临床医学检验技师初级（师）临床免疫学及检验（荧光免疫技术）-试卷1

临床医学检验技师初级（师）临床免疫学及检验（荧光免疫技术）-试卷1

临床医学检验技师初级【师】临床免疫学及检验【荧 光免疫技术】-试卷 1 (总分：74 分，做题时间：90 分钟) 一、 A1 型题(总题数：28，score:56 分) 1.荧光色素中呈现明亮黄绿色荧光的是 【score:2 分】 【A】藻红蛋白 【B】四甲基异硫氰酸罗丹明 【C】四乙基罗丹明 【D】异硫氰酸荧光素 【此项为本题正确答案】 【E】亮绿 本题思路：异硫氰酸荧光素呈明亮的黄绿色荧光；四 乙基罗丹明呈橘红色荧光；四甲基异硫氰酸罗丹明呈 橙红色荧光；藻红蛋白呈明亮的橙色荧光。 2.荧光抗体技术中最常用的荧光素为 【score:2 分】 【A】FITC 【此项为本题正确答案】 【B】RB200 【C】TRITC 【D】PT 【E】R-RE 本题思路：FITC 为异硫氰酸荧光素，黄绿色荧光， 便于观察且标记容易，为最常用的荧光素。 3.下列何种方法的灵敏度最高 【score:2 分】 【A】荧光法 【B】磷光法 【C】分光光度法 【D】比浊法 【E】化学发光法 【此项为本题正确答案】 本题思路：化学发光法是将发光系统与免疫反应相结 合，以检测抗原或抗体的方法，它既具有免疫反应的 特异性，更兼具有发光反应的高敏感性。 4.目前公认的最有效的检测抗核抗体的方法 【score:2 分】 【A】ELISA 【B】放射免疫技术 【C】直接荧光法 【D】间接荧光法 【此项为本题正确答案】 【E】补体法 本题思路：由于抗核抗体(ANA)的复杂性及多样性， 故测定方法繁多。目前 ANA 常用的方法有免疫荧光 法、放射免疫法、ELISA、免疫双扩散、对流免疫电 泳及免疫印迹技术等。常用间接免疫荧光法 (indirect im-munofluorescence，IIF)作为总的 ANA 筛选试验。 5.作为荧光抗体标记的荧光素必须具备的条件中，哪 项与提高观察效果有关 【score:2 分】 【A】必须具有化学上的活性基团能与蛋白稳定结 合 【B】性质稳定不会影响抗体活性 【C】荧光效率高，荧光与背景组织色泽对比鲜 明 【此项为本题正确答案】 【D】与蛋白质结合的方法简便迅速 【E】与蛋白质的结合物稳定 本题思路：用于标记抗体的荧光素应符合一系列的要 求，其中为了观察方便荧光色泽与背景应当对比鲜 明。 6.荧光免疫技术中，间接法中所使用的第二抗体可以 是 【score:2 分】 【A】抗种属特异性 Igh 荧光抗体 【B】抗种属特异性 IgG 荧光抗体 【C】抗种属特异性 IgM 荧光抗体 【D】以上都正确 【此项为本题正确答案】 【E】以上都不正确 本题思路：间接法中所使用的第二抗体是针对第一抗 体的抗抗体，可以是抗种属特异性 IsA、IgG、IgM 抗 体。 7.实验本身即可避免内源性非特异性荧光干扰的检测 方法为 【score:2 分】 【A】时间分辨荧光免疫测定 【此项为本题正确 答案】 【B】荧光偏振免疫测定 【C】荧光酶免疫测定 【D】直接荧光抗体染色法 【E】间接荧光抗体染色法 本题思路：时间分辨荧光免疫测定利用荧光寿命较长 的镧系元素，延长荧光测量时间，待寿命短的自然本 底荧光完全衰退后再行测定，从而有效地消除非特异 性荧光。 8.下列描述不正确的有 【score:2 分】 【A】荧光免疫技术不宜做培养细胞染色 【B】可对标本切片中组织或细胞表面抗原进行定 量和定位 【此项为本题正确答案】 【C】其主要步骤为标本制作、荧光抗体染色、荧 光显微镜检查 【D】标本的制作直接影响检测结果，是成功的关 键步骤 【E】荧光免疫技术不宜做组织细胞染色 本题思路：免疫荧光技术可以定性和定位，不能定 量。 9.免疫荧光技术的基本原理是 【score:2 分】 【A】将特异性抗体标记上荧光检测抗原 【B】将特异性抗原标记上荧光检测抗体 【C】将特异性抗体标记上荧光检测抗原或抗 体 【此项为本题正确答案】 【D】将特异性抗原标记上荧光检测抗原或抗体 【E】以上都不对 本题思路：免疫荧光技术中，直接法可以用于检测抗 原。而间接法除了可以检测抗原外，还可以检测抗 体，如抗核抗体的检测。 10.下列哪项方法不属于免疫荧光细胞化学技术 【score:2 分】 【A】直接法 【B】夹心法 【C】间接法 【D】补体法 【E】捕获法 【此项为本题正确答案】 本题思路：用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内 抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织) 化学技术。免疫荧光细胞化学分直接法、夹心法、间 接法和补体法。 11.FTTC 的最大吸收光波长为 【score:2 分】 【A】405～450μm 【B】450～490μm 【C】490～495 μm 【此项为本题正确答案】 【D】495—550μm 【E】600～630μm 本题思路：FITC 为异硫氰酸荧光素，黄绿色荧光， 最大吸收光波长为 490～495 μm，最大发射光波长 为 520～530μm。 12.下列关于荧光效率，叙述正确的是 【score:2 分】 【A】指物质产生荧光的效率 【B】指荧光素将吸收的光能转化为荧光的百分 比 【此项为本题正确答案】 【C】荧光素产生荧光的强度 【D】特异荧光与非特异荧光强度比 【E】荧光素接受激发光后产生的荧光色泽 本题思路：荧光效率为荧光素基本特性之一，指荧光 素将吸收的光能转化为荧光的百分比。 13.荧光寿命是指 【score:2 分】 【A】荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧光 随时间而衰减到一定程度所用的时间 【此项为本题 正确答案】 【B】非荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧 光随时间而衰减到一定程度所用的时间 【C】荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧光 随时间而增强到一定程度所用的时间 【D】非荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧 光随时间而增强到一定程度所用的时间 【E】以上都不是 本题思路：荧光寿命是指荧光物质被激发产生荧光后 随时间衰减到一定程度所用的时间。 14.荧光抗体染色技术中，特异性最高，非特异性染 色最低的方法是 【score:2 分】 【A】直接法 【此项为本题正确答案】 【B】间接法 【C】补体结合法 【D】双标记法 【E】电泳法 本题思路：荧光抗体染色技术中，直接法的特异性最 高，非特异性荧光染色因素少。 15.关于荧光抗体的保存，下列叙述正确的是 【score:2 分】 【A】应注意防止抗体失活和荧光淬灭 【B】最好小量分装，一 20℃冻存可保存 2～3 年 【C】真空干燥后可长期保存 【D】稀释后的抗体不宜长时间保存，在 4℃可保 存 1～3 天 【E】以上说法均正确 【此项为本题正确答案】 本题思路：荧光抗体的保存应注意防止抗体失活和荧 光淬灭。最好小量分装，一 20℃冻存可保存 2—3 年。真空干燥后可长期保存。稀释后的抗体不宜长时 间保存，在 4℃可保存 1～3 天。 16.荧光抗体制备完成后应对其效价加以鉴定，一般 抗原含量为 1 g／L 时，理想的抗体效价为 【score:2 分】 【A】＞1：1 【B】＞1：2 【C】＞1：4 【D】＞1：8 【E】＞1：16 【此项为本题正确答案】 本题思路：荧光抗体制备完成后应对其效价加以鉴 定。可采用双向免疫扩散试验测定，抗原含量为 1 g ／L 时，抗体效价为＞1：16 较为理想。 17.用于标记抗体的荧光素应符合下列要求，除外 【score:2 分】 【A】与蛋白质分子形成离子键 【此项为本题正 确答案】 【B】荧光效率高，与蛋白结合后仍能保持较高的 荧光效率 【C】荧光色泽与背景组织色泽对比鲜明 【D】与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的理化性 质 【E】与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的免疫学 性质 本题思路：许多物质都可产生荧光现象，但并非都可 用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为 染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光 染料。 18.温度对荧光分析影响的正确描述是 【score:2 分】 【A】溶液温度降低，荧光效率增加，荧光强度增 加 【此项为本题正确答案】 【B】溶液温度升高，荧光效率不变，荧光强度不 变 【C】溶液温度降低，荧光效率不变，荧光强度不 变 【D】溶液温度升高自熄灭现象减少 【E】溶液温度升高，荧光效率增加，荧光强度增 加 本题思路：影响荧光强度的因素包括：①溶剂增大溶 剂的极性，将使荧光强度减弱；②荧光物质的浓度： 荧光物质浓度太高时，会发生自熄灭现象；③温度： 温度升高时荧光效率降低；④溶液的 pH 值改变也会 造成影响。 19.下列有关荧光素标记抗体染色标本的叙述中，不 正确的说法是 【score:2 分】 【A】切片标本一般不宜固定 【此项为本题正确 答案】 【B】材料要新鲜并立即处理或及时冷藏 【C】在染色、洗涤和封埋过程中不可发生溶解和 变性 【D】标本切片要求尽量薄 【E】组织材料可制备成石蜡切片或冷冻切片 本题思路：在制作标本过程中应力求保持抗原的完整 性，并在染色、洗涤和封埋过程中不发生溶解和变 性，也不会扩散至临近细胞或组织间隙中去。标本切 片要求尽量薄些，以利抗原抗体接触和镜检。组织材 料可制备成石蜡切片或冷冻切片。细胞或细菌可制成 涂片，涂片或印片制成后应迅速吹干、封装，置一 10℃保存或立即使用。 20.关于荧光素标记抗体染色技术中 F／P 值叙述正确 的是 【score:2 分】 【A】F／P 值越高说明抗体分子上结合的荧光素越 少 【B】一般用于组织切片的荧光抗体染色以 F／ P=2．4 为宜 【C】用于活细胞染色以 F／P=1．5 为宜 【D】该比值是指荧光素结合到蛋白上的量 【此 项为本题正确答案】 【E】FITC 标记的荧光抗体稀释至 A495 nm 约为 1．0 本题思路：荧光素结合到蛋白上的量的重要指标是荧 光素与蛋白质的结合比率(F／p)。其计算方法是： FTTC 标记的荧光抗体稀释至．A280 nm 约为 1．0， 分别测定 A280 nm 和 A495 nm 的值。F／P 比值越 大，表明抗体分子结合的荧光素越多，反之则结合越 少。一般用于组织切片的荧光抗体染色以 F／P=1．5 为宜，用于活细胞染色以 F／P=2．4 为宜。 21.荧光抗体染色结果的判断不正确的是 【score:2 分】 【A】阳性细胞的显色分布有胞质型、胞核型和膜 表面型三种类型，显色深浅可作为抗原定性、定位和 定量的依据 【B】标本的特异性荧光强度一般用“+”表示， “++”以上判定为阳性 【C】每次实验时均需设立严格的实验对照(阳性和 阴性对照)，阴性对照应呈“一”或“±” 【D】根据呈“+”、“一”的血清最高稀释度判定 特异性抗体效价 【E】“++”代表荧光较弱但清楚可见 【此项为 本题正确答案】 本题思路：标本的特异性荧光强度一般用“+”表 示，“一”为无或仅见极微弱荧光；“+”为荧光较 弱但能清楚可见；“++”为荧光明亮；“+++”为耀 眼的强荧光。 22.流式细胞仪采集侧向角散射光反应细胞的 【score:2 分】 【A】荧光的强度 【B】细胞的大小 【C】细胞的多少 【D】细胞表面的光滑程度和细胞内部结构的复杂 程度 【此项为本题正确答案】 【E】细胞的变形能力 本题思路：流式细胞仪采集的前向角散射光反应细胞 的大小，侧向角反应细胞表面的光滑程度和细胞内部 的复杂程度。 23.时间分辨荧光免疫分析技术的特点不包括 【score:2 分】 【A】标记物为镧系元素，Eu 3+ 最常用 【B】标记方法有双抗体夹心法、固相抗体竞争 法、固相抗原竞争法 【C】测定灵敏度高、分析范围宽 【D】标记结合物稳定，有效使用期长，本底较 低 【此项为本题正确答案】 【E】测量快速、易自动化、无放射性污染 本题思路：时间分辨荧光免疫分析技术易受环境、试 剂和容器中的镧系元素离子的污染，使本底增高。 24.关于荧光偏振免疫测定的说法不正确的是 【score:2 分】 【A】常用 FITC 标记小分子抗原 【B】测定样品用量少 【C】荧光素结合稳定使用寿命长 【D】灵敏度较非均相荧光免疫测定法高 【此项 为本题正确答案】 【E】快速、易自动化、试剂盒专属性强 本题思路：荧光偏振免疫测定的灵敏度较非均相荧光 免疫测定法低。 25.测定 HIV 患者淋巴细胞亚群最简单、快速的方法 是 【score:2 分】 【A】时间分辨荧光免疫 【B】荧光酶免疫测定 【C】电化学发光检测 【D】荧光偏振免疫测定 【E】流式细胞仪技术 【此项为本题正确答案】 本题思路：目前临床测定外周血淋巴细胞亚群的常用 方法是流式细胞仪技术，针对淋巴细胞各个亚群的细 胞表面抗原采用不同的荧光抗体进行标记，可以自动 处理各种数据。时间分辨荧光免疫测定常用于蛋白 质、激素、药物、肿瘤标志物等。荧光偏振免疫测定 特别适用于血清和尿液中小分子物质的测定；荧光酶 免疫测定常用于激素、肿瘤标志物、心肌损伤标志物 和凝血因子等。 26.直接免疫荧光技术鉴别特异性病原体时，荧光素 是被结合到 【score:2 分】 【A】微生物表面 【B】针对微生物的特异性抗体 【此项为本题正 确答案】 【C】针对特异性抗体的抗体 【D】针对微生物的非特异性抗体 【E】针对人球蛋白的抗体 本题思路：直接免疫荧光技术，荧光素是被结合到针 对检测抗原的特异性抗体上。 27.关于荧光免疫自动化分析，下列描述错误的是 【score:2 分】 【A】司脱克位移越大，检测的特异性越强 【B】在发光反应中一定具有激发光使荧光物质产 生发射光 【C】最常用的有时间分辨荧光免疫测定和荧光偏 振免疫测定两种类型 【D】是将抗原抗体结合反应与荧光物质发光分析 和计算机技术有机结合的自动化免疫分析技术 【E】激发光和发射光的波长相同 【此项为本题 正确答案】 本题思路：荧光免疫自动化分析中，其激发光和发射 光的波长不同，荧光的发射光波长总比激发光波长 长。 28.下列关于荧光显微镜观察时的注意事项，错误的 是 【score:2 分】 【A】暗室内观察 【B】染色后标本立即观察 【C】不宜长时间观察一个视野 【D】宜用无荧光镜油 【E】温度不影响判读结果 【此项为本题正确答 案】 本题思路：荧光抗体染色一般可用 25～37℃30 分 钟，不耐热抗原的检测则以 4℃过夜为宜。 二、 A2 型题(总题数：1，score:2 分) 29.实验：将痰液直接涂在载玻片上干燥固定，将荧 光标记的兔抗结核杆菌抗体滴加到标本表面，37℃温 育 1 小时，洗片晾干，荧光显微镜观察可见着色的杆 菌。此方法为 【score:2 分】 【A】间接法 【B】直接法 【此项为本题正确答案】 【C】夹心法 【D】补体结合法 【E】双标记法 本题思路：免疫荧光直接法是用特异荧光抗体直接滴 加于标本上，使之与抗原发生特异性结合，是用荧光 抗体染色技术直接检测抗原的方法。 三、 B1 型题(总题数：2，score:16 分) A．直接法 B．间接法 C．夹心法 D．补体结合法 E．双标记法【score:8 分】 (1).用 FITC 和 RB200 标记不同的抗体，对同一标本 做荧光染色为【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【E】 【此项为本题正确答案】 本题思路： (2).用特异荧光抗体滴加在标本上，与抗原发生特异 性结合的是【score:2 分】 【A】 【此项为本题正确答案】 【B】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (3).实验中由针对抗原的第一抗体和用荧光标记针对 第一抗体的第二抗体相继作用的是【score:2 分】 【A】 【B】 【此项为本题正确答案】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (4).在抗原和抗体反应时加入豚鼠血清，用荧光标记 的抗补体抗体示踪的是【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【此项为本题正确答案】 【E】 本题思路：直接法是用特异荧光抗体直接滴加在标本 上使之与抗原发生特异性结合的方法；间接法由针对 抗原的第一抗体和用荧光标记针对第一抗体的第二抗 体相继作用的方法；补体结合法是在抗原和抗体反应 时加入豚鼠血清，用荧光标记的抗补体抗 体示踪的 方法；双标记法是用 FITC 和 RB200 标记不同的抗 体，对同一标本做荧光染色，同时可见到橙红和黄绿 两种荧光色彩的方法。 A． 藻红蛋白 B．四甲基异硫氰酸罗丹明 C．四乙基 罗丹明 D．异硫氰酸荧光素 E．亮绿【score:8 分】 (1).呈现橙红色荧光的是【score:2 分】 【A】 【B】 【此项为本题正确答案】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (2).呈现明亮黄绿色荧光的是【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【此项为本题正确答案】 【E】 本题思路： (3).呈现明亮橙色荧光的是【score:2 分】 【A】 【此项为本题正确答案】 【B】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (4).呈现橘红色荧光的是【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【此项为本题正确答案】 【D】 【E】 本题思路：