湖北省通山一中2019-2020学年高二下学期周练（三）生物试题

湖北省通山一中2019-2020学年高二下学期周练（三）生物试题

高二下学期周练（三）选修一复习卷 第I卷（选择题)‎ 一、单选题 ‎1．某位同学在制作果酒，如果改成制作果醋，不需要改变的是（ ）‎ A．发酵过程的环境温度 B．发酵液中的氧气含量 C．培养液中的营养成分 D．检测发酵产物的试剂 ‎2．下列关于果酒、果醋和泡菜制作的叙述，正确的是（ ）‎ A．制作果酒时，反复冲洗葡萄以避免杂菌污染 B．控制好温度和酸碱度既有利于目的菌的繁殖，又可抑制杂菌的生长 C．制作果醋和泡菜的主要微生物是原核生物，但呼吸类型不完全相同 D．发酵过程中所有材料都需要进行严格的灭菌处理，以免杂菌污染 ‎3．泡菜是许多中国人餐桌上不可缺少的一道佐餐佳品。下列有关泡菜发酵的叙述，正确的是（　　）‎ A．与泡菜风味形成直接有关的主要微生物乳酸菌为厌氧型，不会分布在植物的体表和空气中 B．乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸的过程，只在其细胞质基质内完成 C．在坛沿水已干涸的泡菜坛内，液体表面出现“生花”、“长膜”，这主要是厌氧的原核微生物形成的 D．在配置泡菜水时，应将清水煮沸冷却后，按照水：盐＝4：1 的比例，将盐与水混匀 ‎4．有关检测泡菜中亚硝酸盐含量的叙述，不正确的是（　　）‎ A．实验必须设置一组不含亚硝酸盐的比色管作为空白对照组 B．在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应 C．重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料 D．对显色反应样品进行目测，可以精确计算出泡菜中亚硝酸盐的含量 ‎5．某人利用乳酸菌制作泡菜因操作不当泡菜腐烂。下列原因中正确的是 ‎①罐口密闭缺氧，抑制了乳酸菌的生长繁殖 ‎②罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖 ‎③罐口封闭不严，氧气抑制了其他腐生菌的生长和繁殖 ‎④罐口封闭不严，促进了需氧腐生菌的生长和繁殖 A．①③ B．②④ C．②③ D．①④‎ ‎6．有关平板划线操作不正确的是（ ）‎ A．已灭菌的接种环在操作过程中仍需多次灭菌 B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞 C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，再盖上培养皿盖 D．最后将平板倒置，放入培养箱中培养 ‎7．下列不是细菌接种过程中的无菌操作的是 A．灼烧接种环 B．高压灭菌 C．于超净工作台操作 D．靠近火焰 ‎8．在三个培养皿中各加入等量但不同种的大肠杆菌培养基，在培养皿中培养36小时后计算细菌的克隆数（表）。下列培养皿的结果中，能说明大肠杆菌生长需要碳源的是（ ）‎ 在不同条件下大肠杆菌的生长量 培养皿 培养基 培养皿上的细菌克隆数 Ⅰ 琼脂、糖类 ‎35‎ Ⅱ 琼脂、糖类和维生素 ‎250‎ Ⅲ 琼脂和维生素 ‎0‎ A．培养皿Ⅰ和Ⅲ B．培养皿Ⅰ和Ⅱ C．培养皿Ⅱ和Ⅲ D．培养皿Ⅲ ‎9．某杆菌只有在含蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和微量维生素的培养基中才能生长，此时微量维生素对该菌的培养而言属于（ ）‎ A．碳源 B．氮源 C．激素 D．生长因子 ‎10．空气中的微生物在重力等作用下会有一定程度沉降。某生物兴趣小组欲利用平板培养基测定教室内不同高度空气中微生物的分布情况。下列关于实验的叙述不正确的是 A．在配制培养基时必须添加琼脂等凝固剂成分 B．将平板培养基放置在教室相同地点的不同高度 C．本实验需要设置不开盖的平板培养基作为对照 D．菌落数在30-300之间的平板才可以用于计数 ‎11．某科研人员利用郫县豆瓣酱为材料筛选高产蛋白酶的霉菌，下列利用平板划线法筛选该菌株的做法正确的是（ ）‎ A．在每次划线前后都灼烧接种环的目的是防止杂菌污染 B．接种霉菌后的培养基必须采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌 C．筛选用的固体选择培养基中必须加入一定量的蛋白质 D．对筛选的菌株计数时选择菌落数为30~300的平板进行计数 ‎12．为了分离某种微生物，实验室配制的培养基成分如下：葡萄糖、氯化钠、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水和尿素溶液。下列叙述错误的是（ ）‎ A．葡萄糖的作用是提供碳源并调节渗透压 B．配制该培养基时，必须使用无菌水 C．加入尿素溶液之前，需先调好PH D．培养基能用于分离以尿素为氮源的微生物 ‎13．下列关于胡萝卜组织培养的分析，错误的是（ ）‎ A．胡萝卜切段消毒后需立即用无菌水清洗 B．用形成层进行培养是因为这部分容易诱导脱分化 C．适宜光照有利于愈伤组织的形成和再分化 D．组织培养依据的原理是植物细胞的全能性 ‎14．关于植物组织培养技术的叙述正确的是 A．用于培养的材料不一定需要离体 B．植物可光合作用合成有机物，培养基中不需加入含碳有机物 C．愈伤组织可制造成人工种子 D．脱分化和再分化都需要培养基中生长素和细胞分裂素刺激、诱导 ‎15．下列关于植物组织培养及其利用的叙述，正确的是（    ）‎ A．对外植体进行严格灭菌后再进行组织培养可获得脱毒苗 B．以人工膜包裹植物愈伤组织和营养物质可制得人工种子 C．生长素、细胞分裂素的共同调节作用在组织培养中非常重要 D．以一株植物的叶片或花药为外植体培育的植株基因型相同 ‎16．以下不能说明细胞具有全能性的是（ ）‎ A．胡萝卜韧皮部细胞培育成植株 B．无心插柳柳成荫 C．转入抗虫基因的棉花细胞培育成植株 D．利用花药离体培养得到单倍体植株 ‎17．某同学用鸡血进行DNA粗提取和鉴定实验。下列有关叙述正确的是（ ）‎ A．可用兔血代替鸡血进行实验 B．在鸡血细胞中加入蒸馏水后用玻璃棒轻缓搅拌 C．实验前需要预先配制好2mol/L和0．14mol/L两种NaCl溶液 D．鉴定时，两支试管中都应加入等量的NaCl溶液和二苯胺试剂 ‎18．在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是 A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L，滤去析出物 B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质 C．将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色 D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同 ‎19．以洋葱为材料进行DNA的粗提取与鉴定实验，相关叙述错误的是(　　)‎ A．研磨洋葱时加入洗涤剂的作用是瓦解细胞壁，有利于细胞破裂 B．向含DNA的滤液中加入2mol·L－1的NaCl溶液有利于去除杂质 C．向含DNA的滤液中加入嫩肉粉有利于去除蛋白质，获得较纯净DNA D．用二苯胺试剂鉴定DNA时进行沸水浴，有利于显色反应的发生 ‎20．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是(　　)‎ ‎①提取细胞中的DNA必须用蒸馏水涨破细胞 ‎②用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质 ‎③常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取 ‎④将丝状物加入二苯胺试剂，沸水浴冷却后呈蓝色 ‎⑤DNA既溶于2 mol/L的NaCl溶液，也溶于蒸馏水 ‎⑥含DNA的滤液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质 A．①②③⑤ B．②③④ C．②③⑤⑥ D．④⑤⑥‎ ‎21．PCR 仪实质上是一台自动调控温度的仪器，它调控不同温度的目的是（ ）‎ ‎① 90～95℃，使 DNA 分子变性而失去生物活性 ‎② 90～95℃，使 DNA 分子变性而解开双螺旋结构 ‎ ‎③ 55～60℃，使 DNA 分子开始复制、延伸 ‎④ 55～60℃，使 DNA 分子恢复双螺旋结构，恢复活性 ‎ ‎⑤ 70～75℃，使 DNA 分子开始复制、延伸 ‎⑥ 70～75℃，使 DNA 分子恢复双螺旋结构，恢复活性 A．① ③ ⑤ B．② ③ ⑤ C．② ④ ⑤ D．② ④ ⑥‎ ‎22．当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能开始延伸DNA子链，则延伸的方向是 A．从5′端延伸DNA子链 B．DNA的合成方向总是从5′端向3′端延伸 C．子链延伸的方向是5′→3′或3′→5′‎ D．DNA的合成方向总是从3′端向5′端延伸 ‎23．聚合酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是 A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键 B．PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高 C．延伸过程需要的是耐高温的DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸 D．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 ‎24．物质W是一种含氮有机物，W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌，结果如图。下列说法错误的是（　　）‎ A．透明圈的形成是因为W物质被分解 B．所用的选择培养基应该是以物质W为唯一氮源 C．甲菌落中的细菌可能是利用空气中的氮气作为氮源 D．乙菌落中的细菌都能降解W，不需要进一步纯化 ‎25．微生物的实验室培养，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵。下列无菌操作中，错误的是（　　）‎ A．对实验用的培养基，采用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌 B．对锥形瓶、塞上棉塞的试管、吸管等，用干热灭菌箱进行灭菌 C．对操作者的双手、衣着以及操作空间等，采用紫外线进行消毒 D．对试管口、锥形瓶口等部位，通过火焰灼烧进行灭菌 第II卷（非选择题)‎ 请点击修改第II卷的文字说明 二、综合题 ‎26．油轮泄漏会造成严重的环境污染，吸油菌可将原油分解为无机物，从而消除原油泄漏造成的海水污染。某科研小组欲筛选分离能高效降解海水中原油的菌株进行以下实验操作。回答下列问题。‎ ‎（1）采集样品与选择培养：从___ 中采集样品；然后将样品适当稀释后接种于液体培养基中富集，从培养基的成分来看，应以 ___为碳源，从培养基的理化性质来看，应使用 ___水来配制该培养基。进行选择培养的目的是____。‎ ‎（2）鉴别培养与筛选：将选择培养后的样品涂布培养于起选择或鉴别作用的培养基上。培养得到单菌落，有些单菌落周围出现较大的分解圈，有些单菌落虽然长势良好，但周围不出现分解圈。后者菌落出现的原因是___________ ‎ ‎（3）微生物长势的测定：微生物数目的测定可以使用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法，两种测定方法各有特点。与显微镜直接计数法相比，下列选项中属于稀释涂布平板法的特点是 ___（填序号）。‎ ‎①操作简便快捷②操作复杂耗时长 ③测量活菌数准确度高 ④测量总菌数准确度 较高 ‎27．由于多数植物的根系没有固氮能力，所以在农业生产中往往要施用氮肥来提高产量。研究表明土壤中的固氮菌具有固氮能力，为筛选并统计其数量，某兴趣小组利用下列培养基进行了相关研究。‎ 培养基：葡萄糖（‎10g）、KH2PO4（0．‎2g）、MgSO4（0．‎2g）、NaCl（0．‎2g）、CaSO4（0．‎2g）、CaCO3（‎5g）、琼脂（3．‎5g）蒸馏水（‎1L）。‎ 回答下列问题：‎ ‎（1）植物利用氮肥合成含氮有机物，以满足自身生长发育的需要，试列举出存在于叶绿体内的含氮有机物___________（答出三种即可）。‎ ‎（2）上述培养基从物理性质来区分应属于___________培养基，在此培养基上酵母菌不能生长，其原因是______________________。‎ ‎（3）若利用该培养基对固氮菌进行计数，应采用的方法是___________。培养一段时间后若继续培养，则固氮菌的数量将___________，其原因是______________________。‎ ‎（4）获得的菌种要进行临时保存，每几个月都要重新将菌种从旧培养基转移到新鲜的培养基，这样频繁地操作容易使菌种______________________。‎ ‎28．下表为某种微生物培养基的配方。‎ 成分 KH2PO4‎ Na2HPO4‎ MgSO4．7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 含量 ‎1．‎‎4g ‎2．‎‎1g ‎0．‎‎2g ‎10．‎‎0g ‎1．‎‎0g ‎15．‎‎0g 请回答相关问题：‎ ‎（1）培养基中的KH2PO4和Na2HPO4的作用有____（答出两点即可）。‎ ‎（2）依物理性质，该培养基属于____培养基，依功能看，该培养基属于____培养基。‎ ‎（3）分解尿素的细菌才能在该培养基上生长，原因是____。‎ ‎（4）甲、乙两名同学分别用不同方法对某一土壤样品中的尿素分解菌进行分离纯化，结果如下图。‎ ‎①甲同学在平板划线操作的第一步之前、每次划线之前、划线结束时都要灼烧接种环，请问每次划线之前灼烧接种环的原因是____。‎ ‎②乙同学采用的方法是 ___，接种时操作的失误可能是 ___。‎ ‎29．一个由英国伦敦帝国学院和芬兰图尔库大学的科学家组成的研究小组日前开发出一种通过大肠杆菌制造丙烷的新技术。科研人员要对大肠杆菌进行研究和利用，需要对大肠杆菌进行培养、分离、鉴定与计数等，请结合所学知识，回答下列问题：‎ ‎（1）培养基配制时需要对培养基进行灭菌，采用的方法是_____________，实验室常用的三种消毒方法的名称是__________________________。在接种前通常需要检测固体培养基是否被污染，检测的方法是__________________________。‎ ‎（2）图1所示的方法是_____________，对分离得到的大肠杆菌可通过观察菌落的_____________进行形态学鉴定。在5个平板上分别接入0．1mL稀释液，经适当培养后，5个平板上菌落数分别是19、61、64，65和66，则‎1g土壤中的活菌数约为___________个。‎ ‎（3）图2是某同学利用不同于图1方法分离菌株的示意图。下列对其操作的叙述正确的有_____________。‎ a．操作前用无水乙醇对双手进行消毒处理 b．不能将第⑤区域的划线与第①区域的划线相连 c．整个过程需要对接种环进行6次灼烧 d．平板划线后培养微生物时要倒置培养 ‎30．为调查某地土质状况，科研小组对该地土壤中分解尿素的细菌进行了分离和纯化培养。请回答下列问题。‎ ‎（1）土壤中的尿素不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成____后，才能被植物利用。‎ ‎（2）为筛选出分解尿素的细菌，应配制____的培养基以达到选择的作用。分解尿素的细菌不能以CO2作为碳源，但可用葡萄糖作为碳源，由此推测分解尿素的细菌是 ___（填“自养”或“异养”）型生物。配制好的培养基需经过高压蒸汽灭菌，在装入待灭菌物品时，不要摆得太挤，以免____。‎ ‎（3）对不同深度土壤取样统计菌落数目时，一般采用____方法接种，接种后需每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止____。对分离得到的分解尿素的菌种作进一步的鉴定，需加入____，如果pH____，指示剂将变红，可以初步鉴定该细菌能够分解尿素。‎ 参考答案 ‎1．C ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。‎ ‎【详解】‎ A、果酒制作的适宜温度一般控制在18-‎-25℃‎度，果醋制作的适宜温度为30-‎-35℃‎，A正确；‎ B、果酒制作后期需要无氧环境，果醋制作需要有氧环境，B正确；‎ C、果酒改制果醋时无需更换培养液中的营养成分，C错误；‎ D、检测产生果酒（酒精）的简单方法是用酸性条件下的重铬酸钾检测；检测产生果醋（醋酸）的简单方法是 嗅味和品尝进行初步鉴定，再检测和比较发酵前后的pH变化进一步确认，D正确。‎ 故选C。‎ ‎【点睛】‎ 解答此题要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒和果醋制作的原理及条件，能结合所学的知识准确判断各选项。‎ ‎2．B ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 果酒制作的菌种是酵母菌，酵母菌是兼性厌氧的真核生物；果醋制作的菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，且是原核生物，无核膜包被的细胞核；泡菜制作的菌种是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，且是原核生物。‎ ‎【详解】‎ A、果酒制作过程中不能反复冲洗葡萄，以免葡萄皮上的酵母菌丢失，A错误；‎ B、控制好温度和酸碱度给目的菌创造适宜的环境条件，既有利于目的菌的繁殖，又可抑制杂菌的生长，B正确；‎ C、制作果醋和泡菜的主要微生物分别是醋酸菌、乳酸菌，它们都是原核生物，但呼吸类型不同，醋酸菌是好氧菌，乳酸菌是厌氧菌，C错误；‎ D、传统发酵的操作过程中进行消毒处理，但没有进行灭菌处理，D错误。‎ 故选B。‎ ‎3．B ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ ‎（1）泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。‎ ‎（2）泡菜的制作流程如下图：‎ ‎【详解】‎ A、在自然界中，乳酸菌分布广泛，空气，土壤，植物体表，人和动物的肠道内都分布有乳酸菌，A错误；‎ B、乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸的过程是无氧呼吸过程，只在其细胞质基质内即可完成，B正确；‎ C、在坛沿水已干涸的泡菜坛内，液体表面出现“生花”、“长膜”，这主要是兼性厌氧的真核生物——酵母菌形成的，C错误；‎ D、在配置泡菜水时，应先按照水∶盐=4∶1 的比例配置盐水，然后再煮沸冷却，D错误。‎ 故选B。‎ ‎4．D ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 测定亚硝酸盐含量的方法是比色法，其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。据此答题。‎ ‎【详解】‎ A、实验必须设置一组不含亚硝酸盐的比色管作为空白对照组，A正确； ‎ B、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，B正确； ‎ C、重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，C正确； ‎ D、显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量，D错误。 ‎ 故选：D。‎ ‎【点睛】‎ 本题考查泡菜的制作，对于此类试题，需要考生识记参与泡菜制作的微生物及其代谢类型，掌握泡菜的制作的原理及条件，掌握测定亚硝酸盐的方法及原理，能结合所学的知识准确判断各选项。‎ ‎5．B ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 泡菜制作的实验原理： （1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。 （2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。‎ 温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。 （3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。‎ ‎【详解】‎ 参与泡菜制作的乳酸菌是厌氧型微生物，因此泡菜腐烂的原因可能是罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖，促进了其他需氧型腐生菌的生长和繁殖。综上分析，B正确，ACD错误。‎ 故选B。‎ ‎6．B ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。‎ ‎【详解】‎ A、已灭菌的接种环在每次划完一个区域后都要进行灭菌，进行下一个区域的划线，而划线完毕后仍然需要灭菌，因此在操作过程中仍需多次灭菌，A正确；‎ B、打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后还需通过火焰灭菌，再塞上棉塞，B错误；‎ C、将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，再盖上培养皿盖，防止空气中杂菌混入，C正确；‎ D、最后将平板倒置，以防止盖子水滴落引起污染，同时也有利培养基中水的蒸发，然后放入培养箱培养，D正确。‎ 故选B。‎ ‎7．B ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 微生物培养的关键是无菌操作，常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌和干热灭菌等。‎ ‎①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；‎ ‎②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；‎ ‎③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为‎121℃‎的条件下，维持15～30 min。‎ ‎【详解】‎ A、在细菌接种的前后都需要灼烧接种环，A错误；‎ B、高压蒸汽灭菌一般用于培养基的灭菌，而在细菌接种过程中不需要高压蒸汽灭菌，B正确；‎ C、细菌接种过程应该在超净工作台上操作，以防止杂菌的污染，C错误；‎ D、细菌接种过程应该在酒精灯火焰附近进行，以防止杂菌的污染，D错误。‎ 故选：B。‎ ‎8．C ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 该题本质上属于实验题，本题设置了三个实验组，自变量是培养基上添加的物质类型，因变量是培养皿上的细菌克隆数，题干要求通过对表格中各组的对比得出“能说明大肠杆菌生长需要碳源”这一实验结论。‎ ‎【详解】‎ A、培养皿Ⅰ和Ⅲ这两个组别的自变量并不唯一，培养皿Ⅰ中添加了糖类，没有维生素，但培养皿Ⅲ没有糖类但是有维生素，两组实验数据上的差别不能判断是由谁导致的，A错误；‎ B、培养皿Ⅰ和Ⅱ相互对比，自变量为维生素的有无，可以证明维生素有利于大肠杆菌的生长，B错误；‎ C、培养皿Ⅱ和Ⅲ相互对比，自变量为糖类的有无，通过观察实验结果可知，没有糖类大肠杆菌无法生存，所以可证明大肠杆菌的生长需要碳源，C正确；‎ D、单一的培养皿Ⅲ上没有长出菌落，不能判断到底是何原因导致的，无法证明实验结论，D错误；‎ 故选C。‎ ‎9．D ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 微生物的营养物质有：水、碳源、氮源、无机盐、生长因子。 1、碳源是指凡能为微生物提供所需碳元素的营养物质，①主要用于构成微生物体细胞的物质和一些代谢产物，②异养微生物的主要能源物质。 2、氮源是指凡能为微生物提供所需氮元素的营养物质。 3、无机盐对微生物的生理功能有：构成微生物细胞的组成成分；作为酶的组成成分，也是某些酶的激活剂；调节和维持微生物细胞的渗透压和pH；某些无机盐具有特殊功能，如化能自养细菌的能源物质NH4+等。 4、微生物生命活动不可缺少，而微生物自身又不能合成的微量有机物称为生长因子。‎ ‎【详解】‎ A、碳源是指凡能为微生物提供所需碳元素的营养物质，如题目中的蛋白胨、牛肉膏，A错误； B、氮源是指凡能为微生物提供所需氮元素的营养物质，如题目中蛋白胨、牛肉膏，B错误； C、培养基中的氯化钠属于无机盐，C错误； D、微生物生命活动不可缺少，而微生物自身又不能合成的微量有机物称为生长因子，微量的维生素属于生长因子，D正确。 ‎ 故选D。‎ ‎10．D ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 依题文可知，本实验需用固体培养基，实验自变量是教室相同地点的不同高度，以此相关知识做出判断。‎ ‎【详解】‎ A、平板为固体培养基，故需要加入琼脂等凝固剂成分，A正确；‎ B、根据实验目的可知，自变量是教室相同地点的不同高度，所以需将平板培养基放置在教室相同地点的不同高度，B正确；‎ C、本实验需要设置不开盖的平板培养基作为对照，不同高度下放置开盖平板培养基进行实验，C正确；‎ D、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，D错误。‎ 故选D。‎ ‎11．C ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 微生物常见的接种的方法 ‎①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养，在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。‎ ‎②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。‎ ‎【详解】‎ A、初次划线灼烧的目的是防止杂菌污染，其后划线后灼烧的目的是杀死上次划线结束后残留在接种环上的菌种，使下一个区域的菌种只来自上一个区域的末尾，最后一次灼烧的目的是防止菌体污染环境，A错误；‎ B、接种霉菌之前，培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，B错误；‎ C、产蛋白酶的霉菌利用的底物是蛋白质，因此，培养基中需加入一定量的蛋白质，C正确；‎ D、平板划线法不能对菌落进行计数，D错误。‎ 故选C。‎ ‎【点睛】‎ 本题只需考生掌握平板划线法的基本操作即可，对微生物的计数采用稀释涂布平板法。‎ ‎12．B ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 刚果红染液可以与纤维素结合形成红色的复合物，在培养基中进入刚果红染液可以鉴别纤维素分解菌，其产生的纤维素酶能够将纤维素分解为葡萄糖而使其菌落周围出现透明圈。‎ ‎【详解】‎ A、葡萄糖是主要的能源物质，培养基中的葡萄糖的作用是为微生物提供碳源并调节渗透压，A正确； ‎ B、由于配制完成的培养基还需要高压蒸汽灭菌，所以配置培养基时不必使用无菌水，B错误；‎ C、尿素在酸、碱的作用下易水解生成氨和二氧化碳，所以制备培养基时应在加入尿素溶液之前，需先调好PH，C正确； ‎ D、该培养基中唯一的氮源是尿素，只有能利用尿素为氮源的微生物才能在此培养基上生长，故能用于分离以尿素为氮源的微生物，D正确。‎ 故选B。‎ ‎13．C ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。‎ 植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）。②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。‎ ‎【详解】‎ A、在组织培养过程，要注意培养环境的无菌、无毒，在胡萝卜切段消毒30s后，需立即用无菌水清洗2～3次，A正确；‎ B、形成层细胞分裂能力较强，分化程度低全能性较高容易诱导脱分化，B正确；‎ C、愈伤组织细胞形成过程中需避光培养，C错误；‎ D、植物组织培养过程是以离体的组织或细胞培育成完整的植株，因此其依据的原理是植物细胞的全能性，D正确。‎ 故选C。‎ ‎14．D ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ ‎【详解】‎ A、只有脱离母体的植物细胞、组织或器官才能用于组织培养，A错误；‎ B、植物在培养早期无法进行光合作用合成有机物，因此培养基中还要加入蔗糖等有机物，B错误；‎ C、愈伤组织再分化形成的胚状体包裹上种皮后可制造成人工种子，C错误；‎ D、脱分化和再分化都需要培养基中生长素和细胞分裂素刺激、诱导，D正确。‎ 故选D。‎ ‎15．C ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 植物组织培养：‎ ‎1.过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）经过脱分化形成愈伤组织，然后经过再分化形成胚状体或者丛芽，胚状体或丛芽继续分裂分化形成植株（新植体）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。‎ ‎2.原理：植物细胞的全能性。‎ ‎3.应用：植物繁殖的新途径（快速繁殖优良品种、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种和突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。‎ ‎【详解】‎ A、离体的植物组织、器官或细胞必需经过消毒才能接种到组织培养基中，A错误；‎ B、以人工膜包裹植物胚状体和营养物质可制得人工种子，B错误；‎ C、决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，尤其是生长素和细胞分裂素的协同调节作用在组织培养中非常重要，C正确；‎ D ‎、以一株植物的叶片为外植体培育的植株基因型相同，而以花药为外植体培育的植株基因型不一定相同，D错误；‎ 故选C。‎ ‎16．B ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 本题考查细胞全能性的概念及实例。细胞全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。细胞具有全能性的原因是细胞具有该生物全部的遗传物质。细胞的全能性以产生个体为标志，若无个体产生，不能体现细胞的全能性，如采用植物组织培养法将杂种细胞培养成杂种植株体现了植物细胞的全能性。据此答题。‎ ‎【详解】‎ A、萝卜韧皮部细胞培育出植株是植物组织培养，体现植物细胞的全能性，A错误； B、无心插柳柳成荫属于扦插繁殖，不是由单个细胞发育成完整的个体，不能体现细胞的全能性，B正确； C、转基因的棉花细胞培育成植株体现了植物细胞的全能性，C错误； D、花粉培育成植株，需要借助于植物组织培养的手段，体现了花粉细胞的全能性，D错误。 故选B。‎ ‎17．D ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ ‎1．DNA粗提取和鉴定的原理： （1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。 （2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 2．DNA粗提取和鉴定的过程： （1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。 （2）破碎细胞，获取含DNA的滤液： 动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA 时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。 （3）去除滤液中的杂质： 方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。 方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离。 （4）DNA的析出与鉴定 ①将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。 ②取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。‎ ‎【详解】‎ A、哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核，提取不到DNA，A错误； ‎ B、鸡血细胞液中加入蒸馏水后，用玻棒搅拌，使细胞吸收涨破，过滤后收集滤液，B错误；‎ C、实验前需要预先配制好2mol/LNaCl溶液就可以，加水稀释得到0.14mol/L，C错误；‎ D、鉴定时，两支试管中都应加入等量的NaCl溶液和二苯胺试剂，D正确。‎ 故选D。‎ ‎18．B ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ DNA的粗提取与鉴定的实验原理：①DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA；③洗涤剂能瓦解细胞膜但是对DNA没有影响；④蛋白质不能耐受较高温度，在‎80℃‎条件下会变性，而DNA对温度的耐受性较高；⑤蛋白酶能水解蛋白质，而对DNA没有影响；⑥DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。‎ ‎【详解】‎ A、DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，DNA存在于析出物中，不能去掉析出物，A错误；‎ B、利用DNA在不同氯化钠溶解中的溶解度不同，可以通过DNA的反复溶解和析出除去杂质，蛋白酶能水解蛋白质，而对DNA没有影响，因此可以利用木瓜蛋白酶除去杂蛋白，B正确；‎ C、用二苯胺试剂检测DNA分子的条件是水浴加热，C错误；‎ D、植物细胞有细胞壁保护着，所以用菜花做实验材料时，需要研磨，加入食盐和洗涤剂，D错误。‎ 故选B。‎ ‎【定位】‎ DNA的粗提取和鉴定 ‎19．A ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ ‎1、DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性；（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色；2、DNA粗提取和鉴定的过程：（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大；（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液：动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可，如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜，例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。（3）去除滤液中的杂质；（4）DNA的析出与鉴定：粗提取的DNA与二苯胺试剂，混合均匀后变蓝。‎ ‎【详解】‎ 研磨洋葱时加入洗涤剂的作用是瓦解细胞膜，有利于细胞破裂，A错误；向含DNA的滤液中加入2mol·L－1的NaCl溶液有利于去除杂质，B正确；通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能破坏其中的蛋白质，获得较纯净DNA，C正确；用二苯胺试剂鉴定DNA时进行沸水浴，有利于显色反应的发生，D正确；故选A。‎ ‎【点睛】‎ 本题考查DNA的粗提取和鉴定实验，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。‎ ‎20．C ‎【解析】‎ ‎【分析】本题考查DNA粗提取与鉴定实验的相关内容。主要考察学生的识记能力。‎ ‎【详解】提取植物细胞中的DNA需要用研磨的方法破坏细胞，①错误；用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质，②正确；常温下菜花匀浆中有些酶类会破坏DNA，影响DNA的提取，③正确；将丝状物溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂，沸水浴冷却后呈蓝色，④错误； DNA既溶于2 mol/L的NaCl溶液，也溶于蒸馏水，⑤正确；含DNA的滤液中加入少许嫩肉粉，其中的木瓜蛋白酶有助于去除杂质，⑥正确。综上所述，答案选C。‎ ‎【点睛】丝状DNA分子的鉴定，需要将其溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，与二苯胺反应，不能直接加入二苯胺中。‎ ‎21．C ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ PCR技术：‎ 概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。‎ 原理：DNA复制。‎ 前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。‎ 条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。‎ PCR过程一般经历下述三十多次循环：‎95℃‎下使模板DNA变性、‎55℃‎下退火（引物与DNA模板链结合）、‎72℃‎下延伸。‎ ‎【详解】‎ ‎①②90～95℃高温变性，使DNA分子变性，解开螺旋，①错误，②正确；‎ ‎③④55～60℃低温复性，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性，③错误，④正确；‎ ‎⑤⑥70～75℃中温延伸，使DNA分子开始复制、延伸，⑤正确，⑥错误。‎ ‎②④⑤正确，C正确，ABD错误，‎ 故选C。‎ ‎【点睛】‎ 本题考查PCR技术的相关知识，比较基础，只要考生识记PCR技术的具体过程即可正确答题，属于考纲识记层次的考查。‎ ‎22．B ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ ‎【详解】‎ DNA复制方向：DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链，故DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5′ 端向3′端延伸。故选B。‎ ‎23．C ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 本题考查PCR技术有关知识；DNA的两条链是反向平行的，通常将含有游离的磷酸基团的末端称为5′端，而DNA聚合酶从引物的3′开始延伸DNA链；在体外扩增DNA时不用解旋酶而是用热变性处理的方法打开DNA双链，因此需要使用耐高温的DNA聚合酶；PCR的每次循环可以分为变性、复性和延伸三个步骤，n次循环后得到2n个DNA片段。‎ ‎【详解】‎ 变性过程中利用‎95℃‎高温破坏DNA分子内碱基对之间的氢键，A正确；细胞内DNA复制是在生物体内完成，故其最适温度是生物体温，而PCR技术的温度是不断循环变化的，且温度较高，B正确；延伸过程需要的是耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸，核糖核苷酸是RNA合成的原料，C错误；引导子链合成的引物是单链DNA片段，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成，D正确。故选C。‎ ‎24．D ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 筛选培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或对某些化学、物理因素的抗性而设计的，能选择性地区分这种微生物的培养基。利用选择培养基，可使混合菌群中的目标菌种变成优势种群，从而提高该种微生物的筛选效率。‎ ‎【详解】‎ A、W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明，因此透明圈的形成是因为W 物质被分解，A正确；‎ B、要筛选出能降解W的细菌，所用的选择培养基应该是以物质W为唯一氮源，B正确；‎ C、该培养基以W物质为唯一氮源，而甲菌落周围未出现透明圈，因此甲菌落中的细菌可能是利用空气中的氮气作为氮源，C正确；‎ D、乙菌落中的细菌不一定都能降解W，因此仍需要进一步纯化，D错误。‎ 故选D。‎ ‎【点睛】‎ 本题考查筛选培养基的配置和使用，针对不同要求的目标菌种，选择不同物质配制不同筛选作用的培养基。并且要求学生理解识别目标菌种筛选的现象，判断筛选结果。‎ ‎25．C ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌是常用的防止杂菌入侵的方法，微生物的实验室分离的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，通过不同方式的稀释，最终分离得到由单个细菌繁殖而来的菌落。‎ ‎【详解】‎ A、对实验用的培养基，采用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，A正确；‎ B、对锥形瓶、塞上棉塞的试管、吸管等，用干热灭菌箱进行灭菌，B正确；‎ C、对操作者的双手采用酒精进行消毒，C错误；‎ D、对试管口、锥形瓶口等部位，通过火焰灼烧进行灭菌，D正确。‎ 故选C。‎ ‎【点睛】‎ 此题主要考查的是微生物的分离和培养中各种消毒、灭菌处理方法的选择的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握。‎ ‎26．受原油污染的海水 原油 海（或与海水渗透压相同的盐） 增加吸油菌的浓度，以确保能够从样品中分离得到所需的吸油菌 这些菌落能够产生分解原油的胞内酶，且酶含量或活性较高 ②③ ‎ ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 欲筛选出能降解原油的菌株，培养基中应只含有原油而无其它碳源，不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存。分离纯化菌种时，需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈（透明圈）越大。‎ ‎【详解】‎ ‎（1）欲筛选出能降解原油的菌株，从受原油污染的海水中采集样品。在筛选高效降解原油的菌株过程中，应将样品稀释液接种于以原油为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于选择培养基。从培养基的理化性质来看，应使用海水来配制该培养基。进行选择培养的目的是，增加吸油菌的浓度，以确保能够从样品中分离得到所需的吸油菌。‎ ‎（2）培养得到的单菌落中的细菌都是能降解原油的，如果细菌降解原油的酶在细胞外，则菌落周围出现较大的分解圈。如果细菌降解原油的酶在细胞内，且酶含量高，则单菌落周围不出现分解圈。‎ ‎（3）用稀释涂布平板法统计菌落数目时，操作复杂耗时长，测量活菌数目准确度较高。但是有些细菌靠在一起，形成一个菌落，这样统计的菌落数往往比活菌的实际数目少；显微镜直接计数法统计微生物数目时，操作简单，由于不能排除死细胞的数量，所以统计的数目往往偏高。用稀释涂布平板法于显微直接计数相比，特点是②③。‎ ‎【点睛】‎ 本题的知识点是微生物培养过程中的培养基的制备，分离微生物的常用的接种方法，考生能理解所学知识的要点，关键是运用所学过的知识点“透明圈”，进行知识点的迁移、类比，然后解决问题。‎ ‎27．ATP（ADP）、酶、 NADPH（还原性辅酶Ⅰ或NADP+）、叶绿素、磷脂等 固体 缺少酵母菌生长所需的氮源 稀释涂布平板法 下降 固氮菌因缺乏碳源而不能增殖 被污染或产生变异 ‎ ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ ‎1、培养基按功能分：‎ 种类 制备方法 特征 用途 选择培养基 培养基中加入某种化学成分 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率 鉴别培养基 加入某种试剂或化学药品 依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计 鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌 ‎2、纯化微生物常用的方法 ①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。 ②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。‎ ‎【详解】‎ ‎（1）蛋白质的组成元素是C、H、O、N等，核酸、磷脂、ATP的组成元素是C、H、O、N、P，植物利用氮肥合成含氮有机物，以满足自身生长发育的需要，试列举出存在于叶绿体内的含氮有机物ATP（ADP）、酶、 NADPH（还原性辅酶Ⅰ或NADP+）、叶绿素、磷脂等。‎ ‎（2）上述培养基从物理性质来区分，培养基的成分含琼脂（3．‎5g），应属于固体培养基；在此培养基上酵母菌不能生长，其原因是缺少酵母菌生长所需的氮源。‎ ‎（3）平板划线法不能用来进行菌落计数，若利用该培养基对固氮菌进行计数，应采用的方法是稀释涂布平板法。培养一段时间后若继续培养，由于培养基中的碳源等物质是有限的，固氮菌因缺乏碳源而不能增殖，导致固氮菌的数量将下降。‎ ‎（4）获得的菌种要进行临时保存，每几个月都要重新将菌种从旧培养基转移到新鲜的培养基，这样频繁地操作容易使菌种被污染或产生变异。‎ ‎【点睛】‎ 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及功能；识记培养基的制作过程，能结合题中信息准确答题。‎ ‎28．提供无机营养、维持pH稳定 固体 选择 能合成脲酶 杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端 稀释涂布平板法 涂布不均匀 ‎ ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ ‎1、微生物常见的接种的方法 ‎①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。‎ ‎②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。‎ ‎2、分解尿素的细菌可以合成的脲酶将尿素分解成氨和二氧化碳。‎ ‎3、培养基的种类：按物理性质可以分为固体培养基和液体培养基，按功能可以分为选择培养基和鉴别培养基。‎ ‎【详解】‎ ‎（1）KH2PO4和Na2HPO4可以为微生物生长提供无机营养并维持pH稳定。‎ ‎（2）该培养基含有琼脂，所以从物理性质上属于固体培养基；从功能上来看，该培养基以尿素作为唯一氮源，所以是选择培养基。‎ ‎（3）该培养基以尿素作为唯一氮源，而分解尿素的细菌可以产生脲酶将尿素分解，所以可以在该培养基上生长。‎ ‎（4）①甲同学是用的平板划线法，每次划线之前灼烧接种环的目的是杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。‎ ‎②乙同学采用的接种方法稀释涂布平板法，从菌落生长情况来看，菌落在平板上分布不均匀，可能的原因是涂布不均匀。‎ ‎【点睛】‎ 本题考查了微生物的分离和培养的有关知识，要求考生掌握利用培养基对微生物进行选择和鉴定的方法和原理，重点是对于平板划线法操作的理解。‎ ‎29．高压蒸汽灭菌 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒 将未接种的培养基放在恒温箱中培养 稀释涂布平板法 形状、颜色、大小、隆起、边缘、透明度、光泽等特征 bcd ‎ ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ 微生物常见的接种的方法：①‎ 平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。菌落数计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。‎ ‎【详解】‎ ‎（1）培养基配制时需要对培养基进行灭菌，采用的方法是高压蒸汽灭菌，实验室常用的三种消毒方法的名称是：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒。在接种前通常需要检测固体培养基是否被污染，检测的方法是：将未接种的培养基放在恒温箱中培养，观察是否有菌落形成。‎ ‎（2）由图1的操作流程可以看出，图1所示方法为：稀释涂布平板法，对分离得到的大肠杆菌可通过观察菌落的形状、颜色、大小、隆起、边缘、透明度、光泽等特征进行形态学鉴定。利用稀释涂布平板法测定细菌数时，筛选平板上的菌落数为30～300，所以‎1g土壤中的活菌数为个。‎ ‎（3）图2是通过平板划线接种操作。‎ a、操作前用70%的酒精溶液对接种人员的双手进行消毒处理，a错误；‎ b、在划线操作时不能将最后一区的划线与第一区相连，因此不能将第⑤区域的划线与第①区域的划线相连，正确；‎ c、在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，整个过程需要对接种环进行6次灼烧，c正确；‎ d、由于正放培养平板盖子上的冷凝水会顺着流到培养基上和外面，引起杂菌污染，因此平板划线后培养微生物时要倒置培养，并且倒置有利于菌体呼吸，d正确。‎ 故选bcd。‎ ‎【点睛】‎ 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记接种微生物常用的两种方法；掌握鉴定微生物分解菌的原理，能结合图中信息准确答题。‎ ‎30．氨（或NH3） 以尿素为唯一氮源 异养 妨碍蒸汽流通 稀释涂布平板法 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目 酚红指示剂 升高 ‎ ‎【解析】‎ ‎【分析】‎ ‎1、微生物常见的接种的方法：‎ ‎（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。‎ ‎（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。‎ ‎2、培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，以尿素作为氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。‎ ‎【详解】‎ ‎（1）尿素是一种重要的农家肥，但尿素不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨后，才能被植物利用。‎ ‎（2）为筛选出分解尿素的细菌，在配制培养基时应选择以尿素作为唯一氮源。分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，但可用葡萄糖作为碳源，由此推测分解尿素的细菌是异养型生物。将装有培养基的灭菌包装入高压蒸汽灭菌锅时，注意不要装得太挤，以免因影响蒸汽流通而影响灭菌的效果。‎ ‎（3）需要对菌落进行计数时，需要采用的接种方法是稀释涂布平板法。菌落的培养一般每隔24h统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养后，若pH升高，出现红色就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。‎ ‎【点睛】‎ 本题考查尿素分解菌的分离和培养，要求考生识记培养基的成分及种类；识记分离微生物的两种常用方法；识记培养基选择分解尿素的微生物的原理，能结合所学的知识准确答题。‎