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文档介绍
【生物】2021届一轮复习人教版微生物的培养与应用作业(湖北专用)
2021届 一轮复习 人教版 微生物的培养与应用 作业 (湖北专用) 1.(2019·青岛模拟)某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是( ) A.利用平板划线法对细菌进行计数 B.以石油为唯一碳源的培养基筛选 C.采用稀释涂布平板法分离菌种 D.称取和稀释土壤时应在火焰旁 解析 平板划线法能对细菌分离纯化,但不能对细菌进行计数,稀释涂布平板法可以分离菌种还可进行计数,A错误。 答案 A 2.下面是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是( ) A.在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌 B.划线操作时完全打开皿盖,划完立即盖上 C.接种时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的 D.第1区和第5区的划线最终要连接起来,以便比较前后的菌落数 解析 在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,但不能对培养基进行灭菌;进行划线操作时,左手将培养皿的皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖;注意接种时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的;第1区和第5区的划线不能相连。 答案 C 3.(2019·吉林模拟)下面关于土壤 中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述中,正确的是( ) A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素 B.筛选分解尿素的细菌时,应以尿素作为培养基中唯一的营养物质 C.统计样品中的活菌数目一般用平板划线法 D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变蓝,则表明筛选到了分解尿素的细菌 解析 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,A正确;筛选分解尿素的细菌的实验中,采用的是以尿素为唯一氮源的培养基,B错误;统计样品中的活菌数目一般用稀释涂布平板法,C错误;在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂将变红,这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素,D错误。 答案 A 4.(2019·海口调研)通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出( ) ①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④固氮细菌 A.④②③ B.①②③ C.①③④ D.只有③④ 解析 缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长,而固氮细菌能生长;在培养基中加青霉素可以抑制细菌和放线菌等原核生物细胞壁的合成,而霉菌属于真核生物,故能生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长,对放线菌的生长无影响。 答案 A 5.下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是( ) 成分 蛋白胨 葡萄糖 K2HPO4 伊红 美蓝 蒸馏水 含量 10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.065 g 1 000 mL A.从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属于选择培养基 B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋白胨 C.该培养基缺少提供生长因子的物质 D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用 解析 分析表中成分可知,该培养基中没有凝固剂,为液体培养基,该培养基的营养成分齐全,但存在伊红、美蓝等鉴别物质,属于鉴别培养基,A错误;该培养基中的蛋白胨既是唯一的氮源,也是碳源,而葡萄糖是绝大多数生物最常利用的碳源,B正确;该培养基中存在的无机盐和蛋白胨中的某些物质可以看作是生长因子,C错误;培养基调节完pH还要进行灭菌等操作后才能使用,D错误。 答案 B 6.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是( ) A.培养基分装到培养皿后进行灭菌 B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线 C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养 D.培养过程中每隔一周观察一次 解析 培养基灭菌后再分装到培养皿中,A错误;转换划线角度后要灼烧接种环,冷却后再从上次划线的末端开始进行划线,B正确;接种后的培养皿必须放在恒温箱中进行培养,C错误;培养过程中一般每隔12 h或24 h观察一次,D错误。 答案 B 7.(2018·江苏卷,31)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。如图所示为操作流程,请回答下列问题: (1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的________,及时对培养基进行分装,并进行________灭菌。 (2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约________(在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。 (3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有________。 a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌 b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落 c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量 d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株 (4)步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和________供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1 000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上________色细胞的个数应不少于________,才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。 解析 (1)配制培养基时,按照培养基配方准确称取各组分,之后溶解定容,再调节培养基的pH,一般情况下,采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。(2)对培养基进行高压蒸汽灭菌后,需将温度降至50 ℃左右后倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。(3)在对酵母菌进行划线纯化时,为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌;且在划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落;本实验是为了获得能以工业废甲醇作为碳源的酵母,故在实验过程中可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇耐受株。(4)酵母菌是兼性厌氧型真菌,有氧条件下大量繁殖。酵母菌扩大培养时,需保证充足的营养和氧气供应。“用等体积台盼蓝染液染色”,即计数室中培养液体积实际只有一半,即0.1÷2=0.05 mm3,设5个中方格中无色(活细胞不被台盼蓝染色)的细胞数目为x个,则3×109=x/5×104×103×2,解得x=30。 答案 (1)pH 高压蒸汽(湿热) (2)50 ℃ (3)a、b、d (4)氧气 无 30 8.下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是( ) A.应根据微生物代谢类型选择合适培养基并控制好培养基pH B.实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触 C.待培养基冷却至室温后,在酒精灯火焰附近倒平板 D.使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃 解析 不同的微生物所需的营养条件和 pH不尽相同,A正确;周围物品是没有经过灭菌处理的,已灭菌的材料用具与它们接触易染上杂菌,B正确;待培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,C错误;使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃,以防污染环境,D正确。 答案 C 9.微生物接种方法很多,平板划线法是最常用的一种。如图是平板划线示意图,划线的顺序为①②③④。下列操作方法错误的是( ) A.划线操作时,将沾有菌种的接种环插入培养基 B.平板划线后培养微生物时要倒置培养 C.不能将第④区域的划线与第①区域的划线相连 D.在②~④区域中划线前后都要对接种环进行灭菌 解析 平板划线法在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧,接种时划线操作是在火焰边进行。在每个区域中,只要有单个活细菌,通过培养即可获得所需菌落;平板划线后培养微生物时要倒置培养;接种是让细菌在培养基表面生长,所以不能将接种环插入培养基中,A错误。 答案 A 10.下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤,下列有关叙述正确的是( ) A.步骤①操作时,倒好平板后应立即将其倒置,防止水蒸气落在培养基上造成污染 B.步骤②接种环和试管口应先在火焰上灼烧,接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液 C.步骤③沿多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后可根据出现的单个菌落计数 D.步骤④是将培养皿放在恒温培养箱中培养,一段时间后所得到的都是X细菌的菌落 解析 步骤①操作时,倒好平板后应待其冷却凝固后,立即将其倒置,防止水蒸气落在培养基上造成污染,A错误;步骤②接种环和试管口应先在火焰上灼烧,接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液,B正确;步骤③沿多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后可出现的单个菌落,但不能用于计数,C错误;步骤④是将培养皿放在恒温培养箱中培养,一段时间后所得到的不一定都是X细菌的菌落,D错误。 答案 B 11.下列有关微生物分离、纯化及计数的叙述,错误的是( ) A.常用富含纤维素的培养基富集培养纤维素分解菌 B.平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散并计数 C.稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散 D.用血细胞计数板计数微生物时,实验结果往往偏大 解析 平板划线法可以用于分离微生物,但不能用于计数,稀释涂布平板法可以计数。用血细胞计数板计数微生物时,死菌、活菌都统计在内,实验结果往往偏大。 答案 B 12.关于实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作,下列说法正确的是( ) A.配培养基、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行 B.倒平板时,倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖 C.划线接种时,灼烧接种环后立即进行再次划线 D.划线接种结束后,需将平板倒置后放入培养箱中培养 解析 倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行,而配培养基不需要在酒精灯的火焰旁进行,A错误;倒入培养基后立即盖上培养皿,冷却后将平板倒过来放置,B错误;划线接种时,灼烧接种环后要等待其冷却后才能进行再次划线,C错误;划线接种结束后,需将平板倒置后放入培养箱中培养,D正确。 答案 D 13.下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述正确的是( ) A.高压蒸汽灭菌锅加盖时应按顺时针方向依次旋紧螺栓 B.选择培养基可以鉴定某种微生物的种类 C.待培养基冷却至室温时倒平板 D.统计样品中活菌数量时,接种方法可采用稀释涂布平板法 解析 高压蒸汽灭菌锅加盖时,将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内,再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气,A错误;鉴别培养基可以鉴定某种微生物的种类,B错误;待培养基冷却至50℃左右时倒平板,C错误;统计样品中活菌数量时,接种方法可采用稀释涂布平板法,D正确。 答案 D 14.(2019·河南信阳开学考)为了解鲜奶中细菌数量,某兴趣小组尝试对某品牌鲜奶中细菌含量进行测定。他们用无菌吸管从锥形瓶中吸取1 mL鲜奶稀释液至盛有 9 mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复两次,操作如下图所示。请回答有关问题: (1)鲜奶常采用________消毒,这种消毒方法使鲜奶的营养成分不被破坏。 (2)为了对鲜奶中细菌进行计数,常采用________法。使用该方法时,可取最终的鲜奶稀释液0.1 mL滴在培养基上,选择下列工具中的________(填序号)进行实验操作。若其中一个平板经培养后的菌落分布如图甲所示,出现图甲结果可能的操作失误是____________。 (3)若用上述方法培养设置3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测鲜奶中每毫升含细菌数为________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值________(填“偏高”或“偏低”),原因是____________________________。 (4)消毒后的鲜奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应做什么改动?________________________________。 解析 (1)巴氏消毒法是指70~75 ℃煮30分钟或80 ℃ 煮15分钟,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是牛奶的营养成分不被破坏。(2)常用稀释涂布平板法对鲜奶中的细菌进行计数;据图分析,图B为稀释涂布平板法中使用的涂布器;图甲细菌分布不均匀可能是涂布不均匀导致的。(3)根据题意分析,鲜奶中每毫升含细菌数为(35+34+33)÷3÷0.1×104=3.4×106个。由于经此方法接种培养时当两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算,所以运用这种方法统计的结果往往较实际值偏低。(4)消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用稀释涂布平板法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应减少稀释次数。 答案 (1)巴氏消毒法 (2)稀释涂布平板 B 涂布不均匀 (3)3.4×106 偏低 个别菌落可能是由两个或多个细菌形成的 (4)稀释次数减少 15.细菌经人工诱变后,部分细菌调节机制中的某种酶被破坏,其细胞代谢中某些化学反应不能进行,就形成了营养缺陷型菌株,在工业生产上有广阔的应用前景。以下是实验人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题。 (1)微生物生长需要的营养物质有水、碳源、________和________,制备上图的培养基还需要加入________。 (2)制备培养基的步骤包括________________、灭菌、倒平板,调节pH应该在灭菌________(填“前”或“后”),培养基的灭菌方法一般为________________。 (3)根据用途分类,图中基本培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。过程①的接种方法为________________。 (4)采用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同。为了完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定,实验人员应挑取________(填“菌落A”或“菌落B”)接种培养,并进一步鉴定。 解析 (1)微生物生长需要的营养物质包括水、无机盐、碳源、氮源等,图示培养基上最后都长出了菌落,说明为固体培养基,因此制备培养基时需要加入凝固剂,常见的凝固剂是琼脂。(2)制备培养基的基本步骤包括计算、称量、溶化、调节pH、灭菌、倒平板,该过程中注意应该先调节pH再灭菌,以防止杂菌污染;培养基灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌法。(3)图示过程最终筛选出了氨基酸缺陷型菌株,说明图中基本培养基属于选择培养基;过程①使菌落均匀分布,因此该接种方法为稀释涂布平板法。(4)比较基本培养基和完全培养基中的菌落可知,菌落A为氨基酸缺陷型菌株,因此需要用接种针挑取菌落A接种培养,并进行进一步的鉴定。 答案 (1)氮源 无机盐 凝固剂(或琼脂) (2)计算、称量、溶化 前 高压蒸汽灭菌法 (3)选择 稀释涂布平板法 (4)菌落A 亮剑高考23 微生物的分离与培养 (时间:15分钟) 1.下列检测某熟制食品中大肠杆菌是否超标的实验操作,不合理的是( ) A.待检测食品需要经过灭菌操作后取样检测 B.应设置未接种的培养基,作为实验的对照 C.用稀释涂布平板法接种计数大肠杆菌的活菌数 D.接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养 解析 待检测食品不能经过灭菌操作后取样检测,否则检测不到大肠杆菌,或者统计值偏小。 答案 A 2.在三个培养皿中各加入等量但不同种的大肠杆菌培养基,在培养皿中培养36 h后统计细菌菌落数(见下表)。下列叙述错误的是( ) 培养皿 培养基成分 培养皿中的菌落数 Ⅰ 琼脂、糖类 35 Ⅱ 琼脂、糖类和维生素 250 Ⅲ 琼脂和维生素 0 A.培养皿Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ表明琼脂是培养基中必需的营养成分 B.培养皿Ⅰ和Ⅱ说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子 C.培养皿Ⅱ和Ⅲ说明糖类是大肠杆菌需要的碳源 D.本实验使用的是固体、不完全培养基 解析 琼脂是凝固剂,不是营养成分;培养皿Ⅰ和Ⅱ的区别在于是否添加维生素,结果说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子;培养皿Ⅱ和Ⅲ 的区别在于是否添加糖类,结果说明糖类是大肠杆菌需要的碳源;本实验添加了琼脂,使用的是固体养基,营养成分不完全,缺少无机盐、氮源等,说明使用的是不完全培养基。 答案 A 3.在分离、纯化大肠杆菌实验中,划线接种(图1)、培养结果(图2)如下图。有关叙述错误的是( ) A.接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌 B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落 C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次 D.图1中a区域为划线的起始位置 解析 一般采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌,A正确;菌液经过连续划线,菌液中的菌体会越来越少,最终会获得单个细菌形成的菌落,B正确;每次划线前后都需要将接种环灼烧灭菌,因此按照图中划线顺序(d→c→b→a),整个划线过程需要对接种环灼浇5次,C正确;每次划线的菌种来自上一区域的末端,因此划线的起始区域菌落最多,由图乙可推知,图甲中的d区域菌落多,为划线的起始位置,D错误。 答案 D 4.某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A,研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。下列有关叙述错误的是( ) A.培养基中加入化合物A作为唯一碳源,目的是为了筛选目的菌 B.实验培养过程中进行振荡培养,可使目的菌和培养液充分接触 C.实验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌污染 D.将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种 解析 本实验的目的是“筛选到能高效降解化合物A的细菌” ,因此培养基中加入化合物A作为唯一碳源,目的是为了筛选目的菌,A正确;实验培养过程中进行振荡培养,可使目的菌和培养液充分接触,B正确;实验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌污染,C正确;本实验中需要振荡培养,因此所用培养基为液体培养基,D错误。 答案 D 5.下列有关微生物培养的叙述,正确的是( ) A.溶化牛肉膏时,称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 B.涂布接种时,涂布器应在干热灭菌箱中灭菌冷却后再使用 C.纯化培养时,培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养 D.观察菌落时,应将培养皿盖拿掉后在显微镜下进行观察计数 解析 涂布器使用前常浸在酒精中,然后再灼烧冷却后使用;纯化培养时,培养皿倒置在恒温培养箱内培养,但是不需要摇床处理;观察菌落时不能打开培养皿盖且无需在显微镜下观察。 答案 A 6.日前微信传言手机屏幕细菌比马桶按钮上的多。两个兴趣小组分别展开如下图的实验过程。下列分析错误的是( ) A.通过观察菌落的形态、大小,可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物 B.以上两组实验在接种过程中均需要用到酒精灯、接种环等 C.两组实验操作均正确且完全一致,但结果截然不同,原因可能是取样部位不同 D.该实验对照组可以设置为取相同培养基接种等量无菌水进行培养 解析 由实验结果可知,两组实验均采用稀释涂布平板法,在接种过程中均需要用到酒精灯、涂布器等。 答案 B 7.已有研究证实,在体外培养条件下耐药基因能够在不同种属的乳酸菌菌株中发生转移。鉴于此,科研小组对市售酸奶中的乳酸菌进行分离和 鉴定,通过药物敏感性实验确定菌株的耐药谱,同时调查环丙沙星、庆大霉素、四环素等耐药基因在这些菌株中的分布情况,为乳酸菌的安全评价提供参考依据。请分析回答下列有关乳酸菌培养过程中的相关问题: (1)本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙,乳酸菌产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙,从而在菌落周围形成溶钙圈。从功能角度分析,本研究使用的培养基属于________。 (2)在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时,锅内水加热煮沸后,必须____________,以保证锅内气压上升、温度升至121 ℃,灭菌后的培养基应适当冷却后,在________附近倒平板。 (3)在酸奶制作过程中,要严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键,通常所指的发酵条件包括________________________(至少写出两项)。一般情况下含抗生素牛奶不宜制作酸奶,原因是_________________________________________。 (4)“检测乳酸菌对环丙沙星、庆大霉素、四环素耐药性”实验中,________(选填“需要”或“不需要”)设置对照实验,培养基配制好后再分别接种___________。 (5)在统计菌落时,发现0.1 mL稀释倍数为105的稀释液在平板上的平均菌落数为40个,则每毫升样液中的乳酸菌数大约为________个。用此法测定的乳酸菌数量比实际活菌数量________,原因是_______________________________________。 解析 (1)培养基中加入一定量的碳酸钙,与乳酸菌产生的乳酸生成可溶性的乳酸钙,在菌落周围形成溶钙圈,可以鉴别出乳酸菌菌落,从功能角度分析,该培养基属于鉴别培养基。(2)使用高压蒸汽灭菌锅时,必须将锅内冷空气彻底排出,因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸气的温度低于饱和蒸汽的温度。灭菌后的培养基应冷却到50 ℃左右,在酒精灯火焰附近倒平板,防止空气中杂菌污染。(3)酸奶制作过程中利用的主要菌种是乳酸菌,乳酸菌是厌氧型细菌,需要无菌、密闭(无氧)的发酵条件。乳酸菌是细菌,抗生素会抑制乳酸菌的生长,所以一般情况下含抗生素牛奶不宜制作酸奶。(4)检测乳酸菌对环丙沙星、庆大霉素、四环素耐药性实验中,需要设置不添加抗生素的培养基作对照,培养基配制好后四组分别接种等量相同的待检测的乳酸菌菌种。(5) 0.1 mL稀释倍数为105的稀释液在平板上的平均菌落数为40个,则每毫升样液中的乳酸菌数大约为40×10×105=4×107 个。由于一个菌落可以由一个或多个乳酸菌形成,所以计算的乳酸菌数量比实际活菌数量少。 答案 (1)鉴别培养基 (2)将锅内冷空气彻底排除 酒精灯火焰 (3)无菌、密闭(无氧)(至少写出两项) 抗生素抑制了乳酸菌的生长 (4)需要 等量相同的待检测的乳酸菌菌种 (5)4×107 少 一个菌落可以由一个或多个乳酸菌形成查看更多