2019-2020学年人教版生物选修一专题综合测评5　DNA和蛋白质技术

2019-2020学年人教版生物选修一专题综合测评5　DNA和蛋白质技术

专题综合测评(五) DNA 和蛋白质 技术 (满分：100 分 时间：90 分钟) 一、选择题(每题 2 分，共 25 题，共 50 分) 1．“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，提取鸡血细胞的核物质和析出含 DNA 的黏稠物这两步中都用到了蒸馏水，其作用分别是( ) A．防止鸡血细胞失水皱缩和稀释 NaCl 溶液至 0.14 mol/L 使 DNA 析出 B．防止鸡血细胞失水皱缩和溶解 DNA C．使鸡血细胞吸水涨破和稀释 NaCl 溶液至 0.14 mol/L 使 DNA 析出 D．使鸡血细胞吸水涨破和溶解 DNA C [第一次加蒸馏水的目的是使鸡血细胞涨破，释放出核 DNA，第二次加蒸 馏水的目的是将 NaCl 溶液浓度降低到 0.14 mol/L，使 DNA 析出。] 2．某同学用洋葱进行 DNA 粗提取和鉴定实验，操作错误的是( ) A．加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨 B．用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 DNA C．加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌 D．加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热 A [加入洗涤剂后，搅拌动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不 利于后续步骤的操作；用蛋白酶分解过滤后的研磨液中的蛋白质，可纯化过滤后 研磨液中的 DNA；加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌的目的是保证 DNA 分子不断裂， 保持其完整性；加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热才能出现颜色反应。] 3．对“DNA 的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是 ( ) A．利用 DNA 能溶于冷酒精溶液，而蛋白质不溶于酒精溶液，可将 DNA 与 蛋白质分离 B．在用菜花作实验材料时，研磨过程中加入食盐的目的是瓦解细胞膜 C．在 DNA 滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可提高 DNA 纯度 D．利用 DNA 在 0.14 mol/L NaCl 溶液中溶解度最大的特点，可将 DNA 与杂 质分离 C [DNA 不溶于冷酒精，蛋白质可以；加食盐的目的是溶解 DNA；DNA 在 0.14 mol/L NaCl 溶液中溶解度最小。] 4．下列关于 DNA 的粗提取与鉴定实验的相关叙述，错误的是( ) A．可以选择 DNA 含量较高的生物组织为材料，如鸡的血细胞 B．DNA 不溶于酒精，且在 0.14 mol/L 的氯化钠溶液中析出 C．可以利用嫩肉粉把杂质多糖和 RNA 去除 D．洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有 DNA 的滤液 C [鸡血细胞中含有 DNA，可作为提取 DNA 的生物材料，不可选用哺乳动 物成熟的红细胞；DNA 不溶于酒精，且 NaCl 溶液浓度为 0.14 mol/L 时 DNA 溶 解度最小，两者均可将 DNA 大量析出；嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，可将蛋白质水 解，从而除去蛋白质；洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有 DNA 的滤液。] 5．在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，如果实验材料是植物细胞，需要进 行研磨并搅拌。下列相关说法正确的是( ) A．在切碎的植物材料中加入一定量的洗涤剂和蒸馏水，充分研磨后过滤获取 滤液 B．加入洗涤剂是为了瓦解细胞膜和核膜 C．要快速搅拌产生泡沫以加速细胞膜的溶解 D．先加入洗涤剂，搅拌和研磨后再加入食盐 B [提取植物材料中的 DNA 时，需在切碎的组织中加入一定量的洗涤剂和食 盐。加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜和核膜，以利于 DNA 的释放，同时要进行充 分地搅拌和研磨，使 DNA 完全释放。搅拌时应轻缓、柔和，避免产生大量泡沫， 以利于后续操作。] 6．下表是关于 DNA 的粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的 表述，正确的是( ) 选项 试剂 操作 作用 A 柠檬酸钠溶液 与鸡血混合 有利于血液凝固 B 蒸馏水 与鸡血细胞混合 保持细胞形状 C 蒸馏水 加入溶解有 DNA 的 NaCl 溶液 析出 DNA 丝状物 中 D 冷却的酒精 加入过滤后的 NaCl 溶液中 产生特定的颜色反应 C [在 DNA 的粗提取与鉴定实验中，柠檬酸钠可以防止血液凝固；鸡血中加 入蒸馏水可以使细胞膜和核膜破裂；DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同， 在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低，有利于 DNA 析出；DNA 不溶于酒精，而蛋白质溶于冷却的酒精可以获得较纯的 DNA，DNA 遇二苯胺(沸 水浴加热)呈蓝色。] 7．下列关于“DNA 粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是( ) A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增大 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度 B．将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响 DNA 的提取 D．用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致 DNA 获得量减少 C [洗涤剂能瓦解细胞膜，但对 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度无影响；DNA 丝状物需先溶解在适宜浓度的 NaCl 溶液中，然后加入二苯胺试剂，混合均匀后沸 水浴加热，待冷却后观察到溶液变蓝；常温下菜花匀浆中有些水解酶可能会使DNA 水解而影响 DNA 的提取；用玻璃棒朝一个方向缓慢搅拌可减轻对 DNA 分子的破 坏，有利于 DNA 分子的提取。] 8．做 DNA 粗提取和鉴定实验时，实验材料用鸡血而不用猪血的原因是( ) A．鸡血的价格比猪血的价格低 B．猪的成熟的红细胞中没有细胞核，不易提取到 DNA C．鸡血不会凝固，猪血会凝固 D．用鸡血提取 DNA 比用猪血提取操作简便 B [DNA 是生物的遗传物质，主要存在于细胞核中。生物实验材料的选择原 则：一是容易获得；二是实验现象明显。做 DNA 粗提取与鉴定实验的实验材料不 选猪血是因为哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，不易提取到 DNA，而鸟类、爬 行类等动物成熟的红细胞中有细胞核，实验现象明显。] 9．关于 PCR 的说法，不正确的是 ( ) A．PCR 是体外复制 DNA 的技术 B．PCR 过程中只需要一个模板 DNA、两个引物分子、大量脱氧核苷酸原料 C．Taq DNA 聚合酶是一种热稳定的 DNA 聚合酶 D．PCR 利用的是 DNA 双链复制原理 B [PCR 技术是一种在体外迅速扩增 DNA 片段的技术；PCR 过程除需要 DNA 分子双链作为模板、两种引物分子、大量脱氧核苷酸原料外，还需要酶等条 件；Taq DNA 聚合酶是一种耐热的 DNA 聚合酶；PCR 技术的原理和 DNA 的复制 原理是一样的，都是半保留复制。] 10．下列有关 PCR 的叙述，正确的是( ) A．PCR 所需要的引物只能是 RNA B．PCR 所需要的原料是核糖核苷酸 C．PCR 所需要的酶在 60 ℃会变性 D．PCR 需要在一定的缓冲液中进行 D [PCR 所需的引物是一小段 DNA 或 RNA。PCR 所需要的原料是脱氧核糖 核苷酸。PCR 所需要的酶是耐高温的 Taq DNA 聚合酶。] 11．关于 DNA 聚合酶催化合成 DNA 子链的说法，正确的是( ) A．Taq DNA 聚合酶是从深海生态系统中发现的 B．DNA 聚合酶能特异性地复制整个 DNA 的全部序列 C．Taq DNA 聚合酶必须在每次高温变性处理后再添加 D．DNA 聚合酶是以 DNA 为模板，使 DNA 子链从 5′端延伸到 3′端的一种酶 D [Taq DNA 聚合酶是在热泉中发现的。PCR 扩增的是引物之间的固定长度 的 DNA 序列。Taq DNA 聚合酶能耐高温，所以在反应体系中可反复利用而不用 另外再添加。DNA 聚合酶不能从头开始催化合成 DNA，而只能从 DNA 单链的 3′ 端延伸子链。] 12．下列关于 PCR 技术的叙述，正确的是( ) A．PCR 技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上 B．该技术需要解旋酶和热稳定的 DNA 聚合酶 C．该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的 D．该技术应用体内 DNA 双链复制原理，也需要模板、原料、酶等条件 D [PCR 技术不必知道目的基因的全部序列，只需知道部分序列，就可根据 已知序列合成引物。PCR 技术不需要解旋酶。PCR 技术需要引物，但引物的序列 不能是互补的，否则，在复性时，两种引物通过碱基互补配对结合而失去作用。] 13．复性温度是影响 PCR 特异性的较重要的因素。变性后温度快速冷却至 40～60 ℃，可使引物与模板发生结合。PCR 的结果可不考虑原来解旋开的两个 DNA 模板链的重新结合，原因不包括( ) A．由于模板 DNA 比引物复杂得多 B．引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞 C．加入引物的量足够多而模板链数量少 D．模板链加热解旋已经变性不可能再次结合 D [DNA 双链变性解旋后是可以再次结合的，只不过是在 PCR 中，引物量 较多，与 DNA 模板链结合机会大，而原来两条母链再次结合的机会小。] 14．在 PCR 的实验操作中，下列说法正确的是( ) ①在微量离心管中添加各种试剂时，只需要一个枪头 ②离心管的盖子一定要盖严 ③用手指轻弹离心管壁 ④离心的目的是使反应液集中在离心管的底部 A．①②③ B．①②④ C．②③④ D．①③④ C [在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头 都必须更换，以确保实验的准确性；盖严离心管口的盖子，防止实验中外源 DNA 污染；用手指轻轻弹击离心管的侧壁，使反应液混合均匀；离心的目的是使反应 液集中在离心管的底部，提高反应效果。] 15．下列关于 PCR 技术的叙述，错误的是( ) A．PCR 技术和 DNA 体内复制所用到的酶种类有所不同 B．PCR 反应过程要消耗四种脱氧核苷酸 C．PCR 反应用到的引物是一小段 DNA 或 RNA D．原料是从子链的 5′端连接上来的 D [由于 DNA 聚合酶只能从引物的 3′端开始延伸 DNA 链，因此原料也只能 从 3′端连接。] 16．在 PCR 扩增 DNA 的实验中，预计一个 DNA 分子经过 30 次循环后，应 该得到 230 个 DNA 分子，但是结果只有约 210 个 DNA 分子，那么出现该现象的原 因不可能是( ) A．TaqDNA 聚合酶的活力不够，或活性受到抑制 B．系统设计欠妥 C．循环次数不够 D．引物不能与母链结合 D [如果 TaqDNA 聚合酶活力不够，或活性受到抑制，则导致催化效率降低， 得到的产物比预期的少，A 项正确。如果 PCR 系统设计欠妥，达不到预期的结果， 则 B 项正确。如果循环次数过少，产物的量比预期的少，则 C 项正确。如果引物 设计不合理，也许不能与模板 DNA 结合，造成无法进行 DNA 的扩增，而结果得 到了 210 个 DNA 分子，则 D 项错误。] 17．如图表示 PCR 技术扩增 DNA 分子的过程中，DNA 聚合酶作用的底物， 据图分析正确的是( ) A．图中 A 为引物，是一种单链 RNA 分子 B．图中 B 为 DNA 模板链，F 端为 3′末端 C．PCR 技术中通过控制温度来实现 DNA 双链的解旋和结合 D．DNA 聚合酶无需引物也能将单个脱氧核苷酸连接成 DNA 片段 C [PCR 技术中，DNA 聚合酶需要引物，才能够将单个脱氧核苷酸连接成 DNA 片段，该技术中引物通常为单链 DNA，即题图中的 A；图中 B 为 DNA 模板 链，F 端为 5′末端；PCR 技术中通过高温和降温来实现 DNA 双链的解旋和结合。] 18．SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入 SDS 的作用是( ) A．增大蛋白质的相对分子质量 B．改变蛋白质分子的形状 C．掩盖不同蛋白质分子间的电荷差别 D．减小蛋白质分子的相对分子质量 C [SDS 是阴离子去污剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂分子内和分子 间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二、三级结构。在样品和凝胶中加 入还原剂和 SDS 后，分子被解聚成多肽链，解聚后的氨基酸侧链和 SDS 结合成蛋 白质—SDS 胶束，所带的负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，这样 就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异，从而仅根据蛋白质分子亚基的不同 就能分离蛋白质。] 19．在装填色谱柱时，不得有气泡存在的原因是( ) A．气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果 B．气泡会阻碍蛋白质的运动 C．气泡能与蛋白质发生化学反应 D．气泡会在装填凝胶的时候，使凝胶不紧密 A [色谱柱内不能有气泡存在，如有气泡存在，应轻轻敲打柱体以消除气泡， 消除不了时要重新装柱。气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。] 20．在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是( ) A．防止血红蛋白被氧化 B．血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和 C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程 D．让血红蛋白处在稳定的 pH 范围内，维持其结构和功能 D [利用磷酸缓冲液模拟细胞内的 pH 环境，保证血红蛋白的正常结构和功 能，便于分离观察(红色)和研究(活性)。] 21．使用凝胶色谱法分离蛋白质时，洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程 中，分别使用下列哪些试剂( ) ①蒸馏水 ②生理盐水 ③20 mmol/L 的磷酸缓冲液 ④清水 ⑤柠檬酸钠 A．①③⑤ B．①②③ C．②①③ D．④①③ C [洗涤红细胞时，为防止红细胞吸水涨破或受到其他伤害，应选用生理盐 水进行洗涤；在释放血红蛋白时，应使红细胞涨破，则选用蒸馏水处理；在透析 过程中，要去除小分子物质，因此应选用一定的缓冲液(20 mmol/L 的磷酸缓冲液)， 因此选 C。] 22．下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是 ( ) A．红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心 B．血红蛋白的释放：加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌 C．分离血红蛋白：将搅拌好的混合液离心、过滤后，用分液漏斗分离 D．透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，然后置于 pH 为 4.0 的磷酸缓冲液中 透析 12 h C [红细胞洗涤过程中应该用生理盐水，不能用蒸馏水；血红蛋白的释放应 该加入蒸馏水和甲苯，使红细胞吸水涨破，释放其中的血红蛋白；将搅拌好的混 合液通过离心、过滤后，用分液漏斗分离出血红蛋白溶液；透析所用的磷酸缓冲 液的 pH 为 7.0。] 23．以下关于猪血红蛋白的分离与提取的描述，正确的是( ) A．透析的目的是去除样品中分子量较大的杂质 B．血红蛋白释放后应进行低速短时间离心 C．蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度慢 D．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D [透析可以除去分子量较小的杂质；血红蛋白释放后，以 2 000 r/min 的高 速离心 10 min，从而分离血红蛋白溶液；凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质 量较大的在凝胶外部移动，移动速度快；血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的 移动情况。] 24．某同学在做血清蛋白的分离电泳实验时，等待电泳结果期间，因为有事 未能及时赶回，当他回来时，发现凝胶上面只剩下一条带(比原来窄且颜色浅)，下 列分析正确的是( ) A．电泳时间过长，多数蛋白质已经移出凝胶块 B．血清蛋白中只含一种蛋白质 C．血清蛋白中所含蛋白质的电荷都相同 D．他把电极接反了，未能进行电泳 A [由题干可知电泳后的带比原来窄了而且颜色变浅，说明电泳已经进行了， 凝胶上没有其他带，说明一些蛋白质移出了凝胶。] 25．SRY 基因为 Y 染色体上的性别决定基因，可用 SRYPCR 法鉴定胚胎性 别，其基本程序如图，相关说法正确的是 ( ) 提取少量胚胎 细胞 DNA ―――――――――――→SRY 基因引物 PCR 扩增 → 大量 DNA → SRY 探 针检测 A．PCR 扩增的操作步骤依次是：高温变性、中温复性、低温延伸 B．上述过程需要使用的工具酶之一是 RNA 聚合酶 C．PCR 技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增 D．SRY 探针能与雄性胚胎样品中 DNA 配对 D [PCR 扩增的操作步骤依次是：高温变性、低温复性、中温延伸；上述过 程需要使用的工具酶之一是热稳定 DNA 聚合酶；PCR 技术中以脱氧核糖核苷酸 为原料，以指数方式扩增；SRY 探针是用位于 Y 染色体上的性别决定基因(SRY 基因)制成的，因此 SRY 探针能与雄性胚胎样品中 DNA 配对。] 二、非选择题(共 4 个小题，共 50 分) 26．(15 分)如图是“DNA 粗提取与鉴定”相关实验步骤。请据图分析回答： A B C D (1)鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料，这是因为_________________。从 鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是_____________。 (2)图 A 表示释放核物质后进行过滤的过程，过滤后取________(填“滤液”或 “析出物”)进行下一步实验；图 B 表示的相关操作过程中，加入 2 mol/L NaCl 溶液的作用是____________；图 C 表示在滤液中加入冷却的 95%的酒精，其目的 是_____________________________________________________。 (3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是 DNA，可滴加________溶液，结果丝 状物被染成绿色。 (4)图 D 中 a 试管为对照组，b 试管为实验组。 ①a 试管现象____________________；b 试管现象____________________。 ②在沸水中加热的目的是______________，同时说明 DNA 对高温有较强的 ________。 ③a 试管在实验中的作用是________。 ④b 试管中溶液颜色的变化程度主要与__________________有关。 [解析] 图 A 表示释放核物质后进行过滤的过程，纱布上的过滤物主要是细 胞膜、核膜的碎片等杂质，而 DNA 主要存在于下面的滤液中，所以过滤后应取滤 液进行下一步实验。DNA 不溶于冷酒精，而其他一些物质可以溶于冷酒精，从而 可进一步提纯 DNA。甲基绿为比较常用的细胞核染色剂，染色后细胞核中染色体 呈绿色，可以用来鉴定 DNA。 [答案] (1)鸡血细胞核中 DNA 含量丰富，材料易得 向鸡血细胞溶液中加入 蒸馏水，并搅拌 (2)滤液 溶解 DNA 分子 提取杂质更少的 DNA(或去除脂溶性 杂质) (3)甲基绿 (4)①溶液不变蓝 溶液变蓝 ②加快颜色反应速度 耐受性 ③对照 ④加入 DNA(丝状物)的多少 27．(10 分)凝胶色谱技术是一种快速而又简单的分离技术，设备简单、操作 方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果，目前该技术不但应用 于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。据图回答问题： (1)a、b 均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是________，原因是 _____________________________________________________ _____________________________________________________ _____________________________________________________。 (2)自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部 d 位置相当于多孔板的结构可由 ________________替代。 (3) 装 填 凝 胶 色 谱 柱 时 ， 色 谱 柱 内 不 能 有 气 泡 存 在 ， 原 因 是 _____________________________________________________。 (4)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体__________(填“相同”或 “不同”)，洗脱时，对洗脱液的流速要求是_________________。 (5)若选用 SephadexG75，则“G”表示_________________________ _____________________________________________________， “75”表示_____________________________________________________。 [解析] (1)原理：不同蛋白质的相对分子质量不同，相对分子质量较大的蛋 白质不能进入凝胶内部通道，只能在凝胶外部移动，路程短，速度快，易洗脱； 相对分子质量较小的蛋白质则进入凝胶内部通道，路程长，速度慢。(2)凝胶色谱 柱的制作：底部橡皮塞的凹穴上覆盖尼龙网和 100 目的尼龙纱，相当于多孔板。 (3)凝胶色谱柱的装填：装填时尽量紧密，不得有气泡存在，因为气泡会搅乱洗脱 液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。(4)样品的加入和洗脱：洗脱时和浸泡凝 胶时所用液体均是物质的量浓度为 20 mmol/L 的磷酸缓冲液，洗脱时，对洗脱液 的流速要求保持稳定。 [答案] (1)a a 相对分子质量较大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶 外部移动，路程较短，移动速度较快 (2)尼龙网和尼龙纱 (3)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果 (4)相同 保持稳定 (5)凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围 凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时 吸水 7.5 g 28．(10 分)如图表示血红蛋白提取和分离实验的部分装置或操作方法，请回 答下列问题： (1)为了提取和分离血红蛋白，首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白，洗涤 时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是_______________________。 (2) 图 甲 表 示 ______________ 过 程 ， 该 操 作 目 的 是 去 除 样 品 中 __________________的杂质。现有一定量的血红蛋白溶液，进行上述操作时若要 尽快达到理想的实验效果，可以________(写出一种方法)。一段时间后，若向烧杯 中加入双缩脲试剂，透析袋内溶液是否出现紫色，并说明判断的依据： _____________________________________________________ _____________________________________________________。 (3)图乙是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入示意图，正确的加样顺序是 ____________。在进行④操作时要________(填“打开”或“关闭”)下端出口。 (4)图丙为用 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血浆某白蛋白的结果。根据电泳 结果，某同学得出“提取的血浆某白蛋白有两条肽链”的结论，这种说法可靠吗？ 理由是_____________________________________________________ _____________________________________________________。 [解析] (1)生理盐水与红细胞内液为等渗溶液，故用其洗涤红细胞主要是防 止红细胞吸水破裂。(2)图甲表示血红蛋白粗提取过程，也称为透析过程。透析可 以去除样品中分子量较小的杂质；若要尽快达到理想的透析效果，可采用增加缓 冲液的量或及时更换缓冲液等方法。透析袋是一种半透膜，双缩脲试剂可以透过 半透膜，进入袋内与血红蛋白反应，生成紫色物质。(3)根据教材中往色谱柱中加 样的顺序可知，正确的排序为②③④①；图中进行④操作是在样品上部添加缓冲 液，此时要关闭下端出口。(4)电泳的原理是利用待分离样品中各种分子带电性质 的差异以及分子的大小、形状等的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，本实 验只能判断肽链的大小，而不能判断其条数。 [答案] (1)防止红细胞吸水破裂 (2)透析(粗分离) 分子量较小 增加缓冲液的量(或及时更换缓冲液) 出现 紫色，因为双缩脲试剂可以透过半透膜，与袋内血红蛋白反应，生成紫色物质 (3)②③④① 关闭 (4)不可靠。只能得出提取的血浆某白蛋白含有两种大小不同的肽链，不一定 是两条 29．(15 分)PCR 技术是把 DNA 片段在体外酶的作用下，合成许许多多相同 片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或 DNA 分子片 段，它的基本过程如图所示： 注：图中短线表示每次扩增过程中需要的引物。每个引物含 20～30 个脱氧核 苷酸，并分别与两条单链 DNA 结合，其作用是引导合成 DNA 子链。 (1)PCR 技术的原理是模拟生物体内________的过程。 (2)PCR 扩 增 过 程 中 需 要 对 DNA 片 段 进 行 高 温 处 理 ， 其 目 的 是 __________________，此过程在生物体内称为______，需________酶的参与。 (3)假如引物都用 3H 标记，从理论上计算，所得 DNA 分子中含有 3H 标记的 占________。 (4)假定 DNA 片段含 200 对脱氧核苷酸，经 3 次扩增，从理论上计算需要 ____________个游离的脱氧核苷酸。 [解析] (1)(2)由图可知高温变性的过程就是 DNA 在高温条件下解旋的过程， 在生物体内则需要酶的催化才能进行。低温复性时两条 DNA 分子都需要引物。 (3)每次低温复性时，引物都与两条单链 DNA 结合，进而形成双链 DNA，所 以所得 DNA 中均含 3H。扩增 3 次一共形成了 8 个子代 DNA 片段，需游离的脱氧 核苷酸数为(8－1)×400＝2 800 个。 [答案] (1)DNA 复制 (2)使 DNA 两条链彼此分开 解旋 解旋 (3)100% (4)2 800