②不同材料在相同保存温度下的结论。 (4)氯仿能使蛋白质变性，而对 DNA影响极小，所以可将第三步获得的溶液 与氯仿混合，又因氯仿密度大于水，所以蛋白质沉淀位于溶液下部，DNA位于 上清液中。 11．真核生物细胞内，大量 DNA 和蛋白质以及一些 RNA等混杂在一起， 难以分离。生物兴趣小组的同学为了获得纯度相对较高的 DNA展开了实验探究。 (1)分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质理化性质的不同而采取 一定的方法，以下是从各种物质之间________的差异角度开展研究： ①取鸡血细胞悬液 10 mL，加蒸馏水 20 mL，同时用玻璃棒________(填“轻 轻搅拌”或“快速搅拌”)，过滤，取滤液，转移到塑料材质的大烧杯中。 ②沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液，用玻璃棒沿一个方向 ________(填“轻轻搅拌”或“快速搅拌”)，同时不断收集析出的物质。下图是 根据鸡血中几种物质的析出情况绘制的曲线，请据图分析： ③如果只收集纤维蛋白，可采取的措施是_____________________________。 ④先用饱和度 40%的硫酸铵溶液析出绝大部分纤维蛋白和大部分球蛋白，再 在饱和度约为________的硫酸铵溶液中析出 DNA(既保证 DNA提取量较大又避 免其他杂质过多)，与此同时析出的物质还有________。 (2)如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的 DNA纯度，可采取的两 种办法有：将 DNA与球蛋白的混合物加入到________中，收集再次析出物；用 ________处理溶有 DNA与蛋白质的溶液。 答案 (1)溶解度 ①快速搅拌 ②轻轻搅拌 ③在硫酸铵浓度达到 30%之 前收集析出物 ④50% 球蛋白 (2)冷却酒精 嫩肉粉 解析 (1)分析曲线图可知，不同物质在不同浓度的硫酸铵中的析出的相对 量有所差别，即分离各种物质的基本思路是根据 DNA和其他物质之间溶解度的 差异开展研究： ①取鸡血细胞悬液 10 mL，加蒸馏水 20 mL，此时可以用玻璃棒快速搅拌， 以加速血细胞的破裂。 ②沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液，为了防止将 DNA的絮 状物搅碎，此时应用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，同时不断收集析出的物质。 ③从图中看出，纤维蛋白在硫酸铵浓度在 20%之前已经开始析出，说明溶解 度开始减小；在浓度为 30%时析出最快，说明此时的溶解度最低，并且超过 30% 后球蛋白也将逐渐析出，因此如果只收集纤维蛋白，可以在硫酸铵浓度达到 30% 之前收集析出物。 ④从图中看出，DNA 在饱和度约为 50%的硫酸铵溶液中溶解度最小，与此 同时析出的物质还有球蛋白，只是球蛋白析出量较少。 (2)如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的 DNA 纯度，可将 DNA 与球蛋白的混合物加入到冷却酒精中，由于 DNA不溶于酒精，而其他杂质可溶 于酒精，因此收集再次析出物；酶具有专一性，可以用嫩肉粉(含木瓜蛋白酶)处 理溶有 DNA 与蛋白质的溶液，此时蛋白质可以水解，因此可以分离 DNA和蛋 白质。