【生物】2020届一轮复习人教版选修1第2讲微生物的培养和应用作业

【生物】2020届一轮复习人教版选修1第2讲微生物的培养和应用作业

练案[33]选修一　生物技术实践 第二讲　微生物的培养和应用 一、选择题 ‎1．(2018·北京石景山区高三期末)下列有关细菌纯化培养的说法，不正确的是( C )‎ A．实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒 B．每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌 C．培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞的克隆 D．菌液梯度稀释后用涂布法接种，得到单菌落便于计数 ‎[解析]　在培养细菌时要获得纯净的培养物，需要进行严格的消毒或灭菌，实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒，A正确。每次划线后为了保证划线时的菌种只来自上次划线区域的末端，所以每次划线后都要灼烧灭菌，最后一次是为了杀死菌种，防止污染环境，B正确。培养基上的单个菌落是由一个细菌细胞或几个同种细菌细胞繁殖而来的多个细菌，C错误。菌液梯度稀释后用涂布平板法接种，有利于得到单菌落方便计数，D正确。‎ ‎2．(2018·北京市朝阳区高三期末)漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是( B )‎ A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品 B．筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落 C．在涂布平板上通过划线获得单菌落 D．斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株 ‎[解析]　生活污水中含有大量微生物，但不一定含有产漆酶的菌株，A错误；筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，从而获得漆酶菌株，B正确；在涂布平板上长出的菌落，需要再通过平板划线法进一步纯化，C错误；菌种的长期保存应该在低温下进行，D错误。‎ ‎3．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是( D )‎ A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上 ‎[解析]　‎ 在高压灭菌的操作过程中，加热结束后应让灭菌锅内温度自然下降，待压力表的指针指到零时，打开放气阀，旋松螺栓，打开盖子。倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是完全取下放到一边。接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后，再用其挑取菌落。在微生物的培养中，一般将培养皿倒置，在皿底上用记号笔做标记。‎ ‎4．下列关于统计菌落数目方法的叙述，错误的是( C )‎ A．采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的菌落数 B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落 C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数 D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果 ‎[解析]　当两个或多个活菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。一般选择菌落数在30～300的平板计数，密度过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性。至少涂布3个平板，作为重复组，取其平均值计数能增强实验的说服力和准确性。‎ ‎5．平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列叙述正确的是( D )‎ A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释 B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面 C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养 D．都会在培养基表面形成单个的菌落 ‎[解析]　平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个的菌落。‎ ‎6．(2018·张家口检测)下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是( C )‎ A．天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基 B．接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理 C．大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段 D．分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源 二、非选择题 ‎7．(2018·青海省西宁市高三二模)酵母菌等微生物在人类的日常生活中发挥着越来越大的作用，如面包、馒头等食品以及果汁、果酒等饮料的作用都离不开酵母菌，请根据所学知识回答下列问题：‎ ‎(1) 在葡萄酒的自然发酵过程中，菌种的来源主要是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。为提高果酒的品质，可以直接在果汁中加入人工培养的纯净酵母菌。要筛选得到纯净的酵母菌种，通常使用的培养基按功能来分称为选择培养基，如在培养基中加入青霉素(_抗生素)可从细菌和酵母菌的混合液中分离酵母菌。 ‎ ‎(2)自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，‎ 然后进行数量的测定。下面是对酵母菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。 ‎ 实验步骤 ‎ 第一步制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。 ‎ 第二步为了得到更加准确的结果，你选用稀释涂布平板法接种样品。 ‎ 第三步 适宜温度下培养。 ‎ ‎(3)结果分析 ‎ ‎①测定的酵母菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是D(在以下选项中选择)，其理由是在设计实验时，一定要涂布至少_3_个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30－300的平板进行计数。‎ A．一个平板，统计的菌落数是230 ‎ B．两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240 ‎ C．三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260 ‎ D．四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250 ‎ ‎②某同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)1.17×108。 ‎ ‎③某同学在测定酵母菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该酵母菌的菌种被污染了？ 为什么？不能。因不能确定杂菌来自培养基或来自培养过程中。‎ ‎8．(2018·江西省新余市高三期末)目前微博传言手机细菌比马桶多。如图，央视和北京卫视通过实验展示调査结果。回答下列相关问题：‎ ‎(1)该实验需制备固体(填“固体”或“液体”)培养基。在液体培养基中加入琼脂可配置成固体培养基。‎ ‎(2)据图，两电视台均采用稀释涂布平板法接种，接种前需要采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。‎ ‎(3)通过观察菌落形状、大小、隆起程度和颜色等初步鉴定手机屏幕和马桶按钮上的生物类群。两电台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是手机的取样和马桶的取样都不相同。‎ ‎(4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10 mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1 mL稀释倍数为100的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为98、100、102，则该手机屏幕的细菌数为4×104个/平方厘米。‎ 该实验对照组要取培养基涂布0.1_mL无菌水进行培养。‎ ‎9．(2018·山东、湖北部分重点中学高考模拟)从土壤中分离尿素分解菌和纤维素分解菌，具有下列类似的操作过程：‎ →→→→ →→→→ ‎(1)在过程④的选择培养基是固体培养基，过程⑧的选择培养基是液体培养基(填“固体”或“液体”)。④的具体措施是以尿素为唯一氮源；⑧的选择措施是以纤维素为唯一碳源。‎ ‎(2)在过程③样品梯度稀释后，一般只将稀释度为104～106倍的菌液分别接种到3个平板培养基上。接种的常用方法为稀释涂布平板(或平板划线)。‎ ‎(3)过程⑩采用倒平板时加入刚果红染液的鉴别方法较简单。周围出现透明圈但不能100%确定为纤维素分解菌的菌落，原因是：不分解纤维素(或分解刚果红或淀粉)的微生物菌落也可能出现透明圈。‎ ‎10．大肠杆菌是与我们日常生活联系非常密切的细菌，请回答有关检测饮用水中大肠杆菌的问题：‎ ‎(1)检测饮用水中大肠杆菌的含量时，通常将样品进行一系列的梯度稀释，将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，然后记录菌落数量，这种方法称为稀释涂布平板法。‎ 判断下图所示的4个菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是D。‎ ‎(2)用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组？需要，其原因是需要判断培养基是否被杂菌污染(灭菌是否合格)，对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。‎ ‎(3)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行灭菌(填“消毒”或“灭菌”)处理；操作者的双手需要进行清洗和消毒；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使其内蛋白质变性，还能损伤它的DNA的结构。‎ ‎(4)检测大肠杆菌实验结束后，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理才能丢弃，以防止培养物的扩散。‎ ‎[解析]　‎ D中菌落分布情况为利用平板划线法所得。为判断培养基灭菌是否合格，本实验需要设置对照。要判断固体培养基是否被污染，可将未接种的培养基在适宜的温度下培养一段时间，若发现有菌落说明培养基已被污染。消毒是指使用较温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。对人的手不能进行灭菌处理。对培养基和培养器皿要进行灭菌处理，对操作者的双手需要进行清洗和用酒精消毒。‎ ‎11．某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题：‎ ‎(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选目的菌，这种培养基属于选择培养基。‎ ‎(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的化合物A。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是异养需氧型。‎ ‎(3)在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌入侵。‎ ‎(4)转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是接种环，操作时采用灼烧灭菌的方法。‎ ‎[解析]　(1)在选择培养基中加入特定物质，可以筛选出特定的细菌。(2)根据题目所给的培养基配方，“目的菌”生长所需的氮源和碳源只能来自培养基中的化合物A。异养需氧型细菌在培养时需要振荡。(3)获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌入侵。(4)用平板划线的方法进行接种，所使用的接种工具是接种环，操作时一般采用灼烧灭菌。‎ ‎12．某同学欲利用所学习的微生物培养知识，通过实验来证明痰液中含有细菌，来倡导同学们不要随地吐痰，以下是他进行的实验内容。回答下列问题：‎ ‎(1)制备供细菌生长的培养基。实验室常用牛肉膏蛋白胨固体培养基，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，其中灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法，在溶化之后、灭菌之前还需要调pH；平板冷凝后，还需要将平板倒置，主要目的是防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。‎ ‎(2)琼脂是一种从红藻中提取的多糖，在培养基中常常加入一定量的琼脂，‎ 添加琼脂的目的是作为凝固剂，使液体培养基凝固为固体培养基。‎ ‎(3)为了使实验结果更有说服力，该同学设置了空白对照组和若干实验组，其中对照组的作用是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响(合理即可)。‎ ‎(4)微生物接种的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，其中平板划线法并不适用于微生物的计数，其主要原因是不能将菌液中的微生物充分分离开来。某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目，他在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为163，则每毫升痰液样品中的细菌数是(所用稀释液的体积为0.2 mL)8.15×106个。‎ ‎[解析]　(1)对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。由于平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好的挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。(2)在培养基中添加琼脂是作为凝固剂。(3)设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。(4)平板划线法在起初划线时，微生物菌体仍集中在一起，因此，不能将菌体充分分离开，许多菌落并不是由单个菌体所形成的，因而，该方法不适用于微生物计数。利用稀释涂布平板法计数每毫升痰液样品中的细菌数为163÷0.2×104＝8.15×106(个)。‎