【生物】2020届一轮复习克隆技术作业

【生物】2020届一轮复习克隆技术作业

‎2020届 一轮复习 克隆技术 作业 一、选择题 ‎1.(2018·台州中学统考)下列过程不涉及植物组织培养技术的是(　　)‎ A.由马铃薯的茎尖培育出无病毒植株 B.白菜和甘蓝经体细胞杂交过程培育出杂种植株 C.转入抗卡那霉素基因的烟草细胞培育出转基因植株 D.二倍体水稻刚萌发的种子经秋水仙素处理后培育出四倍体植株 答案　D 解析　植物组织培养属于无性繁殖技术。将离体的植物组织、细胞培养成完整植株，需制备相应的培养基并添加适当配比的营养物质和植物生长调节剂诱导，即必须依赖植物组织培养技术，故A、B、C项均涉及该技术；用秋水仙素处理二倍体水稻刚萌发的种子即可得到四倍体植株，无须利用植物组织培养技术，故选D项。‎ ‎2.牛雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是(　　)‎ A.H-Y单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌 B.应选用原肠胚做雌雄鉴别 C.鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D.用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体 答案　D 解析　H-Y单克隆抗体是由已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞形成的杂交瘤细胞分泌的，A错误；一般选用囊胚期的滋养层细胞做性别鉴定，B错误；利用乳腺生物反应器进行生物制药，应选择雌性胚胎，C错误；用H-Y抗原免疫母牛，可使母牛针对该抗原产生相应抗体，D正确。‎ ‎3.某实验室做了如图所示的实验研究，下列与实验相关的叙述正确的是(　　)‎ A.过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变 B.丙细胞既能持续分裂，又能分泌单一的抗体 C.过程②属于动物细胞培养过程中的原代培养 D.过程③④所用的培养基中都含有聚乙二醇 答案　B 解析　外源基因的导入过程属于基因重组，A错误；丙细胞能产生单克隆抗体，说明丙细胞具有连续分裂且能分泌单一抗体的能力，B正确；②表示细胞分化过程，C错误；③是诱导细胞融合的过程，所用的培养基含有聚乙二醇或灭活的仙台病毒，而④过程不用聚乙二醇，D错误。‎ ‎4.(2019·绍兴质检)下列各项中属于克隆技术的是(　　)‎ A.把鲤鱼胚胎细胞的细胞核移到去核鲫鱼成熟卵中 B.体外培养基底层干细胞来培植皮肤用于植皮手术 C.将小鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞结合成杂交瘤细胞 D.将人工授精的受精卵体外培养形成胚胎 答案　B 解析　把鲤鱼胚胎细胞的细胞核移到去核鲫鱼成熟卵中属于核移植，A错误；体外培养基底层干细胞来培植皮肤用于植皮手术属于克隆技术，B正确；将小鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞结合成杂交瘤细胞属于细胞融合技术，C错误；将人工授精的受精卵体外培养形成胚胎，属于有性生殖，D错误。‎ 二、非选择题 ‎5.(2018·绍兴3月联考)基于哺乳动物细胞表达的基因工程制药行业在最近10年发展迅速，其中构建稳定表达细胞株是重要的环节，常见过程为：获得目的基因→将目的基因导入宿主细胞→初步筛选→扩增→单克隆化→筛选→驯化→工业生产。回答下列问题：‎ ‎(1)如果该目的基因的序列是未知的，我们可以建立一个________，然后在这里面寻找到要研究的目的基因。‎ ‎(2)为了实现工厂化生产蛋白质类药物，常用CHO细胞(中国仓鼠卵巢的建株纤维母细胞)作为哺乳动物表达系统的宿主细胞，这种细胞应该具有________能力，从而可以反复传代使用。为了得到CHO细胞，可以直接将组织从机体中取出后立即进行细胞、组织培养，当细胞从组织块中迁移出来，形成________并增大后，再传代培养。‎ ‎(3)利用“裹有重组质粒的脂质体与动物细胞融合”和“病毒侵染细胞”是将目的基因导入动物细胞的两种常用方法，前者所用的脂质体结构上由________分子构成，后者不能用噬菌体的原因是________________________________________________________________。‎ ‎(4)对细胞进行单克隆化培养时，培养基中往往需要添加血清、激素、滋养细胞等，这些措施的目的是__________。确定生产用的细胞株后，需要对细胞驯化使其适应生产规模下的培养条件，工业生产使用的培养基大多是无血清培养基，这对生物制品的好处有________。‎ 答案　(1)基因文库　(2)无限增殖　生长晕　(3)双层磷脂　噬菌体不能侵染动物细胞　(4)提高细胞克隆形成率　有利于生物制品的纯化(或提取的基因表达产物纯度高)‎ 解析　(1)若目的基因未知，可建立基因文库，从中获取目的基因。(2)作为哺乳动物表达系统的宿主细胞，应具备无限增殖的能力。动物细胞培养中，当细胞从组织块中迁移出来，形成生长晕并增大后，再传代培养。(3)裹有重组质粒的脂质体能将目的基因导入动物细胞，则脂质体应具有双层磷脂分子，有利于与宿主细胞融合；病毒侵染细胞不能用噬菌体，因为噬菌体不能侵染动物细胞。(4)细胞克隆培养中，培养基中添加血清、激素等的目的是提高细胞克隆形成率。工业化生产使用的培养基大多是无血清培养基，这样有利于生物制品的纯化。‎ ‎6.青蒿素是治疗疟疾的重要药物。下图为利用二倍体野生型青蒿，通过现代生物技术培育青蒿素含量高的四倍体细胞和植株的示意图。请回答以下相关问题：‎ ‎(1)上述a～d过程涉及的原理有___________________(至少两项)。其中a为_________过程，b过程需要在______________作用下完成，d过程的技术基础是________________。‎ ‎(2)通过e过程可以实现工业化生产青蒿素。有关叙述正确的是________。‎ A.该过程需要适量激素以刺激分化 B.该过程不需要提供有机营养物质 C.该过程需要诱导相关基因的表达 D.该过程的原理是染色体畸变 ‎(3)已知青蒿素的合成受G基因控制，利用___________酶可将G基因从青蒿细胞中分离出，并经改造和扩增后，将其与含有抗生素抗性基因的质粒形成重组DNA，再与经______处理的大肠杆菌液混合，使重组DNA更易进入大肠杆菌，通过培养大肠杆菌可生产青蒿素。‎ ‎(4)下列有关基因工程的叙述，错误的是________。‎ A.获取目的基因需要酶的催化 B.目的基因能够在宿主细胞中复制 C.大肠杆菌是基因工程的常用载体 D.能够实现定向改造生物性状 答案　(1)细胞全能性、膜的流动性、染色体畸变　脱分化　纤维素酶和果胶酶　植物组织培养　(2)C　(3)限制性核酸内切　氯化钙　(4)C 解析　(1)上述a～d过程涉及细胞全能性、膜的流动性、染色体畸变等原理；其中a为脱分化过程，b过程需要在纤维素酶和果胶酶作用下去除细胞壁，d过程的技术基础是植物组织培养。(2)通过e过程可以实现工业化生产青蒿素，该过程需要诱导相关基因的表达。(3)已知青蒿素的合成受G基因控制，利用限制性核酸内切酶可将G基因从青蒿细胞中分离出，并经改造和扩增后，将其与含有抗生素抗性基因的质粒形成重组DNA，再与经氯化钙处理的大肠杆菌液混合，使重组DNA更易进入大肠杆菌，通过培养大肠杆菌可生产青蒿素。(4)质粒是基因工程的常用载体，C错误。‎ ‎7.(2018·浙江教育绿色评价联盟3月模拟)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。据图回答下列问题：‎ ‎(1)为了提高克隆的成功率，常通过注射某些激素进行______________处理以获得更多的卵细胞备用；过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵细胞培养至适当时期再进行，核移植需要借助精密的显微操作仪和高效率的____________法。‎ ‎(2)过程②操作前常对离体体细胞进行______________________等特殊处理，以利于重组细胞中核基因的表达；经显微操作获得的A中往往带有部分阻止核基因表达的________，直到重组细胞开始第________次分裂时，核DNA被重新编排并开始表达。‎ ‎(3)下列关于过程③、④的叙述，错误的是________。‎ A.分别表示胚胎体外培养和胚胎移植 B.过程③每隔一段时间换用不同成分的培养液 C.过程③所用的培养基中须加入动物血清并制备饲养层 D.过程④对代孕母体要经同期发情、未经配种处理 ‎(4)选择供体体细胞时必须关注其传代培养的次数，因为体细胞经过多次传代后，细胞中__________的稳定性会降低。‎ 答案　(1)超数排卵　细胞融合　(2)调节培养基中的牛血清浓度(或营养限制性培养)　调节蛋白　三　(3)C　(4)遗传物质 解析　(1)为获得更多的卵细胞，需要注射某些激素进行超数排卵处理。核移植需要借助精密的显微操作仪和高效率的细胞融合法。(2)供体体细胞提供细胞核前常对离体细胞进行营养限制性培养等特殊处理，以利于重组细胞中核基因的表达。经显微操作获得的细胞核中往往带有部分阻止核基因表达的调节蛋白，直到重组细胞开始第三次分裂时，核基因被重新编排并开始表达。(3)重组细胞经培养形成早期胚胎所用的培养基不用制备饲养层，C错误。(4)体细胞经多次传代后，细胞中的遗传物质稳定性会降低，因此选择供体体细胞时必须关注其传代培养的次数。‎ ‎8.(2018·嘉兴联考)下图表示细胞融合技术的部分过程，请回答：‎ ‎(1)若甲、乙细胞是植物细胞，在细胞融合时，首先需将____消化除去。获得的丁细胞在植物组织培养时通过平衡_____配比进行调控，从而实现植物器官、组织的发生和形态建成。‎ ‎(2)若该过程是制备癌胚抗原单克隆抗体的部分过程，实验中首先将______________注入小鼠体内，然后从产生免疫反应的小鼠脾脏中获取经免疫的______细胞，将其与骨髓瘤细胞融合，筛选出________细胞。‎ ‎(3)若甲、乙细胞到丙细胞过程是哺乳动物体外受精过程，甲、乙细胞能够结合的基础是细胞膜表面有特异性________功能的蛋白。若丁细胞为囊胚的外表扁平细胞，由其组成的结构称为________。‎ 答案　(1)细胞壁　植物激素　(2)癌胚抗原　B淋巴　杂交瘤　(3)识别　滋养层 解析　(1)若甲、乙细胞是植物细胞，在细胞融合时，首先需将具有保护作用的细胞壁用纤维素酶和果胶酶去掉，才能获得原生质体。获得的丁细胞即杂种植物细胞在植物组织培养时通过平衡植物激素(主要是生长素和细胞分裂素)配比进行调控，从而实现植物器官、组织的发生和形态建成。(2)若该过程是制备癌胚抗原单克隆抗体的部分过程，实验中首先将抗原即癌胚抗原注入小鼠体内，然后从产生免疫反应的小鼠脾脏中获取经免疫的B淋巴细胞，将其与骨髓瘤细胞融合，筛选出既能产生特异性抗体还能大量增殖的杂交瘤细胞。(3)若甲、乙细胞到丙细胞过程是哺乳动物体外受精过程，甲、乙细胞能够结合的基础是细胞膜表面有特异性识别功能的蛋白。若丁细胞为囊胚的外表扁平细胞，由其组成的结构称为滋养层，内部是具有发育全能性的内细胞团。‎ ‎9.(2018·浙江金丽衢十二校联考)生物技术已经渗入到了我们生活的方方面面。请回答下列有关动物细胞培养的相关问题：‎ ‎(1)动物细胞培养的原理是____________，需要将培养瓶放入____________中培养。‎ ‎(2)培养过程中需要用胰蛋白酶消化组织中的________和细胞外的其他成分。‎ ‎(3)传代培养得到的细胞系往往具有__________核型。关于细胞系和细胞株，下列说法错误的是________(填字母代号)。‎ A.原代培养得到的细胞也可以是细胞系 B.细胞株是特殊的细胞系 C.连续细胞系获得了不死性 D.连续细胞系没有发生转化 ‎(4)细胞克隆又称为克隆培养法，它的最主要用途之一就是从普通细胞系中分离出_______的突变细胞系。‎ 答案　(1)细胞增殖　CO2‎ 培养箱　(2)胶原纤维　(3)异倍体　D　(4)缺乏特殊基因 解析　(1)动物细胞培养的原理是细胞增殖，需要将培养瓶放入CO2培养箱中培养。(2)动物细胞培养过程中需要用胰蛋白酶消化组织中的胶原纤维和细胞外的其他成分，使得组织细胞分散开来。(3)传代培养得到的细胞系往往具有异倍体核型。原代培养得到的细胞也可以是细胞系，A正确；细胞株是特殊的细胞系，B正确；连续细胞系获得了不死性，C正确；连续细胞系被认为是发生了转化的细胞系，D错误。(4)细胞克隆又称为克隆培养法，它的最主要用途之一就是从普通细胞系中分离出缺乏特殊基因的突变细胞系。‎ ‎10.某研究小组欲将已知抗盐基因导入原生质体培育抗盐菊科植物。请回答：‎ ‎(1)为获得大量抗盐基因，可通过__________技术进行扩增，也可将其连接到__________上，通过大肠杆菌培养扩增。‎ ‎(2)制备叶片原生质体的酶混合液中，一般含较高浓度的甘露醇，其目的是避免制备的原生质体____________。酶混合液需通过____________________________灭菌，才能用于无菌原生质体的制备，整个无菌操作过程需在______________中进行。‎ ‎(3)可通过________________方法，直接将抗盐基因导入原生质体的细胞核。此外，还可用聚乙二醇融合、电击等方法导入。导入后的原生质体需再生出____________，经持续分裂获得愈伤组织，进一步分化获得再生植株并扩大繁殖。‎ ‎(4)利用带有标记的抗盐基因特殊片段与从转基因植株提取的RNA进行________________，验证抗盐基因是否被整合到受体细胞中并转录。通过将扩大繁殖的再生植株转接到含有________________________的培养基，根据生长状况初步筛选出抗盐植株。‎ ‎(5)为了获得大量该转基因植株，可将带腋芽的茎段转入适宜培养基中，获得大量________，然后转入生根培养基中诱导生根，形成再生植株。再生植株需进行________(不定项选择：A.无菌处理　B.锻炼　C.去除根部残留的培养基　D.逐步提高湿度处理)后才能移种大田。‎ 答案　(1)PCR　质粒　(2)吸水胀破　过滤(G6玻璃砂漏斗)　超净台　(3)显微注射　细胞壁　(4)分子杂交　较高浓度NaCl(盐)　(5)丛状苗　B、C 解析　(1)抗盐菊科植物的培育采用了基因工程技术和植物组织培养等技术。在基因工程技术中，抗盐基因为目的基因，可以采用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因，也可以通过将连接有目的基因的质粒导入大肠杆菌中使其扩增。(2)原生质体的制备一定要放在高渗溶液中，避免植物细胞去壁后原生质体过度吸水而胀破；酶在高温下易失活，所以酶混合液无法采用高压蒸汽灭菌法灭菌，可用G6玻璃砂漏斗过滤除菌。(3)植物细胞去壁后可采用显微注射法导入目的基因。原生质体培养过程中必须首先再生出细胞壁，然后再经过脱分化形成愈伤组织，最后经过再分化形成植株。(4)若抗盐基因成功整合并转录出RNA，则相应的RNA能够跟抗盐基因的模板链互补配对，所以可用分子杂交的方法进行鉴定，而抗盐基因成功表达的抗盐植株，则应该通过种植利用其可以耐受高浓度食盐的特性进行筛选。(5)在植物组织培养过程中，应该将带芽茎段先放在生芽培养基中得到丛状苗，然后再转入生根培养基中得到再生植株幼苗，幼苗要去除根部残留的培养基，经过逐渐降低湿度的锻炼后才能在大田种植。‎