细胞生物学重点

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细胞生物学重点

名词解释:1、原位朵交:在不破坏细胞或细胞器的情况下,川核酸探针检测特定核背酸序列在染色体上的精确位置的技术,称为原位杂交2、原代培养:是指ft接从机体取下细胞、纽织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。3、传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。4、细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。5、细胞系(CellLine):原代培养物经首次传代成功即成细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系(LineageofCells)所组成。6、细胞融合(cellfusion)乂称细胞杂交(cellhybridization)是指在自然条件下或人工方法(物理,化学,生物等方法)将不同种生物或同种生物不同类型两个或多个真核细胞合并成一个双核或多核细胞的生物学现象和过程。7、膜骨架:指细胞膜下与膜聚白相连的山纤维蛋白纽成的网架结构(meshwork),它参与维持质膜的形状并协助质膜完成多种生理功能。它的特点是粘质性髙,有较强的抗拉能力。8、单克隆抗体:来向单个细胞克隆所分泌的抗体分子。9、电子载体:在电子传递过程中与释放的电子结合并将电子传递卜去的物质称为电子载体。10、内膜系统:细胞内膜系统是在结构、功能、乃至发牛上相关的,由膜围绕的细胞器或细胞结构。主要包括内质网、高尔基体、溶酶体、胞内体和分泌泡等。11、微粒体:细胞匀浆等人工过程,破碎的内质网形成的近似球形的囊泡12、信号识别颗粒:由六条不同多肽和一个小RNA分子构成的RNP颗粒。识别并结合从核糖体中合成出来的内质网信号序列,指导新牛多肽及核糖体和mRNA附着到内质网膜上。13、共转移:在细胞质屮起始合成后转移到粗面内质网上合成的蛋白质,肽链在粗而内质网膜上边合成边转移到内质网腔中称为共转移。14、后转移:蛋白质在细胞质基质中合成以后在某种信号指导下再转移到线粒体、叶绿体、过氧化轼体等细胞器中的转移方式.15、蛋白分选:依靠蛋白质本身信号序列,从蛋白质起始合成部位转运到其功能发挥部位的过程。蛋门质分选不仅保证了蛋白质的正确定位,也保证了蛋白质的生物学活性。16、微体:过氧化物酶体(peroxisom)乂称微体(microbody),是山单层膜[韦I绕的内含一种或儿种氧化酶类的异质性细胞器。17、蛋H激酶:一类磷酸转移酶,其作用是将ATP的Y磷酸基转移到底物特定的氨基酸残基上,使蛋白质磷酸化。18、核定位信号(nuclearlocalizationsignal,NLS):是存在丁-亲核蛋白内的一些短的氨基酸序列片段,富有碱性氨基酸残基,具有定向定位作用。19、核小体(nucleosome):染色质的基木结构单位一核小体20>染色质(chromatin):指间期细胞核内由DNA>组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构,是间期细胞遗传物质存在的形式21、常染色质(eucluomatin):指间期核内染色质纤维折卷压缩程度低,处于伸展状态,用碱性染料染色时着色浅的那些染色质。22>异染色质(heterochromatin):是指间期细胞内染色质丝折叠丿衣缩程度高,处于凝集状态,川碱性染料染色时着色深的那些染色质。异染色质乂分为结构异染色质或称组成性异染色质和兼性异染色质。23、结构异染色质(conslinnivcheterochromatin):除复制期以外,在報个细胞周期均处于聚缩\n状态,DNA包装比在整个细胞周期屮基木没有较人变化的异染色质。24、兼性异染色质(facultativeheterochromatin):在某些细胞类型或一定的发育阶段,原來的常染色质聚缩,并丧失基因转录活性,变为异染色质25、细胞周期的调控系统:调节细胞周期运行的蛋白质网络系统26、细胞凋亡:是指为维持内环境稳定,由棊因控制的细胞白主的有序的结束生命的过程。27、细胞分化:由--种相同的细胞类型经细胞分裂后逐渐在形态、结构和功能上形成稳定性差异,产生不同的细胞类祥的过程称为细胞分化。28、干细胞:一类具有分裂和分化能力的细胞。29、全能性:是指细胞经分裂和分化后仍具有产牛完整有机体的潜能或特性。30、癌基因(oncogene):原癌基因突变体,这些基因编码的蛋白质使细胞的生长失去控制,并转变为癌细胞,故称为癌基]大I。31、原癌基因(proto-oncogene):是细胞的正常基因,它们编码的蛋白质是维持正常细胞生命活动所必须的,通常参与细胞的生长与增殖的调节。32、抑癌基因(lumor-supprcssorgene):是一类抑制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤形成的基因,也称为抗癌基因。33、管家基W(house-keepinggenes):管家基因是指所有细胞中均要表达的-•类基因,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的在真核细胞的细胞质中,除去可分辨的细胞器以外的胶状物质,称细胞质基质。34、细胞通讯是指一个细胞发出的信息通过介质传递到另一个细胞并产牛相应的反应。35、膜的不对称性:质膜的内外两层的组分和功能有明显的差异,称为膜的不对称性。36、信号通路:细胞接受外界信号,通过…整套特定的机制,将胞外信号转导为胞内信号,最终调节特定棊因的表达,引起细胞的应答反应,这种反应系列称为信号通路。37、细胞骨架是细胞内以责口质纤维为主要成分的网络结构,rfl主耍的三类蛋口纤维构成,包括微管、肌动蛋白纤维和屮间纤维。38、细胞周期指从一次细胞分裂结束开始,到下一次细胞分裂结束所经历的整个过程。分为:间期(物质枳累期或静止期)和细胞分裂期。39、细胞同步化是指在自然过程屮发生的,或经人为处理造成的细胞周期的同步化简答:1、真核细胞与原核细胞的区别。原核细胞真核细胞代表生物细菌、蓝藻和支原体原生生物、真茵、植物和动物细胞人小较小(l・10um)较人(—般5~100卩m)细胞膜有(多功能性)有核糖体70S(由50S和30S两个80S(由60S和40S两个大小大小亚基组成)亚基组成)细胞器极少有细胞核、线粒体、叶绿体,内质网,溶酶体等细胞核无核膜和核仁有核膜和核仁染色体一个细胞只有一条一个细胞有两条以上的染色双链DNA,DNA不与或DNA与蛋口质联结在一起很少与组蛋白结合DNA环状,存在于细胞质很长的线状分子,含有很多非编码区,并被核膜所包裹。2、真核细胞与原核细胞最根本的区别:第一是细胞膜系统的分化与演变。笫二是遗传信息量与遗传装置的扩增与复杂化。3、如何分离分析细胞组分?\n一、用超离心技术分离细胞器与生物大分子及其复合物一般步骤:①匀浆化②离心处理③收集分析⑴差速离心⑵等密度离心法二、细胞内核酸、蛋口质、酶、糖与脂类等的显示方法核酸显示方法Feulgen反应糖类显示方法过碘酸雪夫反应酶组织化学染色法脂类显示方法三、特异蛋白抗原的定位与定性免疫细胞化学技术(1)免疫荧光技术(2)免疫电镜技术四、细胞内特异核酸的定位与定性五、放射自显影术六定量细胞化学分析技术显微分光光度测定技术流式细胞术4、单克隆抗体技术原理?单克隆抗体:来自单个细胞克隆所分泌的抗体分子。由不能连续分裂但可分泌抗体的脾细胞即B淋巴细胞与能连续分裂但不分泌抗体的骨髓瘤细胞进行融合形成既町以连续分裂又能针对一个抗原决定簇分泌抗体的杂交瘤细胞。5、细胞膜的化学组成:细胞膜主要由脂质和蛋白质组成,还有少量的糖类。6、膜蛋白的分离方法。去垢剂:是-•端亲水一端疏水的双亲媒性分子,它们具有极性端利非极性的碳氢链。当它们与膜蛋白作用时,可以用非极性端同蛋白质的疏水区作用,取代膜脂,极性端指向水中,形成溶于水的去垢剂瑕蛋门复合物,从而使膜蛋白在水中溶解、变性、沉淀。7、如何证明细胞膜的流动性?1•膜脂的运动2.膜蛋白的流动荧光标记技术和光脱色恢复技术8、膜的不对称性。质膜的内外两层的组分和功能有明显的差异,称为膜的不对称性。1.膜脂的不对称膜脂的不对称性是指同一种膜脂分子在膜的脂双层中呈不均匀分布。2.膜蛋白的不对称性膜蛋白的不对称性是指每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有明确的方向性。各种膜蛋口在膜上都有特定的分布区域。9、比较主动运输与被动运输的异同。被动运输类型:简单扩散(simplediffusion)特点:①沿浓度梯度(或电化学梯度)扩散;②不需要提供能量;③没有膜蛋白的协助。协助扩散(facilitateddiffusion)特点:①转运速率高;\n②存在最大转运速率;③有膜转运蛋白参与,有特异性主动运输①ATP直接提供能量驱动的主动运输②ATP间接提供能量的主动运输--协同运输(cotransport)特点:①山髙浓度到低浓度②ATP直接或间接供能、光能驱动、需载体蛋门协助10、线粒体内膜、外膜、膜间隙及基质中的标志性酶是什么?内膜:细胞色索氧化酶外脱:单胺氧化酶膜间隙:腺甘酸激酶基质:苹果酸脱氢酶11、为什么说线粒体是半自主性细胞器?线粒体具有独立的遗传体系,它除了有白己的遗传物质-线粒体DNA夕卜,还有蛋白质合成系统(mRNA、rRNA、tRNA)和线粒体核糖体等。线粒休中的蛋口质只有约20种是线粒体基因编码的,但组成线粒体约有上千种之多,所以人多数线粒体蛋口质还是由核基因编码。12、什么是细胞质基质?其主要结构组成与功能是什么?在真核细胞的细胞质中,除去可分辨的细胞器以外的胶状物质,称细胞质基质。主要成分:屮间代谢有关的数千种酶类、细胞质骨架结构。细胞质基质的功能①完成各种中间代谢过程②与细胞质骨架相关的功能③蛋白质修饰和选择性降解13、滑而内质网与糙而内质网有何差异?有哪些主要功能?内质网分为粗而型内质网(RER)和光而型内质网(SER)。RER呈扁平囊状,排列整齐,有核糖体附着。SER呈分支管状或小泡状,无核糖体附着。①光面内质网的功能:脂的合成与转运、糖原分解释放葡萄糖、解毒作用Ca2+离子浓度的调节作用②粗而内质网的功能:蛋口质的合成、蛋白质转运、蛋白质的修饰与加工蛋白质的折叠14、高尔基复合体具有哪些功能?①将内质网合成的多种蛋白质进行加工、分类与包装,然后分门别类地运送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。②内质网上合成的脂类一部分也要通过高尔基体向细胞质膜和溶酚体膜等部位运输③细胞内糖类合成的工厂,在细胞生命活动中起多种重要的作川。15、高尔基体在形态结构上至少山互相联系的那儿个部分组成,请简述各部分的功能。①高尔基体顺面网状结构(CGN)乂称cis膜囊②高尔基体中间膜囊:多数糖基修饰;糖脂的形成;多糖的合成③高尔基体反面膜囊④反血高尔基体网状结构16、溶酶体的基本功能是什么?溶酶体的基本功能是对生物人分子的强烈的消化作用,根据其消化的物质乂可将他的作用\n分为以下3种:1.淸除无用的牛物大分子、衰老的细胞器及衰老损伤和死亡的细胞2.防御作用3.其它重要的生理功能17、如果从蛋白质的类型或机制的角度看,蛋白质分选的途径有哪些类型?①门控运输(gatedtransport)如核孔可以选择性的主动运输大分子物质和RNP复合体,并且允许小分子物质自山进出细胞核。②跨膜运输(transmembnmetransport)蛋白质通过跨膜通道进入目的地。如细胞质中合成的蛋白质在信号序列的引导下,通过线粒体上的转位因子,以解折叠的线性分子进入线粒体。③膜泡运输(vesiculartransport)蛋白质被选择性地包装成运输小泡,定向转运到靶细胞器。如内质网向高尔基体的物质运输、高尔基体分泌形成溶酶体、细胞摄入某些营养物质或激素,都属于这种运输方式。④蛋白质在细胞某质中的运输(细胞骨架体系)。18、膜泡运输方式中有哪几种同类型的包被小泡,各有什么功能?①网格蛋白有被小泡(1)介导高尔基体到内体、溶酶体、植物液泡的运输泡运输。(2)高尔基体TGN是网格蛋白有被小泡形成的发源地(3)在受体介导的细胞内吞途径中,也负责将物质从质膜-细胞质,胞内体-溶酶体②COPI有被小泡负责冋收、转运内质网逃逸蛋白(escapedproteins)返冋内质网。③COPII有被小泡这种类型的小泡是介导从ER到顺而髙尔基体、从顺而髙尔基体到高尔基体中间膜囊、从中间膜囊到反而高尔基体的运输。19、什么是细胞通讯?细胞通讯的-•般过程及方式。细胞通讯是指一个细胞发出的信息通过介质传递到刃一个细胞并产牛相应的反应。细胞通讯的一般过程:①信号分子的合成:--般的细胞都能合成信号分子,而内分泌细胞是信号分子的主要来源。②信号分子从信号传导细胞释放到周围环境屮:这是一个相当复杂的过程,特别是蛋白类的信号分子,要经过内膜系统的合成、加工、分选和分泌,最后禅放到细胞外。③信号分子向靶细胞运输:运输的方式有很多种,但主要是通过血液循环系统运送到靶细胞。④靶细胞对信号分子的识别和检测:主要通过位于细胞质膜或细胞内受体蛋白的选择性的识别和结合。⑤细胞对细胞外信号进行跨膜转导,产生细胞内的信号。⑥细胞内信号作川于效应分子,进行逐步放人的级联反应,引起细胞代谢、生长、基因表达等方面的一系列变化。另外,细胞完成信号应答之后,要进行信号解除,终止细胞应答,主要是通过对信号分子的修饰、水解或结合等方式降低信号分子的水平和浓度以终止反应。细胞通讯方式:①分泌化学信号进行通讯\n①接触性依赖的通讯②细胞间形成间隙连接实现代谢偶联或电偶联20、什么是细胞信号分子?其特点有哪些?在细胞间或细胞内传递信息的化学分子特点:①特异性;②高效性;③被灭活性。21、什么是信号通路,信号如何清除?细胞接受外界信号,通过-•整套特定的机制,将胞外信号转导为胞内信号,最终调节特定基因的表达,引起细胞的应答反应,这种反应系列称为信号通路。主要依靠对信号分子的修饰、水解、结合等方式降低信号分子的水平和浓度以终止反应。22、第二信使有哪些?第二信使有cAMP、cGMP、三磷酸肌醇、二酰基甘汕等。23、细胞骨架的概念及结构成分?细胞骨架是细胞内以蛋白质纤维为主要成分的网络结构,由主要的三类蛋白纤维构成,包括微管、肌动蛋白纤维和中间纤维。24、微丝的组成成分、结构、功能?微丝乂称肌动蛋白纤维,是指真核细胞中由肌动蛋白组成、直径为7-9nm的竹架纤维。结构:微丝是PG-肌动蛋口聚合而成,单体具有极性,装配时首尾相接。微丝的组装过程分三个步骤:即成核期、延长期、平衡期。微丝的结构单位:肌动蛋白肌动蛋白以单体和多聚体两种形式存在。单体的肌动蛋1‘1是山一条多肽链构成的球形分子,乂称球状肌动蛋白,肌动蛋白的多聚体形成肌动蛋白丝,称为纤维状肌动蛋白。微丝的功能:①维持细胞形态,赋予质膜机械强度②形成微绒毛③参与细胞内运输作用④参与细胞的运动⑤参与细胞分裂⑥形成应力纤维⑦参与肌肉收缩25、微管的组成成分、结构、功能?微管是直径为24〜26nm的中空圆柱体。外径平均为24nm,内径为15nm。微管的长度变化不定,微管壁大约厚5nm,微管通常是直的,呈网状和束状分砒并能与其他蛋白共同组装成纺係体、皋粒、屮心粒、纤毛、鞭毛、轴突、神经管等结构。组成与组成:①a,B微管蛋口二聚体是微管装配的基本单位。②单管:山13根原纤维纟I[成,是细胞质中常见的形式,其结构不稳定,易受环境因素而降解。③二联管:由A,B两根单管组成,主要分布于纤毛、鞭毛内。④三联管:山A,B,C三根单管组成,主要分布于中心粒及鞭毛和纤毛的基体中。微管的主要功能:①支持和维持细胞的形态②细胞内运输③染色体运动形成纺锤体在细胞分裂中牵引染色体到达分裂极。④组成纤毛和鞭毛的轴丝\n26、核小体结构要点①每个核小体单位包括200bp左右的DNA超螺旋、一个组蛋口八聚体和一分子H1。②I+1H2A、H2B、H3、H4各两分子形成八聚体,构成核心颗粒。③DNA分子以左手螺旋缠绕在核心颗粒表血,共1.75圈,约146bp,组蛋白H1在核心颗粒外结合额外20bpDNA,锁住核小体DNA的进岀端,起稳定核小体的作用。④两个相邻核小体之间以连接DNA(linkerDNA)相连⑤组蛋白与DNA之间的相互作用主要是结构性的,基本不依赖于核昔酸的特异序列。⑥核小体沿DNA的定位受不同因素的影响,进而通过核小体相位改变影响基因表达27、核孔复合体的结构和功能镶嵌在内外核膜上的篮状复合体结构。核孔复合体主要有以下4种结构组分:①胞质坏②核质环③辐④中央栓功能:①从功能上讲,核孔复合体可以看作是一种特殊的跨膜运输蛋白复合体,并且是一个双功能、双向性的亲水性核质交换通道。②双功能表现在它有两种运输方式:被动扩散与主动运输。③双向性表现在既介导蛋白质的入核转运,乂介导RNA、核糖核蛋口颗粒(RNP)的出核转运28、DNA的三种功能元件:口主复制DNA序列,着丝粒DNA序列,端粒DNA序列29、核仁的功能(核糖体的生物发生)rRNA基因的转录、rRNA前体的加工、核糖体亚单位的组装30、什么是细胞周期?细胞周期各时期的主要变化是什么?细胞周期指从一次细胞分裂结朿开始,到下一次细胞分裂结束所经历的整个过程。分为:间期(物质积累期或静止期)和细胞分裂期。㈠G1期:与DNA合成启动相关,开始合成细胞生长所需要的多种蛋白质、RNA但不合成DNA。同时染色质去凝集。㈡S期:即DNA合成期;㈢G2期:DNA复制完成,在G2期合成一定数量的蛋白质和RNA分子㈣M期:即有丝分裂期。①前期:染色质开始浓缩,形成光镜下两条染色单体可辩的早期染色体结构,核仁在前期末缩小并消失。②前中期:是指核膜破裂到染色体排列到赤道板Z前的这段吋间。核膜破裂,以小膜泡的形式分散在细胞质中③屮期:是指染色体排列到赤道面上,到姊妹染色单体开始分向两极的一段时间,染色体呈辐射状排列。染色体两边的牵引力达到平衡.④后期:中期染色休的两条染色单体相互分离,形成子代染色体,并分别向两极运动,标志着后期的开始。⑤末期:从子染色体到达两极,至形成两个新细胞为止的时期。涉及子核的形成和胞质分裂两个方面。⑥胞质分裂期:胞质分裂开始于细胞分裂后期,在赤道板周用细胞表而下陷,形成环形缢缩,称为分裂沟。31、细胞周期同步化有哪些方法?比较其优缺点。细胞同步化是指在自然过程中发生的,或经人为处理造成的细胞周期的同步化类型:自然同步化人工同步化:选择同步化:有丝分裂选择法细胞沉降分离法\n诱导同步化:DNA合成阻断法中期阻断法①有丝分裂选择法优点:操作简单、同步化程度高、细胞不受药物伤害。缺点:获得细胞数最少,成本高。②细胞沉降分离法:优点:简单省时、效率高、成本低缺点:对大多数种类细胞不适用③DNA合成阻断法(胸腺喘碇脱氧核甘掺入(TdR)双阻断法):优点:同步化效率高,儿乎适合于所有体外培养的细胞体系。④分裂中期阻断法优点:操作简便,效率高。缺点:药物的毒性相对较大,若处理的时间过长,所得到的细胞常常不能恢复正常细胞周期运转。32、细胞凋亡的主要形态学特征?(1)凋亡的起始:微绒毛的消失,细胞间接触的消失,与周围的细胞脱离,染色质固缩.沿着核膜分布。(2)凋亡小体的形成:核膜核仁破碎,核染色质断裂为人小不等的片段,与某些细胞器如线粒休一起聚集,为反折的细胞膜所包围。(3)凋亡小体逐渐被周围专职或非专职吞噬细胞吞噬。33、细胞凋亡与细胞坏死的区别?细勰亡和细酬蒯区别区址点mt生理或病理性病理腋化或眈滩单个竝魏大片峨或成鞫1㈱完整,-删形成肚小体躲在勰下呈半月状辘器无明显变化酬、Mm同缩变小酬变大旺小体有,彼価眦或躺觥飜无,腿瞩处删酗硼删DNA有辦低电絶昶桃舶质合成尤受廉醐控炎症反应无不辎辘内魏1有,鼻放内容饥
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