- 2021-09-30 发布 |
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文档介绍
【生物】2018届一轮复习人教版专题27-4动物细胞融合与单克隆抗体考点
专题二十七 《现代生物科技专题》专题2 细胞工程 第04课 动物细胞融合与单克隆抗体 【学案导航】---明方向! 【课程学习目标】 1. 掌握动物细胞融合的原理和方法。 2. 单克隆抗体的制备和应用 第一层级:预学区.不看不讲 【知识体系梳理】 一、动物细胞融合 1.概念:______或______动物细胞结合形成__________的过程,也称细胞杂交。 2.结果:形成______细胞。 3.意义:克服了__________的不亲和性,成为研究__________、细胞免疫、肿瘤和⑦____________的培育等的重要手段。利用______________制造单克隆抗体。 4.原理:________________________ 5.动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有___________、__________、_________等。 二、单克隆抗体 1.抗体:一个__________只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量_____、纯度______、特异性_____。 2.细胞融合完成的标志:____________________。 3.单克隆抗体的制备过程: 两次筛选:第一次__________________,第二次筛选出____________________________。 (1)第一次筛选:将未融合的 B 淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及 BB 融合、瘤瘤融合等的细胞通过选择培养基淘汰,筛选出 ________________。 (2)第二次筛选:将产生_________的 B 瘤细胞通过细胞培养 用相应抗原检测的办法筛选出来。 【基础学习交流】 1.诱导动物细胞融合与植物体细胞杂交融合有什么不同? 2. 若不采用动物细胞融合的方法,能否生产出单克隆抗体?试简要说明。 3. 植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同? 第二层级:导学区.不议不讲 【重点难点探究】 1.获取单克隆抗体的场所 ①若在培养基中进行杂交瘤细胞培养,则从____________中提取。 ②若在小鼠或其他动物腹腔中培养,则从________中提取。 2.杂交瘤细胞的特点:________________________________。 3.单克隆抗体的优点:_________________________________。 4.在腹腔内增殖的优点:________________________________________。 5.筛选的时候用:_______________________进行筛选。 6.单克隆抗体的作用: ① _______________:准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟一定抗原发生特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点。 ② __________________:主要用于治疗癌症治疗,可制成“生物导弹”(借助单克隆抗体的___________),也有少量用于治疗其它疾病。 7.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 细胞工程 植物体细胞杂交 动物细胞融合 实质内容 改变遗传物质、产生新的性状,获得细胞产品(使后代具有双亲的特性) 理论基础 细胞膜的流动性、植物细胞全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 诱导手段 物理法:离心、振动、电激 化学法:聚乙二醇(PEG) 物理法:离心、振动、电激 化学法:聚乙二醇 生物法:灭活病毒(灭活仙台病毒) 过程 去细胞壁(纤维素酶、果胶酶)→原生质体融合(获得杂种原生质体)→植物细胞 的筛选和培养(获得植株) 获得分离的单个动物细胞(胰蛋白酶处理)→诱导融合形成杂交细胞→动物细胞培养(细胞产品) 应用 白菜—甘蓝等杂种植物 单克隆抗体的制备(杂交瘤细胞) 意义和 用途 ①克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展杂交亲本的组合范围;②克服有性杂交的母系遗传的局限性,获得细胞质基因的杂合子,研究细胞质遗传 ①制备单克隆抗体;②诊断、治疗、预防疾病,如单抗诊断盒、“生物导弹”治疗癌症 【思维拓展应用】 1.下列关于细胞工程的叙述,错误的是( ) A.电激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的小鼠B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.培养人的浆细胞能产生单克隆抗体 2.下列对哺乳动物体细胞核移植技术的描述不正确的是( ) A.该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植 B.通常采用减数第二次分裂期卵母细胞作为受体细胞 C.可通过显微操作法除去卵母细胞核 D.克隆动物是对提供体细胞的动物进行了完全复制 3.单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞,在含有次黄嘌呤、氨基嘌呤和胸腺嘧啶的培养基(HAT)中无法生长,而小鼠脾细胞是正常细胞,在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后,经过数代培养,最终可在HAT培养基上存活的细胞是( ) A.骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞 B.脾细胞之间形成的融合细胞 C.骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞 D.脾细胞 4.下图是单克隆抗体制备过程示意图,其中①过程注射的物质和A细胞的名称分别是( ) A.抗体、T淋巴细胞 B.抗原、T淋巴细胞 C.抗体、B淋巴细胞 D.抗原、B淋巴细胞 5.科学家将经过洋红细胞免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,产生杂交瘤,并能分泌单克隆抗体。洋红细胞和B淋巴细胞在该实验中分别属于( ) A.癌细胞和记忆淋巴细胞 B.抗原物和浆细胞 C.特定抗体物和记忆淋巴细胞 D.癌细胞和浆细胞 第三层级:固学区.不练不讲 【基础智能检测】 1.关于单克隆抗体制备与植物体细胞杂交的说法中正确的是( ) A.单克隆抗体制备与植物体细胞杂交的基本原理相同 B.单克隆抗体制备与植物体细胞杂交诱导细胞融合的方法相同 C.单克隆抗体制备与植物体细胞杂交在细胞融合前处理过程相同 D.单克隆抗体制备与植物体细胞杂交都需要筛选且筛选目的相同 2.关于单克隆抗体的生产和应用,错误的是( ) A.对小动物注射特定抗原以获取所需的B淋巴细胞 B.融合并筛选特定的杂交瘤细胞,原代培养产生遗传物质改变后才能进行传代培养 C.特定的单克隆抗体可制成试剂,用于检测人体是否受某种抗原的感染 D.治疗癌症的“生物导弹”原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞 3.下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤 ①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞 ②将X抗原注入小鼠体内,获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞 ③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养 ④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞 ⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞 ⑥从腹水中提取抗体 ⑦利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合 其中对单克隆抗体制备的相关叙述中正确的是(多选)( ) A.实验顺序应当是①②⑦⑤④③⑥ B.③过程中产生的多个杂交瘤细胞称为克隆 C.⑦过程获得的细胞均可无限增殖 D.利用细胞融合生产单克隆抗体通常要经过两次筛选 4.关于动物细胞融合的说法,不正确的是 ( ) A.动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 B.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞 C.常用的诱导动物细胞融合的因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射等 D.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能 【全新视角拓展】 1.有性生殖的生物产生后代需进行受精作用,植物体细胞杂交要进行原生质体的融合,单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合,可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下图所示为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题 (1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用,在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞,较为简便的筛选方法是 。 (2)若a、b表示两种植物体细胞,则由d细胞形成杂种植株的原理是 ,这种育种方法的 优点是 。 (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,则d细胞的特点是 。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有 的特点。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是 。 第四层级:思学区.不思不复 【思维导图构建】 【答案】 【知识体系梳理】 一、 1.①两个 ②多个 ③一个细胞 2. ①杂交 3. ①远缘杂交 ②细胞遗传 ③生物新品种 ④细胞融合技术 4. 细胞膜的流动性 5. ①聚乙二醇 ②灭活的病毒 ③电刺激 二、1.①B淋巴细胞 ②低 ③低 ④差 2.①细胞核融合成一个核 3.①筛选出杂交瘤细胞 ②能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 ③离体 ④愈伤组织 (1)B瘤融合的细胞 (2)特定抗体 【基础学习交流】 1.动物细胞融合能用灭活的病毒进行诱导。 2.能。可从经免疫的B淋巴细胞中获取决定所需抗体的基因(目的基因),导入骨髓瘤细胞,然后培养骨髓瘤细胞并从培养液中提取分泌物,便可得到单克隆抗体。 3.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同,不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁,然后再融合;动物细胞融合是两个体细胞直接融合。学科#网 【重点难点探究】 1.①培养液 ②腹水 2.既能大量繁殖,又能产生专一的抗体 3.特异性强,灵敏度高,并能大量制备 4.不需要特定的培养基,不需要严格的外界条件 5.特定的选择性培养基 6.①作为诊断试剂 ②用于治疗疾病和运载药物 导向作用 【思维拓展应用】 1.D 【解析】利用物理(电激等)和化学的方法既可诱导植物原生质体融合,也可诱导动物细胞融合;浆细胞虽能分泌特定抗体,但是不能分裂增殖,所以单独培养浆细胞不可能获得单克隆抗体。 2.D 【解析】克隆动物细胞核中的遗传物质来自提供细胞核的动物,其细胞质中的遗传物质来自提供卵母细胞的动物,因而克隆动物的性状主要与提供细胞核的亲本相同,而不是对提供体细胞的动物的完全复制,故选项D错。动物体细胞分化程度高,恢复其全能性十分困难,因而哺乳动物体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植;由于MⅡ期的卵母细胞含有能促进细胞分裂的物质,因此通常采用减数第二次分裂中期的卵母细胞作为核移植的受体细胞;通过显微操作法用微型吸管将卵母细胞核和第一极体一并吸出。 3.C 【解析】 骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞能无限增殖,并能在HAT培养基上正常存活。脾细胞高度分化,不能进行大量增殖。 4.D 【解析】 单克隆抗体技术首先应该获得能产生单一抗体的B淋巴细胞,所以应该给小鼠注射单一抗原,刺激小鼠产生相应B淋巴细胞,并产生单一抗体。所以图中①过程注射的是抗原,A细胞是B淋巴细胞。 5.B【解析】 该洋红细胞能刺激小鼠产生浆细胞,它属于抗原。这里所说的B淋巴细胞是经过免疫后产生的,属于浆细胞。 【基础智能检测】 1. D【解析】A项是不正确的,单克隆抗体的制备是利用杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生特定抗体的原理进行的,而植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性;B项不正确,单克隆抗体诱导融合可用灭活的病毒,而植物体细胞杂交不能用;C项不正确,单克隆抗体制备在细胞融合前的处理是注射特定抗原,免疫处理正常小鼠;而植物体细胞杂交在细胞融合前是用酶解法去除细胞壁,获得原生质体。D项正确,两者都要进行筛选,且筛选的目的都是获取杂交细胞。 3.ABD 【解析】骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合时能出现三种融合的细胞,分别是两个B淋巴细胞融合产生的细胞、两个骨髓瘤细胞融合产生的细胞、淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合产生的细胞。其中,两个B淋巴细胞融合产生的细胞不能无限增殖。 4.C 【解析】动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,融合后的细胞具有两个或多个细胞的遗传物质;动物细胞融合时常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等,紫外线照射易引起基因突变,因此该过程不能利用紫外线照射;细胞融合突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。 【全新视角拓展】 【答案】(1)给予大于800 lx的光照 (2)植物细胞的全能性 克服了远缘杂交不亲和的障碍 (3)既能无限增殖,又能产生特定的抗体 特异性强、灵敏度高、可大量制备 B淋巴细胞高度分化,不能增殖 【典例指津】---授技法! 热点题型 单克隆抗体的制备 例1.单克隆抗体(单抗)实质上是单个效应B细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中,错误的是 ( ) A.单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位 B.单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术 C.在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选 D.只有用物理或化学方法的诱导,才能促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交细胞 【答案】D 【解析】诱导B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞的融合有三类方法生物方法、物理方法和化学方法。 【提分秘籍】 (1)生物导弹利用了抗体的特异性将药物定向作用于癌细胞。学@科网 (2)单抗制备过程先要筛选出杂交瘤细胞,然后筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【举一反三】 单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面与常规抗体相比,其特点是( ) A.单克隆抗体特异性强、纯度低、灵敏度高、产量高 B.单克隆抗体特异性强、纯度高、灵敏度低、产量高 C.单克隆抗体特异性强、纯度高、灵敏度高、产量低 D.单克隆抗体特异性强、纯度高、灵敏度高、产量高 【答案】D 【解析】单克隆抗体与常规抗体相比,特异性强、灵敏度高、纯度高、产量高。 【提分秘籍】 项目 产生 特点 血清抗体 由B淋巴细胞分泌 一般从血清中分离,产量低、纯度低、特异性差 单克隆抗体 由杂交瘤细胞分泌 特异性强、灵敏度高,能大量制备 【真题回眸】---知难易! 1.(2016江苏高考)下列有关细胞工程的叙述,正确的是( ) A.PEG是促细胞融合剂,可直接诱导植物细胞融合 B.用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂 C.骨髓瘤细胞经免疫处理,可直接获得单克隆抗体 D.核移植克隆的动物,其线粒体DNA来自供卵母体 【答案】D 2.(2016天津)将携带抗M基因、不带N基因的鼠细胞去除细胞核后,与携带抗N基因、不带抗N基因的鼠细胞融合,获得的胞质杂种细胞具有M、N两种抗性。该实验证明了( ) A.该胞质杂种细胞具有全能性 B.该胞质杂种细胞具有无限增殖的能力 C.抗M基因位于细胞质中 D.抗N基因位于细胞核中 【答案】C 【解析】只有将该胞质杂种细胞培育成小鼠,才可证明该胞质杂种细胞具有全能性,A项错误;该实验没有证据表明该胞质杂种细胞能无限增殖,B项错误;携带抗M基因、不带抗N基因的鼠细胞去除细胞核后,与不带抗M基因、携带抗N基因的细胞融合,杂种细胞具有M、N两种抗性,说明细胞质中含有抗M基因,但不能确定抗N基因的位置,C项正确,D错误。 【能力提升】---长士气! 一、选择题(15小题) 1.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的是( ) A.经过免疫的B淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞 【答案】A 【解析】 单克隆抗体的产生是利用了细胞工程中的细胞融合技术。小鼠的骨髓瘤细胞与经过免疫的B淋巴细胞融合成杂交瘤细胞,在体外培养的条件下无限繁殖,产生特异性的单一抗体。 2.制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括( ) ①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植 A.①② B.①③ C.②③ D.③④ 【答案】A 3.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖,形成细胞群。其原因是( ) A.在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖 B.在动物体内,每个B淋巴细胞可产生多种抗体 C.每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应 D.每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体但不能大量增殖 【答案】D 【解析】B淋巴细胞寿命短,它能够参与特异性免疫,但不一定都参与;B淋巴细胞的免疫具有特异性,即每一个B淋巴细胞只能产生一种与特定抗原结合的抗体。 4.下列关于动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是( ) A.诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段完全相同 C.所采用的原理完全相同 D.都能形成杂种细胞 【答案】D 【解析】解答此题需要从如下几方面入手分析首先,两种细胞工程技术都要进行细胞融合,且融合的技术基本相同;第二,诱导的方法,除动物细胞的融合常用灭活的病毒作诱导剂外,其他的方法基本相同;第三,二者采用的原理不同,动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性,最终形成的是杂交细胞,植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性,最终杂种细胞形成的是杂种植株。 5.以绵羊红细胞刺激小鼠脾脏B淋巴细胞,再将后者与小鼠骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞克隆群,由此筛选出的单克隆杂交瘤细胞所产生的抗体( )[] A.能识别绵羊整个红细胞 B.只识别绵羊红细胞表面的特定分子[] C.能识别绵羊所有体细胞 D.只识别绵羊所有体细胞表面的特定分子 【答案】B 【解析】单克隆抗体具有特异性强的特点,只能针对特定的抗原。本题中的抗原是绵羊红细胞表面的特定分子,并非整个红细胞,也非其他体细胞。 6.下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是( ) A.制备过程中不需要动物细胞培养技术 B.杂交瘤细胞具有B淋巴细胞与癌细胞的所有特点 C.经选择培养基筛选出来的杂交瘤细胞可用于单克隆抗体的生产 D.单克隆抗体最广泛的用途是用做体外诊断试剂 【答案】D 7.科研工作者利用禽流感病毒蛋白制备单克隆抗体,下列步骤中叙述正确的是 ( ) A. 用动物细胞培养液培养禽流感病毒,通过离心获得抗原蛋白 B. 多次注射适宜浓度的抗原免疫小鼠,以获得更多的浆细胞 C. 用灭活的病毒诱导浆细胞与禽流感病毒融合得到杂交瘤细胞 D. 将单个杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔培养可获得多种单克隆抗体 【答案】B 【解析】 用动物细胞培养液培养禽流感病毒,通过离心可以获得更多的禽流感病毒,但是无法得到抗体,A错误;多次注射适宜浓度的抗原免疫小鼠,以获得更多的浆细胞,再由浆细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,最后由杂交瘤细胞产生大量的单一抗体,属于单克隆抗体,B正确;病毒没有细胞结构,不能与浆细胞融合形成杂交瘤细胞,C错误;将单个杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔培养只能获得一种抗体,D错误。 8.新技术的建立和利用对生物学的发展至关重要。下列技术(或仪器)与应用匹配正确的是( ) A.PCR技术——扩增蛋白质 B.杂交瘤技术——制备单克隆抗体 C.光学显微镜——观察叶绿体的基粒 D.花药的离体培养——培育多倍体植物 【答案】B 9.下列有关细胞工程的叙述,正确的是( ) ①植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备过程中都需要对融合后的细胞进行筛选 ②植物体细胞杂交就是指不同种植物原生质体融合的过程,原理是膜的流动性 ③植物细胞在组织培养过程中染色体数目始终保持不变 ④经核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状 A. ①②③④ B. ①②③ C. ①② D. ① 【答案】D 【解析】植物体细胞杂交需要筛选出异种细胞融合的细胞,单克隆抗体的制备过程中筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,①正确;植物体细胞杂交就是来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞,把杂种细胞培育成植株,原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性,②错误;植物组织培养过程中细胞分裂方式是有丝分裂,则染色体数目在后期加倍,③错误;经过核移植培育出的新个体中遗传物质大多数来自于提供细胞核的细胞,细胞质基因来自卵细胞,④错误,故选D。学#科网 10.下面为制备单克隆抗体过程示意图,下列相关叙述错误的是( )。 A. ④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞 B. ②过程中可以使用灭活病毒诱导融合 C. 上图中有一处明显错误 D. ⑤可以大量增殖 【答案】A 11.用a表示骨髄瘤细胞,b表示效应B细胞,则细胞融合过程中两次筛选的目的分别为 A. a、aa、ab、bb、b→a、aa、ab→ab培养 B. a、aa、ab、bb、b→ab、bb,b→ab培养 C. a、aa、ab、bb、b→ab→能产生特定抗体的ab培养 D. a、aa、ab、bb、b→aa→能无限增殖的aa培养 【答案】C 【解析】动物细胞融合,形成杂种细胞,即aa、bb、ab;第一次筛选是选出杂交瘤细胞即ab,去除未融合的细胞和自身融合的细胞;第二次筛选是选出产生特异性抗体的ab细胞,再进行克隆化培养,故C正确。[] 12.利用小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞产生单克隆抗体的实验及应用。下列说法错误的是( )[] A. B淋巴细胞应来自于已免疫小鼠体内 B. 细胞融合过程体现了细胞膜的选择透过性 C. 融合细胞需经过筛选培养和专一抗体检测 D. 单克隆抗体技术可应用于转基因蛋白检测 【答案】B 【解析】抗体是由效应B细胞产生的,已免疫的小鼠才能产生效应B细胞,因此B淋巴细胞应来自于已免疫小鼠体内,A正确;细胞融合过程体现了细胞膜的流动性,B错误;在制备单克降抗体过程中,需要通过2次筛选出符合要求的杂交瘤细胞,第一次用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,第二次用抗体阳性检测筛选处于能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,C正确;单克隆抗体可作为诊断试剂,应用于转基因蛋白检测,D正确。 13.下列有关细胞工程的叙述正确的是( ) A. 在植物细胞工程中通常用CaCl2处理植物细胞,以增大细胞壁的通透性 B. 用以治疗癌症的“生物导弹”就是以单克隆抗体作抗癌药物定向杀死癌细胞 C. 用聚乙二醇处理大量混合在一起的两种植物细胞的原生质体,所获得的融合细胞都具有双亲的遗传特性 D. 将某种B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后培养,获得特异性强的单克隆抗体,但当相应抗原位于靶细胞内时,该抗体不能与之发生特异性结合 【答案】D 14.下列与应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体相关表述中错误的是( ) ①X抗原注入小鼠体内,获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞 ②从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞 ③用促细胞融合因子使两种细胞发生融合 ④杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养 ⑤筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞 ⑥从腹水中提取抗体 A. 实验顺序应当是①②③⑤④⑥ B. 产生众多细胞的④过程可称为克隆 C. ③过程获得的细胞均可无限增殖 D. ④过程也可在液体培养基中进行 【答案】C 【解析】单克隆抗体的制备过程为:获得骨髓瘤细胞和经过免疫的B淋巴细胞、人工诱导细胞融合、筛选出杂交瘤细胞、筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞、体内或体外培养、提取抗体,因此实验顺序应当是①②③⑤④⑥,A正确;④为杂交瘤细胞的克隆化培养过程,属于细胞水平上的克隆,B正确;③过程获得的细胞不都能无限增殖,如浆细胞自身融合的细胞不能无限增殖,因此还需要用选择培养基进行筛选,C错误;③到⑤的过程中通常要经过两次筛选,第一次是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,第二次是利用抗体阳性检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,D正确。学@科网 15.单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述,错误的是 A. 特异性强,灵敏度高,并可大量制备 B. 制备过程中第二次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞 C. 可用聚乙二酵作诱导剂,促使细胞融合 D. 在制成“生物导弹”中主要起“瞄准”的作用 【答案】B 二、非选择题(2小题) 16.下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。 (1)____________技术是单克隆抗体技术的基础。 (2)根据培养基的用途分类,图中HAT培养基属于____________培养基。 (3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是__________________。 (4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外,还可以采用________________________________________________________________________。 (5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞________的特点,又具备淋巴细胞______________________的特点。 【答案】(1)动物细胞培养 (2)选择 (3)特异性强,灵敏度高 (4)灭活的病毒 (5)在体外大量增殖 分泌特异性抗体 【解析】单克隆抗体是通过细胞融合、动物细胞培养制备的,其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。由图示信息可知图中所用的培养基是选择性培养基,目的是筛选出杂交瘤细胞,并将杂交瘤细胞分开,筛选之后进行扩大培养,从而获得大量抗体。单克隆抗体与常规抗体相比,特异性强,灵敏度高,可被广泛应用到疾病诊断、治疗和预防等方面。动物细胞融合除了使用离心、振动、电激等物理方法和聚乙二醇等化学方法诱导外,通常还采用灭活的病毒诱导融合。抗体是由已免疫的B淋巴细胞分泌的,每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,要想得到大量的单一抗体,必须将同一种B淋巴细胞大量克隆,但在体外培养的条件下,一个B淋巴细胞不能无限增殖,而骨髓瘤细胞可以在体外无限增殖,因此,通过细胞融合,得到既能分泌抗体,又能无限增殖的杂交瘤细胞。学@科网 17.下图表示构建转人抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程。请据图回答问题: (1)图示过程涉及的生物技术有________、________、________。 (2)构建的基因表达载体除含有人抗体基因、标记基因外,还应具有________、________。 (3)向转基因小鼠注射特定的抗原后,从小鼠的________中提取B淋巴细胞;细胞X是________,体外培养细胞X所用的培养液必须添加________等天然成分,培养过程中会产生接触抑制吗?________。 【答案】 转基因技术 动物细胞培养 动物细胞融合 启动子 终止子 脾脏 杂交瘤细胞 血浆或血清 不会查看更多